闫明阳
- 作品数：6 被引量：5H指数：2
- 供职机构：新乡医学院基础医学院更多>>
- 发文基金：河南省教育厅科学技术研究重点项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 一种漆酶介体ABTS-SiO<Sub>2</Sub>纳米粒子及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种漆酶介体ABTS-SiO<Sub>2</Sub>纳米粒子及其制备方法和应用，属于生物技术、纳米材料和环境治理技术领域。本发明的技术方案要点为：将ABTS修饰到SiO<Sub>2</Sub>纳米粒子上制得漆...
- 黄娟刘友勋周鑫平付云李翠萍闫明阳李长正
- 文献传递
- 响应面法对漆斑菌液体发酵产胆红素氧化酶条件的优化
- 2015年
- 对漆斑菌(Myrothecium sp.IMER1)菌株液体发酵产胆红素氧化酶的条件进行了优化。采用单因素试验筛选出最适碳源为葡萄糖,氮源为硝酸铵,p H为7,温度为28℃和最有效促进产酶的金属离子为Cu2+。在此基础上,利用Plackett-Burman设计对影响产酶因素的效应进行评价,筛选出具有显著影响的3个因素葡萄糖、p H和温度。用最陡爬坡路径逼近最大产酶区域后,利用响应面中心组合设计对显著因素进行优化,得出p H、温度和葡萄糖分别为5.7、28℃、8 g/L时,优化后液体发酵液中胆红素氧化酶活力提高到0.627 U/m L,比未优化前的酶活力0.214 U/m L提高了近2倍,结果表明单因素与响应面结合法可优化菌株IMER1液体发酵产胆红素氧化酶的条件。
- 刘友勋闫明阳赵春澎黄娟
- 关键词：胆红素氧化酶响应面法
- 活性电泳切胶法分离白腐菌(Trametes sp.B1)2种漆酶同工酶及其性质研究被引量：2
- 2015年
- 对白腐菌(Trametes sp.)菌株B1的固体发酵粗酶液进行活性电泳后发现含有5种漆酶同工酶。硫酸铵沉淀、离子交换柱层析和Sephadex G100柱层析的收集液中包含有2种带电荷和分子量接近的漆酶同工酶,进一步利用活性电泳切胶法纯化出这2种同工酶,用SDS-PAGE证明为单一漆酶,它们的分子量分别为64 ku(Lac1)和62 ku(Lac2),并对其理化性质进行了研究。Lac1漆酶反应的最适p H值为2.2,最适温度为50℃,氧化ABTS的Km值为1.952 mmol/L;Lac2漆酶反应的最适p H值为2.2,最适温度为40℃,氧化ABTS的Km值为0.255 mmol/L。
- 刘友勋黄娟闫明阳张文博赵春澎张煜
- 关键词：白腐菌纯化活性电泳酶学性质
- 磁性Fe_3O_4/聚苯胺纳米纤维的制备及其固定漆酶研究被引量：2
- 2017年
- 合成优良的漆酶固定化载体有利于其进一步应用。通过将磁性纳米颗粒包埋在苯胺的聚合物中形成磁性Fe_3O_4/聚苯胺纳米纤维,作为漆酶固定化载体。透射电镜和红外图谱分别显示了载体的形态结构特征。不同比例的Fe_3O_4与苯胺对载体结构没有明显影响,但会影响酶的负载量。合成载体最大酶负载量为210 mg/g,固定漆酶后的载体导电性能发生变化。固定化漆酶最适pH从4偏移到3.5,在酸性pH范围保持较高的酶活性,最适温度为60℃;在50℃下孵育240 min,能保持约50%的酶活性,于4℃下保存30 d能保持约60%的酶活性;重复使用8次后还能保留70%的酶活性;结果证实了磁性Fe_3O_4/聚苯胺纳米纤维成功合成,对酶有较高的负载量。随着Fe_3O_4的比例增加,载体对漆酶的负载量却减少;漆酶与载体间存在有一定电子交流。固定化漆酶的最适pH向酸性偏移可能和聚苯胺的导电性有关,合成载体显示出良好的热稳定性、储存稳定性和重复使用稳定性,表明磁性Fe_3O_4/聚苯胺纳米纤维是一种优良的酶固定化载体,可以实现酶的高效固定化。
- 刘友勋王耀坤闫明阳黄娟
- 关键词：磁性纳米颗粒聚苯胺漆酶固定化
- 漆斑菌Myrothecium sp.IMER1液体和固体发酵产胆红素氧化酶分析
- 2015年
- 为了提高漆斑菌Myrothecium sp.IMER1的胆红素氧化酶(bilirubin oxidase,BOX)产量,分析了其液体和固体发酵产酶的特性。首先分析了该菌株液体和固体发酵产BOX的时间变化曲线,对其所产的胞外酶进行了活性电泳,进一步分析了其液体产酶的模型和宏观动力学内容。结果表明,菌株IMER1在液体发酵中第5天的产BOX酶量最大,其固体发酵产酶量最大时间也是在第5天,但是,其固体发酵能持续高产BOX。从BOX的底物活性显色中可知,在固体和液体发酵的粗酶液中都能检测到BOX,并且没有同工酶出现;而BOX生物合成模式为中期合成型,通过数据计算和模拟得出了产酶动力学方程。
- 刘友勋闫明阳黄娟赵春澎
- 关键词：胆红素氧化酶液体发酵固体发酵
- 嗜碱芽孢杆菌cotA基因克隆表达及部分性质研究被引量：1
- 2016年
- 为了获得具有高性能的多铜离子氧化酶,从极端微生物嗜碱芽孢杆菌(Bacillus clausii KSM-K16)中克隆表达了其芽孢外衣蛋白CotA。根据B.clausii KSM-K16的CotA序列及大肠杆菌密码子的偏爱性,设计和合成出该基因全长序列,构建pET28a-cot A重组表达载体,将其转化到Escherichia coli BL21(DE3)并诱导表达出重组蛋白,纯化并研究了CotA部分生化特性。重组CotA约62 kD,表现出蓝绿色并在波长609 nm有铜离子特征吸收峰,能氧化ABTS、SGZ和胆红素等底物;以SGZ为底物,最适pH和温度分别为7.5和90℃;在80℃孵育2 h,能保持70%活性;在pH4-11范围分别孵育1 h,能保持90%活性。结果显示,嗜碱芽孢杆菌CotA是一种具有漆酶和胆红素氧化酶活性的典型多铜离子氧化酶,表现出热和酸碱稳定性。
- 刘友勋闫明阳耿园园黄娟
- 关键词：嗜碱芽孢杆菌漆酶
