王为 作品数:4 被引量:10 H指数:2 供职机构: 第三军医大学新桥医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
超抗原SEB对角质形成细胞糖皮质激素受体的作用研究 被引量:1 2016年 目的探讨超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)对人永生化角质形成细胞(Ha Ca T细胞)糖皮质激素受体表达及核转移的影响。方法采用不同浓度SEB作用于体外培养的Ha Ca T细胞,RT-PCR、Western blot分别检测Ha Ca T细胞糖皮质激素受体α、β(GRα、GRβ)m RNA、蛋白的表达;随后用SEB预处理Ha Ca T细胞,地塞米松再作用Ha Ca T细胞8 h后,免疫荧光法检测Ha Ca T细胞GRα细胞内分布情况。结果 SEB作用Ha Ca T细胞后,其GRαm RNA、蛋白表达无明显变化,GRβm RNA、蛋白表达随SEB的浓度增高呈上升趋势,且在SEB质量浓度为100 ng/ml时达到最高值。10-6mol/L地塞米松作用8 h后能够诱导Ha Ca T细胞GRα由胞浆向胞核转移,该效应能够维持到24 h。与地塞米松组Ha Ca T细胞内GRα分布出现向核内转移现象不同,地塞米松+SEB组部分细胞GRα分布仍局限于胞质,并未出现核转移现象。结论 SEB可能通过诱导角质形成细胞GRβ表达上调及抑制地塞米松诱导的GRα由胞浆向胞核转移参与炎症性皮肤病外用糖皮质激素抵抗。 王为 黄珂 冉磊 刘莲 王玉娟 李元朝 何威 王儒鹏关键词:超抗原 SEB 糖皮质激素受体 糖皮质激素抵抗 细菌超抗原SEB抑制小鼠角质形成细胞糖皮质激素受体核转移的实验研究 被引量:3 2016年 目的探讨金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)对小鼠角质形成细胞糖皮质激素受体GRα核转移的影响。方法 1%二硝基氯苯重复刺激Balb/c小鼠背部皮肤构建变应性接触性皮炎动物模型,分别用SEB、地塞米松、SEB+地塞米松处理该模型鼠背部局部皮肤,处理48 h后HE染色计数真皮内炎性细胞数量,免疫荧光和Western blot法观察GRα在各组角质形成细胞的胞浆和核浆分布,ELISA法观察IL-2、4、13和TNF-α等炎症因子在各组的表达变化。结果 SEB处理后真皮内炎性细胞显著增加。地塞米松可显著减少炎性细胞数目,而SEB可部分拮抗地塞米松的抗炎作用;激光共聚焦显示正常角质形成细胞GRα主要存在于细胞浆,少量存在于胞核。地塞米松可显著增加GRα核/浆阳性比值,而SEB可显著减弱地塞米松诱导的GRα核/浆阳性比值;Western blot检测也显示地塞米松处理后GRα蛋白入核量显著增多,而SEB可显著抑制地塞米松诱导的GRα蛋白入核量,并增加GRα蛋白胞浆滞留;与正常组相比,皮炎组IL-2、4、13和TNF-α表达均显著升高,地塞米松可显著抑制各炎症因子增多,而SEB可显著拮抗地塞米松对炎性因子的抑制作用。结论 SEB在局部皮炎诱导的激素减敏与其抑制角质形成细胞GRα核转移障碍有关。 黄珂 冉磊 王为 刘莲 王玉娟 李冉 李元朝 王儒鹏关键词:SEB 糖皮质激素受体Α 细菌超抗原SEB对皮炎局部糖皮质激素受体β表达的影响 被引量:5 2015年 目的探讨金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)对于皮炎局部糖皮质激素受体β(GRβ)的影响。方法 1%DNCB重复刺激Balb/c小鼠背部皮肤构建特应性皮炎动物模型,以未经处理的模型小鼠为对照组,并分别用SEB、SEB+地塞米松、地塞米松处理该动物模型。通过H&E染色观察组织病理变化,计数真皮内炎性细胞数量来反映不同处理组皮炎的变化情况,采用q RT-PCR、Western blot和免疫组织化学方法检测糖皮质激素受体β(GRβ)的m RNA和蛋白表达。结果在利用DNCB构建的Balb/c小鼠特应性皮炎动物模型中,真皮内炎性细胞数量明显增加;与未经处理的皮炎组相比,SEB处理后炎性细胞显著增加,地塞米松处理后炎性细胞显著减少,但SEB可部分拮抗地塞米松的抗炎作用;此外,在SEB处理的皮炎组以及SEB+地塞米松处理的皮炎组,GRβm RNA和蛋白的表达均显著上调,但SEB单独处理的皮炎组GRβm RNA和蛋白的表达上调情况更为显著。结论细菌超抗原(SEB)在皮炎局部诱导了GRβ的表达升高,在外用糖皮质激素快速减敏过程中起到了重要的作用。 冉磊 何威 李昕 黄珂 王为 李冉 王儒鹏关键词:糖皮质激素 SEB 糖皮质激素受体Β 卤米松与他扎罗汀对角质形成细胞RAR-γ和RXR-α表达的影响 被引量:2 2016年 目的观察不同浓度卤米松和他扎罗汀对体外培养人永生化HaCaT角质形成细胞的维甲酸受体(RAR)-γ和维甲酸X受体(RXR)-α表达的影响,探讨卤米松对他扎罗汀治疗银屑病效应的潜在影响。方法 CCK-8方法检测不同浓度卤米松和他扎罗汀对HaCaT细胞增殖的影响;Western blot法和实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测不同浓度卤米松和他扎罗汀作用12h、24h后,HaCaT细胞中RAR-γ和RXR-α的mRNA水平和蛋白水平的变化。结果卤米松和他扎罗汀均可抑制角质形成细胞增殖。卤米松使HaCaT细胞的RAR-γ和RXR-αmRNA水平和蛋白水平升高。他扎罗汀作用后RAR-γ和RXR-α的mRNA水平降低,而蛋白水平在12h升高,24h降低。结论卤米松作用角质形成细胞后可上调RAR-γ和RXR-α表达,这可能有助于提高角质形成细胞对他扎罗汀作用的反应性,从而提高他扎罗汀的作用效应。 王玉娟 张斌 何威 王儒鹏 周春丽 刘莲 王为 黄珂关键词:银屑病 卤米松 他扎罗汀 HACAT细胞