高利利
- 作品数：8 被引量：58H指数：3
- 供职机构：山东农业大学更多>>
- 发文基金：山东省科技发展计划项目山东省自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 山东葫芦科蔬菜上病毒病种类检测及黄瓜花叶病毒分离物的亚组鉴定被引量：11
- 2016年
- 为了检测和鉴定山东地区葫芦科蔬菜上病毒病种类,从山东诸地11个蔬菜种植区采集了867个葫芦科蔬菜疑似感病样品。利用黄瓜花叶病毒、黄瓜绿斑驳花叶病毒、西瓜花叶病毒、烟草花叶病毒、小西葫芦黄花叶病毒、南瓜花叶病毒、甜瓜黄斑病毒、瓜类褪绿黄化病毒、李属坏死环斑病毒及甜瓜坏死斑点病毒等特异性引物对疑似感病样品分别进行RT-PCR检测,各病毒检出率分别为34.8%,10.4%,20.0%,41.7%,27.0%,7.8%,2.6%,1.7%,0,0.9%。表明除PNRSV外,其他9种病毒在山东各地均有发生,且CMV和TMV发病率较高,2种或2种以上病毒复合侵染也很普遍。同时为明确山东地区CMV分离物的株系分化状况,选取11个地区有代表性的CMV阳性样品,测定其外壳蛋白(Coat protein,CP)和RNA3核苷酸序列并进行序列比对和进化分析,结果显示侵染山东地区葫芦科蔬菜的CMV分离物均属于IB亚组,与韩国分离物As(AF013291)相似性最高,未发现其他株系。
- 孙晓辉王树森高利利乔宁刘永光赵静竺晓平
- 关键词：黄瓜花叶病毒亚组
- 番茄褪绿病毒的分子鉴定及荧光定量PCR检测体系的建立与应用
- 番茄褪绿病毒（Tomato chlorosis virus，ToCV）作为危害番茄生产的重要病毒。研究快速、高效的识别及检测该病毒的方法，有助于及时发现病毒并采取相应预防措施，从而减少其造成的经济损失。本研究通过RT-P...
- 高利利
- 关键词：预防措施荧光定量PCR分子鉴定
- 河北省设施番茄褪绿病毒分子检测和鉴定研究被引量：30
- 2015年
- 以2014年夏季在河北7个县市设施番茄种植区田间采集的疑似番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)感病植株为试材,采用RT-PCR检测、BLAST比对和MEGA 5.0系统树分析等方法,研究河北设施番茄上ToCV的发生和分子鉴定以及ToCV与另一种严重发生的番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus,TYLC)复合侵染情况。结果表明:以ToCV外壳蛋白(Coat Protein,CP)和热激蛋白(Heat Shock Protein 70,HSP70)共3对特异引物对其中4个典型地区ToCV疑似样品进行检测,分别扩增到约1 032、943、911bp的特异条带,同时针对ToCV阳性样品利用TYLCV特异引物从部分样品中扩增得到约833bp的核苷酸序列,4个样品均确定为ToCV阳性,样品与ToCV北京分离物(KC887999)CP基因序列一致性最高,为99.7%,同时确定田间存在ToCV和TYLCV复合侵染。
- 孙国珍高利利陆文利王勇张安胜竺晓平
- 关键词：HSP70CPRT-PCR检测番茄黄化曲叶病毒复合侵染
- 同时检测番茄黄化曲叶病毒及伴随的越南番茄黄化曲叶卫星DNAβ的方法及其专用引物组
- 本发明公开了一种同时检测番茄黄化曲叶病毒及伴随的越南番茄黄化曲叶卫星DNAβ的方法及其专用引物组。本发明提供的引物组，由引物对TY和引物对β组成；所述引物对TY由名称为TY-F的引物和名称为TY-R的引物组成；所述TY-...
- 竺晓平刘灵芝梁元存耿超孙晓辉冯佳高利利
- 番茄褪绿病毒RT-PCR检测技术的优化及河南分离物的鉴定被引量：2
- 2016年
- 为获得高效、灵敏和稳定的番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)RT-PCR检测体系,选取文献报道的和重新设计的共9套ToCV的RT-PCR引物,经过一系列测试和比较,筛选出了灵敏度、特异性均较高的引物组合,并对反应条件、参数进行了优化,确定了最优反应条件。应用优化的ToCV RT-PCR检测体系对从河南设施蔬菜生产区采集的疑似感病番茄样品进行检测,扩增产物测序后经BLAST比对发现,河南分离物的CP和HSP70基因序列与GenBank上注册的ToCV典型分离物序列的相似性均达94%以上,通过对ToCV病毒粒子的电镜观察而进一步确定ToCV已在河南侵染设施番茄。
- 冯佳孙晓辉高利利刘灵芝乔宁刘永光竺晓平
- 关键词：RT-PCR多重PCR
- 同时检测番茄黄化曲叶病毒及伴随的越南番茄黄化曲叶卫星DNAβ的方法及其专用引物组
- 本发明公开了一种同时检测番茄黄化曲叶病毒及伴随的越南番茄黄化曲叶卫星DNAβ的方法及其专用引物组。本发明提供的引物组，由引物对TY和引物对β组成；所述引物对TY由名称为TY‑F的引物和名称为TY‑R的引物组成；所述TY‑...
- 竺晓平刘灵芝梁元存耿超孙晓辉冯佳高利利
- 文献传递
- 山东省芋花叶病毒病的田间调查及鉴定被引量：2
- 2017年
- 为明确芋花叶病毒(Dasheen mosaic virus,Ds MV)在山东芋种植区的发生和遗传进化,在山东潍坊、青岛、烟台、日照和临沂等5个芋主栽区进行调查,对采集样品进行病毒病病原鉴定、序列分析和遗传进化分析。结果显示,芋花叶病毒的检出率为55.9%,在5个地区皆有分布。5个Ds MV分离物cp基因的核苷酸序列相似性为88.5%~91.9%,氨基酸序列相似性为93.4%~97.5%;与国内外已报道代表性Ds MV分离物cp基因的核苷酸与氨基酸的序列相似性分别为74.8%~99.4%、79.7%~99.1%。遗传进化分析显示,Ds MV山东分离物与日本分离物(Ds23)、中国分离物(ND和ZAN)和美国分离物(Ds MV-U2)亲缘关系较近,聚在同一分支。综上,Ds MV在山东省芋主栽区发生普遍,其cp基因序列之间变异相对较大。
- 高利利姜珊珊吴斌张眉王升吉辛相启
- 关键词：芋花叶病毒外壳蛋白基因
- 天津地区番茄褪绿病毒的分子检测和鉴定被引量：36
- 2015年
- 为明确2014年夏天在天津番茄种植区采集到疑似感染番茄褪绿病毒的番茄样品的侵染病原,利用To CV外壳蛋白和热激蛋白的特异引物进行反转录PCR(RT-PCR)检测,分别扩增得到特异核苷酸片段。序列分析表明,HSP70核苷酸序列与已登录的番茄褪绿病毒日本分离物Tochigi(AB513442)相似性为99.5%,CP氨基酸和核苷酸序列与已登录的番茄褪绿病毒日本分离物Tochigi(AB513443)相似性分别为99.2%和99.3%,表明天津地区的番茄受到To CV侵染,且天津与日本To CV分离物序列相似性最高。由于调查地区番茄黄化曲叶病毒发生普遍,针对To CV阳性样品利用TYLCV特异性引物进行了分子检测,扩增产物序列与TYLCV以色列株系分离物的相似性均在99.0%以上,表明2种病毒在田间发生复合侵染,该研究首次明确天津地区的番茄受到To CV侵染和To CV与TYLCV的复合侵染。
- 高利利孙国珍王勇高苇张春祥张安胜竺晓平
- 关键词：番茄黄化曲叶病毒复合侵染分子检测
