张艳芬
- 作品数：19 被引量：193H指数：4
- 供职机构：河北大学科学技术处更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家自然科学基金河北省教育厅项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学理学更多>>
- 一种适用于SELEX技术的单链DNA制备方法被引量：1
- 2014年
- 为了建立一种简单、高效制备高纯度单链DNA方法,用于SELEX技术筛选过程中次级文库的筛选,对制备链霉亲和素磁珠的实验条件进行了优化,确定了对称PCR产物与链霉亲和素磁珠偶联的最佳时间和饱和度,并验证了不同浓度NaOH对解链效果的影响,建立了适于SELEX技术的单链DNA制备体系。利用荧光法和聚丙烯酰胺凝胶电泳对本实验所建立方法及传统不对称PCR法制备单链DNA的回收效率和纯度进行了比较,结果表明在最优实验条件下用磁性分离法制备的单链DNA纯度及回收效率均显著高于不对称PCR法。
- 刘中成解瑶张艳芬赵丽健刘利鹏肖敏华
- 关键词：SELEX技术单链DNA
- 一种大鼠慢性哮喘模型的建立与评价被引量：27
- 2010年
- 本实验旨在探讨一种新的大鼠慢性哮喘模型建立方法。采用组胺激发对SD大鼠进行筛选,模型组经腹腔和皮下多点注射OVA(卵清白蛋白)致敏大鼠,1%OVA雾化激发1周建立急性模型,0.1%OVA雾化激发12周建立慢性模型,对照组以生理盐水代替。通过检测大鼠肺组织病理切片、BALF(肺泡灌洗液)炎性细胞构成、血清总IgE和OVA特异性IgE、肺功能等指标变化情况及被动皮肤过敏试验对模型进行评价,并对急、慢性模型进行了比较。结果显示,慢性哮喘模型组气道平滑肌及基底膜厚度、杯状细胞增生及胶原沉积情况、皮肤蓝斑溶出物光吸收度值、血清总IgE和OVA特异性IgE含量等指标均显著高于急性模型组,但气道炎性细胞浸润程度及BALF中嗜酸性粒细胞比例低于急性模型组;急、慢性模型组呼吸速率及呼气流量间无显著性差异;急、慢性哮喘模型组中以上各指标均显著高于正常对照组。因此,本实验成功制备大鼠慢性哮喘模型,基本复制了人哮喘病理生理特征。
- 刘中成张艳芬
- 关键词：慢性哮喘气道重塑
- 适于标记核酸适配子胶体金的制备及性能被引量：4
- 2014年
- 为了获得适于标记寡核苷酸适配子的胶体金,对制备工艺条件进行了优化：20 mL 0.1 g/L氯金酸溶液中添加10 g/L柠檬酸三钠500 μL,pH=3.0,初始沸腾时间小于4 min,加入还原剂后反应时间为6 min.通过紫外可见光谱扫描和透射电镜对其性能进行鉴定,获得了分散均匀、直径15～20 nm的胶体金颗粒,可准确标记核酸适配子,且将胶体金标记的链霉素适配子与半抗原小分子链霉素进行反应,可对链霉素进行定性和半定量检测,满足利用胶体金标记适配子检测靶物质的需要.
- 解瑶刘中成张艳芬赵丽健刘利鹏
- 关键词：胶体金
- Cε3-Cε4结合肽筛选及鉴定
- 2014年
- 为了获得免疫球蛋白E(IgE)特异性结合肽,采用固相筛选法,以Cε3-Cε4为靶蛋白,利用噬菌体随机多肽展示技术进行筛选,4轮筛选后,经ELISA鉴定获得19个阳性单克隆噬菌体,阳性率达38%,测序并翻译后共获得11个结合肽.竞争抑制性实验证明P7,P13,P20与Cε3-Cε4蛋白的结合能力较强,细胞水平分析表明:结合肽P7,P20可阻止IgE与其受体结合.本研究将为进一步探索IgE结合肽生物学功能奠定基础,并为设计治疗变态反应性疾病的小分子药物提供参考.
- 张艳芬刘利鹏赵立健时海浪刘中成
- hFcεRIα/RBL-2H3细胞株的构建与评价被引量：3
- 2015年
- 目的构建稳定表达人FcεRIα(h FcεRIα)亚基的RBL-2H3细胞株。方法利用RT-PCR技术克隆h FcεRIα基因,构建真核表达载体p CI-neo-h FcεRIα。脂质体介导法转染RBL-2H3细胞,G418筛选获得稳定转染细胞株。利用RT-PCR、Western blot及免疫荧光法鉴定转染结果。结果通过对脂质体介导转染体系进行优化,转染效率可高达75.38%。经Western blot、免疫荧光及RT-PCR鉴定,h FcεRIα基因在RBL-2H3细胞内成功表达。结论成功构建h FcεRIα/RBL-2H3细胞模型,为深入研究Ig E与FcεRI作用机制及相关药物开发提供了实验基础。
- 王南南刘中成张艳芬刘玉欣崔哲陈瑶
- 关键词：IGERBL-2H3细胞脂质体转染
- 人Cε3-Cε4基因克隆、表达及纯化复性被引量：1
- 2011年
- 利用RT-PCR技术从变态反应疾病患者外周血淋巴细胞中克隆出人Cε3-Cε4基因,将其克隆至原核表达载体pET-17b中,转化大肠杆菌并进行诱导表达,SDS-PAGE后Cε3-Cε4蛋白表达量占细菌总蛋白的30.7%。菌体经裂解、2 mol/L尿素洗涤后,绝大部分杂蛋白被去除,目的蛋白纯度达85.5%。用8 mol/L尿素溶解包涵体,经Ni-NTA柱对变性状态下的目的蛋白进行纯化,并利用降低尿素梯度的方法对纯化的蛋白进行复性,最终目的蛋白纯度为95.3%。Western blotting方法对Cε3-Cε4蛋白进行鉴定,为该蛋白的进一步相关研究奠定基础。
- 刘中成时海浪张艳芬赵丽君王培莹常斌李雨诗
- 新形势下高校实验室开放管理与运行机制的研究被引量：132
- 2013年
- 围绕高校实验室开放这一主题,针对实验室开放的管理模式和运行机制进行了探讨,通过调查,以及现状研究与对策研究、事件研究与事因研究相结合,分析了当前实验室开放管理模式和运行机制中存在的问题和产生问题的原因,最后提出健全实验室开放的管理模式和运行机制的整改措施。
- 张艳芬刘中成耿强刘慧君孙学军
- 新能源产业可持续发展支持体系研究——以河北省为例被引量：1
- 2013年
- 围绕河北省新能源发展基地的实地综合调研情况,文章介绍了河北省新能源产业的发展现状,对新能源产业可持续发展进行了综合分析,支持体系将是促进新能源产业健康快速发展的一个重要杠杆。通过进一步加大对新能源产业的政策扶持力度,建立新能源产业创新体系,健全质量认证标准与监管体系及绿色产业链保障体系。
- 张艳芬王兰英耿强刘慧君刘中成
- 关键词：新能源产业可持续发展绩效评价
- 从职业培训看新生代农民工城市融入的障碍与对策被引量：1
- 2012年
- 2010年中央一号文件对农民工问题非常重视,特别提出要解决好新生代农民工的问题。从职业培训角度分析了新生代农民工城市融入的瓶颈问题,并给出了应对策略。
- 王兰英张艳芬
- 关键词：新生代农民工
- 观赏蕨类卷柏——翠云草的引种栽培和繁殖技术被引量：3
- 2011年
- 分子生物学在药学领域中的地位和作用愈显突出，已经成为药学专业重要的基础课程之一。对其教学改革进行了多年的实践和探索，通过不断优化、更新教学内容、引入实例教学、启发式教学、以研促学、CAI教学和开展网络课堂等新的教学手段和方法，初步建立了一种适合药学专业的分子生物学教学体系，提高了教学质量。
- 刘中成张艳芬
- 关键词：药学
