任刚
- 作品数:8 被引量:13H指数:2
- 供职机构:昆明市第一人民医院更多>>
- 发文基金:云南省应用基础研究基金中国肝炎防治基金云南省卫生科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 无心跳供体肝移植临床应用体会
- 目的通过总结我院实施的23例无心跳供体肝移植的围手术期情况及术后恢复情况,探讨无心跳供体(donation aftercardiac death,DCD)肝移植的临床应用的情况并总结经验。方法回顾性的分析了我院自2009...
- 冉江华李立张升宁刘静李来邦陈奕明高杨任刚
- 一种腹腔镜下胆道镜推送钳
- 本实用新型公开了一种腹腔镜下胆道镜推送钳,包括主杆和夹持机构,所述主杆表面上端开设有滑槽,所述导向槽内部滑动连接有推杆,所述推杆一端固定连接有推板,所述固定块另一侧表面上端固定连接有第一夹板,所述第一夹板下端固定连接有第...
- 郑克谱方鹤赵英鹏高扬李肖山任刚
- 文献传递
- 亚低温联合脂肪间充质干细胞对肝缺血再灌注损伤的保护作用被引量:3
- 2019年
- 背景:肝缺血再灌注损伤的机制复杂多样,是制约肝脏外科手术的瓶颈,如何减轻肝缺血再灌注损伤一直是医学研究的热点与难点之一。目的:探讨亚低温联合脂肪间充质干细胞预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法:将60只雄性SD大鼠(购于昆明医科大学实验动物中心)随机分为6组:假手术组、肝缺血再灌注损伤组、亚低温组、脂肪间充质干细胞组、亚低温+脂肪间充质干细胞组、ERK通路阻断剂组,每组10只,均于缺血前30 min给予亚低温、脂肪间充质干细胞、ERK通路阻断剂干预。肝缺血再灌注12 h后收集大鼠血清及肝组织标本,进行相关指标检测。肝缺血再灌注12 h后收集大鼠血清、肝组织,术后7 d收集大鼠肝组织,进行相关指标检测。结果与结论:①全自动生化分析仪检测肝功能指标:亚低温组、脂肪间充质干细胞组、亚低温+脂肪间充质干细胞组血清中天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶和乳酸脱氢酶活性均低于肝缺血再灌注损伤组(P <0.05),亚低温+脂肪间充质干细胞组血清中3种酶活性低于亚低温组和脂肪间充质干细胞组(P <0.05);②ELISA检测氧化应激指标:亚低温组、脂肪间充质干细胞组、亚低温+脂肪间充质干细胞组肝组织中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于肝缺血再灌注损伤组(P <0.05),丙二醛水平均显著低于肝缺血再灌注损伤组(P <0.05);亚低温+脂肪间充质干细胞组肝组织中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶水平显著高于亚低温组和脂肪间充质干细胞组(P <0.05),而丙二醛水平低于亚低温组和脂肪间充质干细胞组(P <0.05);③Western blotting检测相关蛋白表达:与肝缺血再灌注损伤组相比,亚低温组、脂肪间充质干细胞组、亚低温+脂肪间充质干细胞组肝组织中p-ERK1/2相对表达水平显著升高(P <0.05),各组中ERK1/2的表达差异无显著性意义;④
- 刘剑李立王晓川张升宁李来邦莽源祎高扬陈永林任刚李望
- 关键词:肝缺血再灌注脂肪间充质干细胞亚低温肝细胞凋亡干细胞再灌注损伤间质干细胞移植
- 心脏死亡后器官捐献肝移植患者术后胆道吻合口狭窄影响因素及治疗策略被引量:1
- 2020年
- 目的探讨公民心脏死亡后器官捐献(DCD)肝移植患者术后胆道吻合口狭窄并发症的相关因素及治疗策略。方法回顾分析2010年1月至2018年6月在昆明市第一人民医院接受肝移植192例患者资料,供肝均来源于DCD。共入组145例患者,男性85例,女性60例,平均年龄45岁。145例患者中发生胆道吻合口狭窄8例,无狭窄137例,比较狭窄和无狭窄患者中国分类标准、供体年龄、体质量指数、供肝脂肪样变、冷缺血时间、热缺血时间、供体非计划心脏停搏时间、供体升压药使用情况、供体高钠血症、吻合技术等相关因素与胆道吻合口狭窄的关系,并讨论其治疗策略。Spearman相关分析狭窄相关因素。结果结果提示发生狭窄情况与供体年龄(r=0.229)、体质量指数(r=0.204)、脂肪样变(r=0.239)、热缺血时间(r=0.214)、非计划心脏停搏的总时间(r=0.401)、升压药物的使用(r=0.237)和术前供体存在高钠血症(r=0.557)均呈正性相关(均P<0.05)。内镜下胆道支架置入对治疗胆道吻合口狭窄有效,成功率高。结论引起DCD肝移植患者术后胆道吻合口狭窄的相关因素较多,加强供体维护,缩短冷缺血时间、热缺血时间,提高吻合技术可以有效降低胆道并发症。内镜下放置胆道支架是治疗胆道吻合口狭窄的首选方式。
- 高杨李肖山张升宁莽源祎任刚刘静李来邦冉江华李立
- 关键词:肝移植
- 体外诱导大鼠肝卵圆细胞定向分化为胆管上皮细胞被引量:2
- 2014年
- 目的通过对大鼠肝卵圆细胞进行体外培养,建立诱导大鼠肝卵圆细胞分化为胆管上皮细胞的诱导体系。方法通过2AAF/PH建立大鼠肝卵圆细胞活化模型,使用二步酶消化法获得原代肝卵圆细胞,应用20ng/mL干细胞生长因子及10 ng/mL表皮生长因子诱导肝卵圆细胞向胆管上皮细胞分化,并应用流式细胞及免疫荧光观察细胞分化过程中OV-6及CK-19标志的表达变化。结果原代肝卵圆细胞OV-6阳性细胞为(94.30±1.40)%,CK-19阳性细胞为(3.16±1.87)%,诱导后第7代细胞OV-6阳性细胞为(4.97±0.21)%,CK-19阳性细胞为(96.17±1.21)%,差异有显著性(P<0.05)。免疫荧光结果证实CK-19广泛表达。结论成功诱导大鼠肝卵圆细胞分化为表达CK-19的胆管上皮细胞,细胞形态符合上皮细胞形态特点,表皮生长因子及干细胞生长因子可诱导肝卵圆细胞分化为胆管上皮细胞。
- 陈奕明李立冉江华张升宁张蕾苏晓三张春平高杨任刚
- 关键词:肝卵圆细胞胆管上皮细胞
- 亚低温通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路对肝缺血再灌注损伤大鼠模型的保护作用被引量:6
- 2019年
- 目的探讨亚低温预处理肝缺血再灌注损伤(HIRI)大鼠模型的保护作用机理。方法将40只SD大鼠分为4组:假手术(Sham)组、HIRI组、亚低温处理(MH)组和MH+LY294002处理(MH+LY)组,每组10只,分别于肝缺血再灌注3、6、12、24 h后收集大鼠的血清及肝组织标本。采用Western Blot检测大鼠肝组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和磷酸化Akt(p-Akt,Ser308)蛋白的表达水平。采用TUNEL法和Western Blot检测分析肝组织中细胞凋亡和凋亡相关蛋白的表达水平。采用ELISA试剂盒检测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)水平。采用全自动生化分析仪检测大鼠血清ALT、AST活性。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验。结果 HIRI组p-PI3K、p-Akt的相对表达水平明显低于Sham组,差异均有统计学意义(q值分别为5. 217、5. 456,P值均<0. 01);经亚低温处理后大鼠肝组织中p-PI3K、p-Akt的相对表达水平明显高于HIRI组,差异均有统计学意义(q值分别为10. 434、14. 116,P值均<0. 01)。HIRI组、MH组和MH+LY组大鼠再灌注后3、6、12、24 h的血清AST、ALT活性明显高于Sham组,差异均有统计学意义(P值均<0. 001)。TUNEL染色结果显示,HIRI组大鼠的细胞凋亡百分比[(42. 25±3. 50)%]明显高于Sham组[(3. 21±0. 5)%],差异均有统计学意义(q=10. 187,P <0. 01);相比于HIRI组,MH组明显下调了细胞凋亡百分比(12. 42±1. 3)%,差异有统计学意义(q=7. 784,P <0. 01),且HIRI组与MH+LY组的细胞凋亡百分比[(38. 19±2. 8)%]比较差异无统计学意义(q=1. 059,P> 0. 05)。Western Blot检测结果显示,与Sham组相比,HIRI组中抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显下调,差异有统计学意义(q=2. 101,P <0. 05),促凋亡蛋白Bax、fas和fasl表达明显上调,差异均有统计学意义(q值分别为11. 016、4. 735、10. 201,P值均<0. 01),亚低温处理之后可明显下调HIRI
- 刘剑李立王晓川张升宁李来邦莽源祎高扬陈永林任刚李望
- 关键词:肝疾病再灌注损伤1-磷脂酰肌醇3-激酶蛋白激酶类
- 甲胎蛋白与Caspases3在Huh7肝癌细胞中共表达的意义被引量:1
- 2012年
- 目的:确定Caspases3与甲胎蛋白(AFP)共表达于Huh7细胞中,为肝癌的治疗提供新思路。方法:取对数期Huh7肝癌细胞,提取总RNA,经反转录成cDNA,经PCR扩增,并行琼脂糖电泳检查、照相。结果:Caspases3与AFP共表达于Huh 7肝癌细胞中。结论:其于此理论提出了治疗肝癌的新思路。
- 任刚李立李晓延白建华高红强唐岩褚光
- 关键词:甲胎蛋白HUH7肝癌细胞
- 他克莫司对人外周血树突状细胞成熟的影响及免疫调控机制的研究
- 2015年
- 目的研究他克莫司对体外人外周血树突状细胞(DC)成熟的影响及免疫调控机制。方法采集健康成人空腹外周血,分离出单个核细胞,经重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和重组人白细胞介素4刺激诱导产生未成熟DC。将获取的DC分为4组培养和观察,(1)A组:DC培养第1天加入他克莫司;(2)B组:DC培养第1天加入他克莫司,并于细胞培养结束前24h加入脂多糖;(3)C组:DC培养结束前24h加入脂多糖;(4)D组:为空白对照组,不加他克莫司及脂多糖。培养7d后,对各组DC的生长形态、细胞表型、抗原吞噬能力进行观察和检测,并对DC分泌IL-12的水平及刺激同种T淋巴细胞增殖能力进行鉴定。结果DC培养第7天,各组DC形态并无显著差异,密集程度亦未见明显区别。C组细胞CD11c、CD80、CD86、HLA-DR表型表达阳性率分别为(66.1±2.4)%、(48.5±1.3)%、(63.1±2.3)%和(73.1±2.4)%,D组分另Ⅱ为(61.9±6.7)%、(6.7±0.47)%、(25.6±4.7)%和(35.5±1.0)%,两组间均有明显差异(P〈0.05);与C组比较,A组和B组CD11c和CDS0的表达阳性率存在显著差异(P〈0.05);与D组比较,A组和B组的CD11c和CDS0表达明显减弱(P〈0.05),CD86和HLA-DR表达明显增高(P〈0.05);而A组与B组间各表型的表达均无明显差异(P〉0.05)。A组、B组、C组、D组DC培养上清液中IL-12水平分别为(26.5±1.3)pg/ml、(28.1±1.23)pg/ml、(33.6±2.2)pg/ml和(26.1±3.4)pg/ml,C组均明显高于其他3组(P〈0.05);A组、B组和D组的IL-12水平均较低,且3组间无明显差异(P〉0.05)。在各组混合淋巴细胞反应中,A组与B组的增殖指数无显著差异(P〉0.05);与C组相比,A组和B组T淋巴细胞的增殖反应受到明显抑制。A组、B组、C组、D组DC的OVA抗原表达量分别
- 张升宁李望苏晓三冉江华高杨陈奕明刘静李来邦任刚李肖山李立
- 关键词:他克莫司树突状细胞免疫耐受