田方圆
- 作品数：6 被引量：20H指数：3
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院河南省家禽种质资源创新工程研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金长江学者和创新团队发展计划河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 雌激素通过ER-α调控CYP2C8在鸡肝中的表达被引量：9
- 2016年
- 本研究旨在探讨鸡CYP2C8基因的表达调控规律。采集30周龄卢氏绿壳蛋鸡心、肝、脾、肺、肾、胸肌、腹脂、肌胃、腺胃、卵巢、胰、十二指肠、空肠、回肠14种组织以及从1日龄~30周龄不同发育时期的肝组织,用荧光实时定量PCR分析CYP2C8基因的时空表达规律;用雌激素及其受体拮抗剂对活体和体外培养的鸡胚肝原代细胞进行处理,用荧光实时定量PCR分析CYP2C8基因的表达调控机制。结果表明,鸡CYP2C8基因在各组织中表现出广泛表达的特性,但在脂类代谢旺盛的器官如肝、肾、小肠（十二指肠、空肠、回肠）等器官中表达较高,且在肝中的表达水平随着性成熟而显著升高（P〈0.01）;雌激素处理可显著提高鸡肝组织和体外培养的鸡胚胎肝原代细胞中CYP2C8的表达水平（P〈0.05）,但雌激素受体ER-α拮抗剂MPP可完全抑制雌激素的作用（P〈0.05）。综上表明,鸡CYP2C8基因在不同组织中广泛表达,而以肝中的表达水平最高,且肝中CYP2C8基因的表达是受雌激素并通过ER-α调控。
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- 关键词：雌激素
- 家禽下丘脑采食调控机制研究进展被引量：3
- 2015年
- 采食量是研究家禽营养需要和饲料配方的基础数据,其直接关系到家禽从外界获得营养物质的多少,与家禽的生产性能和健康状况密切相关。家禽的采食调控是一个复杂而精确的过程,也是当前研究的重点。在现代集约化养殖中,家禽的采食行为受到外界环境、饲养管理、自身代谢产物、中枢和外周信号因子的综合调控。下丘脑是中枢神经系统调节采食量的重要部位,它在整合调控采食的各种信号并对采食行为做出调整中发挥着关键作用。采食调控在禽类和其它鸟类上已有几十年的研究历史,本文就近年来有关下丘脑参与家禽采食调控的机制进行阐述。
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- 关键词：家禽采食量下丘脑
- 鸡MOGAT和DGAT基因的克隆及表达特性研究被引量：6
- 2017年
- 本研究旨在探讨鸡MOGAT和DGAT基因的表达和调控特性。首先克隆了具有MOGAT活性的MOGAT1、MOGAT2、LPGAT1和具有DGAT活性的DGAT2和SOAT1对应基因的编码区序列,并对其组织表达特性进行了研究;其次选取产蛋前期母鸡和产蛋高峰期母鸡作为试验材料,利用实时荧光定量PCR技术分析不同生理时期鸡肝中这些基因的表达变化规律;在此基础上利用雌激素处理的体内、体外试验,分析这些基因的表达调控机制。结果表明,鸡MOGAT1、MOGAT2、LPGAT1、DGAT2和SOAT1基因在各组织中表现出广泛表达的特性,并在脂类代谢旺盛的器官如肝、肾、小肠(十二指肠、空肠、回肠)等器官中表达较高,但DGAT2基因在鸡肝中的表达量较低,而MOGAT2基因主要在鸡小肠组织(十二指肠、空肠、回肠)中表达,MOGAT1在除胰腺外的大部分组织中都有表达;产蛋高峰期母鸡肝中MOGAT1、LPGAT1和SOAT1的表达量均显著低于产蛋前期母鸡;经不同浓度雌激素处理后,这些基因在鸡肝、十二指肠、肾以及鸡胚肝原代细胞中的表达量维持不变或显著下调。综上所述,已知的甘油三酯合成的单酰甘油通路中相关基因不是鸡肝TG合成代谢中的限速基因,在雌激素诱导的鸡TG合成代谢中,单酰甘油通路不发挥主导作用。
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- 关键词：脂类代谢甘油三酯雌激素
- 鸡Visfatin蛋白的原核表达、纯化及其活性研究被引量：1
- 2016年
- 本试验旨在通过克隆Visfatin基因,将其在原核表达系统中表达并纯化,通过3T3-L1细胞的分化验证其活性,成功获得鸡重组Visfatin蛋白。以AA肉仔鸡肝组织总RNA为模板,qRT-PCR扩增Visfatin基因,转化进入pGEM？-T载体,再与原核表达载体pET-30a连接转化,获取含pET-30a-Visfatin重组质粒的E.coli BL21（DE3）表达菌株。以IPTG诱导重组菌株,优化表达条件,SDS-PAGE鉴定表达情况。采用镍离子亲和层析对Visfatin蛋白进行纯化,Western blot鉴定表达蛋白,并通过3T3-L1细胞的分化情况鉴定表达蛋白Visfatin的活性。结果,通过NcoⅠ、XhoⅠ酶切获得的结果与预期目的条带大小相符,成功构建pET-30a-Visfatin表达载体。SDSPAGE检测结果表明,在培养基pH为8.0,IPTG终浓度为0.4mmol·L-1,30℃条件下,诱导10～12h时可溶性蛋白表达量最大。通过镍离子层析纯化Visfatin蛋白,在SDS-PAGE的60ku处可见一条与预期一致的蛋白条带。Western blot证明纯化蛋白可与6＊His标签特异性结合。油红O染色结果表明,与对照组相比Visfatin诱导的3T3-L1细胞有更多的脂滴形成。qRT-PCR结果显示,在3T3-L1细胞分化过程中,Visfatin作用下标志基因PPARγ、aP2、FAS和C/EBPα的表达量显著增加（P〈0.05）。本研究成功建立了一套标准化的鸡Visfatin重组蛋白表达程序,获得了具有生物活性的鸡Visfatin,为其在家禽领域的进一步研究奠定了基础。
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- 关键词：克隆原核表达3T3-L1
- 基于GC-MS代谢组学技术对内脂素调控雏鸡采食机制的研究被引量：1
- 2017年
- 旨在探索内脂素(Visfatin)调控家禽采食的分子机制,为完善家禽的食欲调控和能量平衡理论奠定基础。选取1日龄罗曼褐健康雏鸡20只,随机分为4个处理(C、L、M、H组)。常规饲粮饲养至10日龄进行下丘脑导管埋置,通过脑室注射技术对雏鸡下丘脑部位注射不同浓度的重组人内脂素(0、40、200、400ng)。脑室注射Visfatin60min后,记录各处理组累积采食量,并采集下丘脑组织,通过GC-MS系统进行代谢组学检测,建立PLS-DA模型,并将差异代谢物输入KEGG数据库进行代谢通路的构建。结果表明,脑室注射Visfatin 60min后,M组和H组的雏鸡累积采食量与C组相比均显著升高(P<0.05)。在对雏鸡下丘脑进行GC-MS代谢组学分析后,处理组与对照组间共鉴定获得73个差异性代谢物,富集到51条通路上。脑室注射Visfatin后下丘脑产生的差异性代谢物与氨基酸、糖和脂代谢有着密切的联系,其中脂肪酸合成通路被显著富集。结果提示,中枢营养物质下降导致稳态发生改变可能是Visfatin发挥促食作用的主要机制。
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- 关键词：VISFATIN采食量下丘脑代谢组学
- Visfatin对雏鸡采食量及相关基因表达的影响
- Visfatin又称内脂素,是由Atsunori Fukuhara在2005年发现的一种新型脂肪因子,在内脏组织中高度表达,其在一系列生理过程如糖脂代谢、应激反应、衰老、细胞分化和疾病中起关键作用.最新研究表明,Visf...
- 张盼盼夏天保田方圆韩瑞丽蒋瑞瑞田亚东康相涛
- 关键词：雏鸡采食量基因表达
- 文献传递
