吕建祎
- 作品数：4 被引量：22H指数：2
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 表皮生长因子受体对苯并芘诱导的人支气管上皮细胞SIRT1活化的影响被引量：3
- 2016年
- 目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)在调控苯并芘(B[a]P)诱导人支气管上皮BEAS-2B细胞沉默信息调节因子1(SIRT1)活化中的作用,阐明EGFR/SIRT1信号转导通路与肺癌发生发展的关系。方法:MOTIF SearchTM分析软件预测SIRT1启动子序列上转录DNA结合位点。培养BEAS-2B细胞,设不加苯并芘的细胞为对照组,苯并芘组细胞暴露于苯并茈(8μmol·L-1)不同时间(6、12、24和48h),RT-PCR和蛋白免疫印迹法检测各组细胞中EGFR mRNA和蛋白表达水平。将SIRT1启动子荧光素酶报告载体转染入BEAS-2B细胞中,采用人表皮细胞生长因子(hEGF)和酪氨酸蛋白激酶抑制剂Genistein处理细胞24h,倒置显微镜观察各组BEAS-2B细胞形态表现,荧光素酶报告基因技术检测SIRT1荧光素酶活性。收集相关肺组织临床标本,免疫组织化学法检测肺组织中EGFR蛋白表达水平。结果:SIRT1启动子序列上含有表皮细胞生长因子(EGF)、铁氧还蛋白(2Fe-2S)和血管性血友病因子(vWF)3个转录因子的DNA结合位点。与对照组比较,苯并芘组细胞中EGFR mRNA表达水平升高(P<0.05),且在12h达到峰值,同时EGFR蛋白表达水平均不同程度升高(P<0.05)。与对照组比较,hEGF组和苯并芘组BEAS-2B中细胞SIRT1荧光素酶活性明显增加(P<0.05),hEGF联合苯并芘组BEAS-2B细胞中SIRT1荧光素酶活性增加更为明显(P<0.001);Genistein大于30μmol·L-1时,细胞排列逐渐稀疏,形态改变明显;Genistein(30μmol·L-1)能够抑制苯并芘诱导的SIRT1荧光素酶活性的增加,与苯并芘组比较差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学法,肺癌组织中EGFR蛋白表达水平明显高于正常肺组织(P<0.001)。结论:苯并芘暴露下,EGFR能够促进SIRT1的表达,从而诱导肺慢性炎症反应,EGFR/SIRT1信号转导通路在肺癌的发生发展过程中发挥一定的作用。
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- 关键词：表皮生长因子受体信号转导
- 环境致癌物诱导慢性炎症致肺癌发生发展的研究进展被引量：18
- 2014年
- 近年来,由于工业发展负面影响造成的环境污染及吸烟等不良嗜好导致吸入人体肺部的致癌物急剧增加,致使肺癌的发病率及死亡率逐年升高,已跃居各癌症之首.研究表明,环境致癌物诱导肺部慢性炎症与肺癌的发生发展之间存在着紧密联系,环境致癌物如砷、镍及苯并芘等暴露可激活NFAT、NF-κB、AP-1等转录因子,调控炎症因子如TNFα及COX-2等的表达,且这些炎性因子的释放又可正反馈激活转录因子,促进更多的炎性因子产生,进而形成炎性因子产生回路,维持肺部炎性微环境,从而促进肺癌的发生发展.本文就环境致癌物诱导肺部炎症导致肺癌发生发展的分子机制及其相关信号通路进行了综述.
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- 关键词：环境致癌物炎症恶性转化肺癌
- 人支气管上皮细胞中苯并芘诱导TNF-α表达的分子机制被引量：1
- 2014年
- 目的:构建肿瘤坏死因子-α(TNF-α)启动子双荧光素酶报告基因载体,研究苯并芘(B[a]P)暴露对TNF-αm RNA表达的调控机制。方法:采用Real time-PCR技术检测B[a]P暴露下,人支气管上皮细胞(Beas-2B)中TNF-αm RNA随时间的变化趋势。通过分子克隆技术构建TNF-α启动子双荧光素酶报告基因载体并检测其活性。进一步检测Beas-2B细胞和人肾上皮细胞293T细胞暴露于B[a]P环境下,TNF-α启动子活性的变化趋势。结果:Real time-PCR检测B[a]P暴露下,24 h内,Beas-2B细胞中TNF-αm RNA表达量随时间延长升高。且B[a]P刺激Beas-2B细胞24 h内,TNF-α启动子活性也呈升高趋势。B[a]P刺激293T细胞,TNF-α启动子活性也会升高。结论:成功构建了TNF-α启动子双荧光素酶报告基因载体。而且,B[a]P能够促进TNF-αm RNA的转录从而促进TNF-αm RNA的表达,且promoter1要比promoter2活性强,没有细胞特异性。
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- 关键词：肿瘤坏死因子BEAS-2B细胞
