吴永强
- 作品数：31 被引量：123H指数：5
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学环境科学与工程农业科学化学工程更多>>
- puc启动子上游DNA二元对称序列突变对Rhodobacter sphaeroides氧调节的影响
- 1996年
- 为了鉴定ｐｕｃＢＡ基因表达受氧调控的顺式调节位点，通过ＰＣＲ和多聚核苷酸定点、突变的体外操作，在ｐｕｃ转录子５＇上游非编码区产生了７个不同突变和５个不同１０ｂＰ缺失序列。构建了含有各种顺式突变的ｐｕｃ上游区、ｐｕｃ启动子和报告基因ｌａｃＺ的转录融合子。通过融合子β－半乳糖苷酶活性分析，发现位于ｐｕｃ启动子上游二元对称结构的突变使得ｐｕｃ基因在有氧条件下去阻遏表达。ＩＨＦ束缚位点的突变可使β－半乳糖苷酶活性提高。
- 吴永强
- 关键词：光合细菌
- 测定氢酶吸氢活性的光谱分析法被引量：2
- 1992年
- 固氮酶催化放氢是影响生物固氮效率的重要因素之一。经过吸氢酶吸收固氮酶释放的氢,一方面可以增加还原力来源,同时经氧化后可以消除系统内的氧,保护固氮酶免受氧伤害,从而提高固氮效率。测定氢酶吸氢的方法有多种,例如:同位素氚与水的交换法、检压法、电极法、气相层析法和光谱分析法。由于前三种方法操作较繁琐,目前国内较多的是使用气相层析法。
- 朱美珍吴永强
- 关键词：氢酶酶活性光谱分析
- 光合菌Rhodobacter sphaeroides 601 hupT基因的克隆与功能分析被引量：3
- 2001年
- 从紫色非硫光合细菌Rhodobactersphaeroides60 1的吸氢酶 (hup)基因簇中 ,克隆了hupT基因 ,并对该基因进行了测序 ,分析了由其推测的氨基酸序列的同源性。hupT基因全长 13 3 2bp ,编码一分子量约为 4 8.2 3kD的蛋白。将hupT基因引入大肠杆菌进行了体外表达。纯化基因产物HupT ,并进行HupT的自身磷酸化分析。结果表明 ,HupT属于双组份调节系统中的组氨酸蛋白激酶。将hupT基因导入光合菌Rhodobactercapsulatus吸氢酶负调节基因突变株BSE8后 ,野生型吸氢酶的表型得以恢复 ,说明所克隆的R .sphaeroides 60
- 徐冬青吴永强
- 关键词：光合细菌浑球红细菌吸氢酶基因克隆
- 光合细菌Rhodobacter sphaeroides glnBlacZ 融合子的构建与表达被引量：1
- 1999年
- 亚克隆了Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒ ｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ ｇｌｎＢ启动子，以ｐＭＰ２２０ 为载体构建成ｇｌｎＢｌａｃＺ融合子。将ｇｌｎＢｌａｃＺ、ｎｉｆＨｌａｃＺ、ｎｉｆＡｌａｃＺ分别导入Ｒ． ｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ 谷氨酸合酶突变株ｇｌｔＢ－ 、ｇｌｔＤ－ 和野生型菌株中，分析了突变对固氮基因转录表达的影响。试验证明，在ｇｌｔＢＤ 突变株中ｎｉｆＨ 的表达受阻遏，ｎｉｆＡ 表达水平很低。这证明ｇｌｔ 基因的突变引起固氮酶结构基因和固氮正调节基因的转录被阻遏，而ｇｌｎＢ 基因的表达几乎不受影响。试验还测定了环境中结合态氮和有机酸等信号分子对ｇｌｎＢ 和ｎｉｆＨ 表达的影响，发现加入氨或谷氨酰胺后，ｎｉｆＨ 的表达受到明显的阻遏作用，ｇｌｎＢｌａｃＺ的β半乳糖苷酶活性虽下降３０ ％ 左右但不随结合态氮浓度升高而变化，仍维持在一个较高的水平。α酮戊二酸和丙酮酸对ｎｉｆＨ
- 梁莉朱美珍吴永强
- 关键词：浑球红细菌融合子
- 浑球红细菌Rhodobacter sphaeroides吸氨酶(hup)基因簇的分离与鉴定
- 1998年
- 以Rhodobactercapsulatus的hopS’L基因DNA片段为探针，通过Southem杂交，从构建的Rhodobactersphaeroides601基因库中调取hup基因。阳性克隆Cosmid1可与Hup突变株JP91（HupS－）、RCC8（HupR-）以及BSE8（HupT-）互补，而Cosmid3和Cosmid9只能与BSE8互补；试验所产生的接合转移子均恢复了吸氢酶的活性和自养生长能力、将Cosmidl的3．5kbPstⅠ和4．5kbBamHⅠ片段分别亚克隆到pWY11和pWY10中。pWY11和pWY10的部分DNA序列与R．capsulatus中的相关基因具有很高的同源性，从而证明了所得到的Cosmid1确实含有R．sphaeroides的基因簇。
- 梁建光吴永强宋鸿遇AnnetteColbeauPauletteM.Vignais
- 关键词：浑球红细菌吸氢酶基因簇
- 影响Klebsiella oxytoca固氮酶和氢酶活性的生理条件被引量：2
- 1991年
- 联合固氮菌在自然界广泛存在,它在提供土壤和作物氮源上起着一定的作用。近年来发现Klebsiella oxytoca参与水稻联合共生体系,但对该菌固氮生理特征的研究则相当缺乏。作为资料性的工作,本文对K.oxytoca NG13固氮酶和氢酶活性表达的生理条件作了分析。
- 朱美珍吴永强
- 关键词：固氮菌固氮酶氢酶
- 暗－光发酵偶联制氢的方法
- 本发明提供了一种发酵产生氢气的方法，特别涉及废弃生物质向氢能的清洁转化技术。该方法包括以下步骤：(a)以含碳有机废弃物为发酵底物，用经预处理的牲畜粪天然堆肥的混合菌群进行黑暗发酵，产生氢气和有机酸的发酵液；(b)再用光合...
- 周志华陶用珍吴永强
- 文献传递
- 紫细菌Rhodobacter sephaeroides 601光合反应中心原初光化学反应机理的研究
- 运用色素置换、单分子复合膜技术及方波伏安法测定,研究了色素置换对紫细菌Rhodobacter sphaeroides 601光合反应中心电化学性质的影响。紫细菌光合反应中心在外加电位驱动下可以产生电荷分离。植物去镁叶绿素...
- 邹永龙刘源吴永强徐春和
- 文献传递
- 丙酮酸对浑球红假单胞菌突变株(GOGAT^-Nif^-)固氮酶活性的调节被引量：4
- 1992年
- 固氮无效的浑球红假单胞菌GOGAT突变株经丙酮酸诱导产生固氮酶活性。固氮酶比活随丙酮酸浓度增加而提高,同时依赖于蛋白质合成的菌体生长。丙酮酸产生固氮酶时氮源Glu的浓度高达60 mmol/L。液相色谱分析表明,丙酮酸诱导固氮酶活性的形成与胞内Gln耗竭有关而与Asn无关。用丙酮酸代替苹果酸诱导,突变株向胞外分泌的游离氨大大减少。丙酮酸诱导时变种谷氨酰胺酶比活较高,它可能参与胞内Gln的分解。
- 吴永强陈秉俭朱美珍宋鸿遇
- 关键词：固氮酶假单胞菌丙酮酸
- 浑球红细菌（R．srhaeroides）glnBA基因克隆及其物理图谱被引量：1
- 1996年
- 从浑球红细菌的基因文库中筛选到ｐＨＴ３、ｐＨＴ１０及ｐＨＴ３５三个阳性克隆，其中质粒ｐＨＴ１０与ｐＨＴ３５能遗传互补英膜红细菌的谷氨酰胺缺陷型Ｇ２９，使其ＧＳ酶及固氮酶活性得到恢复。对质粒ｐＨＴ１０上的ｇｌｎＡ同源片段进行了亚克隆和限制性内切酶图谱分析，确定了浑球红细菌ｇｌｎＢ与ｇｌｎＡ之间存在连锁关系。
- 韩涛吴永强宋鸿遇
- 关键词：浑球红细菌光合细菌基因克隆物理图谱
