吴玲
- 作品数：6 被引量：21H指数：2
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金温州市科技局科研基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 银杏叶提取物对高糖环境中心肌细胞凋亡及Drp-1、Mfn-2表达的影响及其可能机制被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨银杏叶提取物(EGB)对高糖环境中新生大鼠心肌细胞凋亡和线粒体凋亡途径中线粒体分裂蛋白1(Drp-1)、融合蛋白2(Mfn-2)、Bax、Bcl-2和Caspase-3表达的影响。方法:体外分离SD乳鼠心肌细胞,分别用低糖(LG组)、低糖+EGB(LG+EGB组)、高糖(HG组)和高糖+EGB(HG+EGB组)培养基培养心肌细胞。分别用流式细胞仪检测心肌细胞的凋亡率,用Western blot和/或RT-PCR分别检测心肌细胞Drp-1、Mfn-2、Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达。结果:与LG组相比,HG组心肌细胞凋亡率、Drp-1、Bax、Caspase-3表达和Bax/Bcl-2比值均显著升高,差异均具有统计学意义(P<0.05),而Bcl-2、Mfn-2表达均降低,差异均具有统计学意义(P<0.05);与HG组相比,HG+EGB组心肌细胞凋亡率、Drp-1表达、Bax、Caspase-3、Bax/Bcl-2比值均显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.05),而Bcl-2表达升高,差异具有统计学意义(P<0.05),但Mfn-2的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:EGB通过上调高糖环境中心肌细胞Bcl-2的表达,同时下调Drp-1、Bax和Caspase-3的表达,从而减少心肌细胞的凋亡。这可能是EGB防治糖尿病心肌病的机制之一。
- 李剑敏吴玲张迪郑靖宇戴爽袁风菊吴欢彭天庆
- 关键词：银杏叶提取物心肌细胞线粒体凋亡
- Drp1和Mfn2在棕榈酸诱导大鼠肝细胞损伤中的作用机制及姜黄素衍生物L6H4的干预作用被引量：7
- 2016年
- 目的:研究棕榈酸(PA)诱导肝细胞损伤的体外模拟非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型中线粒体发动相关蛋白1(Drp1)和融合蛋白2(Mfn2)的作用机制以及姜黄素衍生物L6H4的保护作用。方法:1分别以不同浓度的PA、油酸(OA)和PA+姜黄素衍生物L6H4的混合培养基培养大鼠BRL-3A正常肝细胞24 h。用MTT法检测细胞活力,以筛选制作体外模拟NAFLD模型的最佳PA浓度及姜黄素衍生物L6H4的干预浓度。2将细胞分为4组:对照组(CON组)、油酸组(OA组)、棕榈酸组(PA组)及姜黄素衍生物L6H4干预组(L6H4组),分别给予正常培养基、含有OA的培养基、含有PA的培养基及含有PA和姜黄素衍生物L6H4的混合培养基进行干预,24 h后收获细胞。分别用羟胺法测定总超氧化物歧化酶(T-SOD)含量、硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量、Real-time PCR及Western Blot法检测肝细胞Drp1、Mfn2、Bcl-2、Bax、Caspase-3、TNF-αm RNA及蛋白的表达。结果:1不同浓度PA对BRL-3A细胞的生长均具有一定的抑制作用,差异具有统计学意义(P<0.05),并呈明显剂量依赖关系,0.1 mmol/L是分界点,而0.05 mmol/L OA对细胞活力无明显影响。因此选择0.05 mmol/L PA作为最佳造模浓度以建立NAFLD体外模型。2当姜黄素衍生物L6H4干预浓度≤10μmol/L时,细胞活力均高于75%,浓度>20μmol/L时,细胞活力降至50%以下,差异具有统计学意义(P<0.05)。10μmol/L时是分界点,因此选择5μmol/L作为后续L6H4干预浓度。3与CON组相比,PA组细胞MDA含量、Drp1、Bax、Caspase-3、TNF-α的m RNA及蛋白的表达均显著增加,差异均具有统计学意义(P<0.05);而T-SOD活力、Mfn2、Bcl-2的m RNA及蛋白表达则显著下降,差异均具有统计学意义(P<0.05);与PA组相比,L6H4组的MDA含量、Drp1、Bax、Caspase-3、TNF-α的m RNA及蛋白的表达均显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.05),T-SOD活力、Bcl-2 m RNA及蛋白的表达显著提高,差异均具有统计学意义(P<0.05),但Mfn2的表达
- 郑靖宇吴欢汤雯刘成丁婷婷戴爽吴玲朱再胜李剑敏
- 关键词：棕榈酸
- 慢性间歇低氧对小鼠骨密度和骨代谢的影响
- 2014年
- 目的：探讨慢性间歇低氧（CIH）对骨密度（BMD）和骨代谢的影响。方法将16只12周龄C57BL/6雄性小鼠按随机数字表法分为慢性间歇低氧组（CIH组）和正常对照组（CON组），每组8只。CON组小鼠在正常环境下饲养，CIH组小鼠在间歇低氧环境下饲养，低氧暴露时间为每日9：00-17：00，6d/周，共8周。于8周末取血，用ELISA法测定血清抗酒石酸酸性磷酸5b （TRACP-5b）、骨钙素（OC）、白介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平；取右侧股骨检测其BMD；取左侧股骨观察骨组织形态学改变，并分别采用免疫组化和real- time qPCR法检测骨保护蛋白（OPG）和核因子-κβ受体活化因子配体（RANKL）和其mRNA表达。结果与CON组相比，CIH组小鼠BMD、血清OC水平及OPG/RANKL mRNA比值均明显下降（P＜0.05或0.01），而血清TRACP-5b、IL-6和TNF-α水平、骨组织内RANKL和mRNA表达均明显升高（P＜0.05或0.01）；但骨组织内OPG和mR-NA表达差异均无统计学意义（均P＞0.05）；小鼠股骨干骺端骨小梁分布稀疏，变细及断裂。血清IL-6水平与BMD呈负相关（P＜0.05），与骨组织RANKL mRNA呈正相关（P＜0.01）；血清TNF-α水平与BMD呈负相关（P＜0.01），与骨组织RANKL mRNA呈正相关（P＜0.05）。结论 CIH能导致骨吸收增加、骨形成下降和BMD下降，与低氧以及CIH引起的IL-6、TNF-α水平升高导致RANKL升高有关。
- 朱再胜黄卡特郑靖宇戴爽吴玲杜晓红李剑敏
- 关键词：间歇低氧骨代谢骨密度骨保护蛋白
- miR-138在乙醇诱导的大鼠心肌细胞系H9C2氧化应激中表达增加被引量：1
- 2019年
- 目的观察miR-138对乙醇诱导的大鼠心肌细胞系H9C2的Sirt1表达及其下游氧化应激和线粒体凋亡相关蛋白表达的影响。方法将心肌细胞分为对照组(control组)、乙醇组(E组)、miR-138抑制剂组(I组);分别用含不同浓度乙醇的细胞培养液培养;MTT法检测H9C2细胞的活力;选择细胞活力接近80%的200 mmol/L乙醇浓度为最佳干预浓度。用Lipo2000,将miR-138抑制剂转染I组H9C2心肌细胞,孵育12 h后,分别用羟胺法测定心肌细胞中总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力;硫代巴比妥酸(TBA)法测定心肌细胞丙二醛(MDA)含量;用RT-qPCR检测心肌细胞内miR-138与Sirt1 mRNA的表达;用Western blot测定心肌细胞内Sirt1、Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白的表达。结果 1)乙醇可以抑制心肌细胞的活力。2)与对照组相比,乙醇组心肌细胞中miR-138 mRNA的表达及MDA的含量、Bax和caspase-3的蛋白表达均明显升高(P<0.05),T-SOD的活力、Sirt1 mRNA的表达及Sirt1和Bcl-2蛋白的表达均明显降低(P<0.05);与乙醇组相比,miR-138抑制剂组心肌细胞中miR-138 mRNA的表达及MDA的含量及Bax、caspase-3的蛋白表达均明显降低(P<0.05),T-SOD的活力、Sirt1 mRNA的表达、Sirt1和Bcl-2蛋白的表达和均明显升高(P<0.05)。结论 miR-138在乙醇诱导的大鼠H9C2心肌细胞氧化应激中表达增加。Sirt1可能是miR-138的作用靶点。
- 王圣凯胡苏琴吴玲吴杭菲郑靖宇蒋自培李剑敏
- 关键词：SIRT1氧化应激
- 高脂饮食诱导肥胖小鼠模型中氧化应激、炎症递质对骨代谢的影响及其可能机制被引量：10
- 2014年
- 目的:探讨高脂饮食诱导肥胖小鼠模型中氧化应激和炎症递质对骨代谢的影响及其可能机制。方法:选用5周龄C57BL/6雄性小鼠16只,随机平均分为正常饮食组、高脂饮食组,分别用正常饮食和高脂饮食喂养。于实验16周末,测各组动物体质量,处死后取内脏脂肪并测量内脏脂肪/体质量比值;用ELISA法测量血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)、血清骨钙素(OC)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α);分别用硫代巴比妥酸(TBA)法和羟胺法检测胫骨骨组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性;用骨密度仪检测右侧股骨骨密度(BMD);分别用免疫组织化学技术和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测骨组织骨保护素(OPG)和核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)蛋白及mRNA的表达;HE染色光镜观察左侧股骨组织形态学改变。结果:与正常饮食组相比,高脂饮食组体质量、内脏脂肪/体质量比值、骨组织RANKL mRNA/OPG mRNA比值、血清TRACP-5b、IL-6和TNF-α水平、骨组织RANKL表达及骨组织MDA均明显升高,差异均具统计学意义(P<0.05);而血清OC水平、骨组织OPG表达、骨组织SOD及BMD均明显下降,差异均具统计学意义(P<0.05)。在组织形态学上,发现高脂饮食组股骨干骺端骨小梁分布稀疏,骨小梁变细及断裂,伴骨髓腔中有大量脂肪浸润。各指标的相关分析结果显示:BMD与骨组织SOD呈正相关(r=0.627,P<0.01),与内脏脂肪/体质量比值(r=-0.858,P<0.01)、骨组织MDA均呈负相关(r=-0.538,P<0.01);SOD与OPG mRNA呈显著正相关(r=0.637,P<0.01),与TNF-α(r=-0.673,P<0.01)、IL-6(r=-0.874,P<0.01)、RANKL mRNA(r=-0.760,P<0.01)及RANKL/OPG比值(r=-0.768,P<0.01)呈显著负相关;而MDA与TNF-α、IL-6、OPG mRNA、RANKL mRNA以及RANKL/OPG无显著相关性(P>0.05)。结论:高脂饮食诱导肥胖能导致骨质疏松病理组织学改变,其机制可能与其上调炎症递质表达和氧化应激增加有关。
- 朱再胜戴爽吴玲郑靖宇黄卡特李剑敏
- 关键词：高脂饮食骨保护素核因子-ΚB受体活化因子配体氧化应激
- 番茄红素对慢性低氧小鼠骨密度和RANKL/OPG的影响被引量：2
- 2015年
- 目的:探讨番茄红素对慢性低氧(CH)小鼠骨密度(BMD)和核因子-kβ受体活化因子配体(RANKL)/骨保护蛋白(OPG)的影响。方法:选用8周龄C57BL/6雄性小鼠24只,随机分为对照组(C组,n=8)、CH组(n=8)和番茄红素组(LCP组,n=8)。C组在正常环境下饲养,CH组和LCP组低氧暴露时间为每日8h,每周6d,连续8周。于实验末取血1.5m L,ELISA法测量血清抗酒石酸酸性磷酸5b(TRACP-5b)、骨钙素(OC);同时检测骨组织丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性;用骨密度仪检测股骨BMD;HE染色光镜观察骨组织形态学改变;用免疫组织化学技术和实时荧光定量PCR(RT-q PCR)技术检测骨组织骨保护素(OPG)和核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)蛋白及m RNA的表达。结果:1CH组股骨干骺端骨小梁分布稀疏,变细及断裂;骨组织SOD活性、BMD和血清OC明显低于C组;而骨组织MDA、RANKL水平、RANKL mRNA/OPG mRNA以及血清TRACP-5b显著高于C组(P<0.01)。2LCP能部分改善CH小鼠骨组织形态学;LCP组骨组织MDA水平、RANKL表达、RANKL mRNA/OPG mRNA和血清TRACP-5b水平低于CH组;而骨组织SOD活性、血清OC水平和BMD高于CH组(P<0.05或0.01)。结论:番茄红素能降低CH小鼠骨组织氧化应激水平,下调RANKL/OPG,减少骨吸收,提高BMD。
- 朱再胜戴爽郑靖宇黄卡特吴玲杜晓红李剑敏
- 关键词：低氧骨保护蛋白骨密度番茄红素小鼠
