石小东
- 作品数：7 被引量：3H指数：1
- 供职机构：徐州医学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生文化科学农业科学更多>>
- 基于ADDLs与EphB2受体相互作用的阿尔茨海默病神经保护机制的研究
- 目的：本文旨在根据EphB2受体与ADDLs的结合位点,采用多肽阵列筛选出干扰二者结合的小肽,并验证其能否降低ADDLs的神经毒性,由此探索ADDLs通过EphB2受体影响NMDA受体功能的分子机制,以期为靶向ADDLs...
- 孙凯胡蕊石小东郝景茹孙楠高灿
- 关键词：阿尔茨海默病学习记忆
- 研究生科研创新能力的培养被引量：3
- 2015年
- 我国研究生教育以培养研究生的科研创新能力为目标。通常来说,培养研究生的创新能力会完成在传授创新经验、到训练创新能力、再到独立完成创新实践的过程中。主要论述研究生科研创新能力的培养方法。
- 石小东
- 关键词：科研创新能力
- 小鼠受体酪氨酸激酶EphB2 FN结构域在大肠杆菌中的表达与纯化
- 2015年
- 目的：将小鼠受体酪氨酸激酶EphB2 FN结构域在大肠杆菌细胞中进行表达与纯化，以便于研究与FN结构域相互作用的蛋白质。方法以重组质粒GV287－EphB2作为模板，经PCR扩增，得到FN结构域的cDNA片段，并将其克隆至pET－28a载体中。将重组质粒pET－28a－FN转化至大肠杆菌BL21（ DE3）感受态细胞，经IPTG诱导后，利用SDS－PAGE检测FN－His6融合蛋白的表达。最后采用Ni－NTA亲和层析法对该蛋白进行纯化。结果本研究成功地构建了FN结构域的原核表达载体。经鉴定，FN－His6融合蛋白能够在大肠杆菌中表达。纯化后，得到少量可溶性FN－His6融合蛋白。结论小鼠受体酪氨酸激酶EphB2 FN结构域可以在大肠杆菌中表达并纯化，为研究与FN结构域相互作用的蛋白奠定了实验基础。
- 石小东胡蕊高灿
- 关键词：EPHB2原核表达
- 鼠伤寒沙门菌小分子热休克蛋白AgsA的N与C末端在溶液中暴露比较
- 2016年
- 目的探讨鼠伤寒沙门菌小分子热休克蛋白AgsA的N末端在其寡聚体中所处的位置,为临床治疗提供参考依据。方法通过分别在小分子热休克蛋白AgsA的N、C末端添加多聚组氨酸标签(His-tag),检测二者与镍螯合琼脂糖凝胶(Ni-NTA Agarose)的结合能力,比较目标蛋白的N、C末端在溶液中的暴露情况。结果 Histag的添加既不影响AgsA蛋白的寡聚状态,也不影响其类分子伴侣活性;通过比较分别在N、C末端添加Histag的AgsA蛋白与Ni-NTA Agarose的结合能力,发现AgsA蛋白的C末端在溶液中的暴露情况远大于其N末端。结论 AgsA-N-His6与Ni-NTA Agarose的结合能力远远小于AgsA-C-His6,暗示了AgsA蛋白的N末端被包裹在其寡聚体内部。
- 石小东胡蕊胡秋梅孙晓玉林晓天
- 关键词：寡聚体
- 甲醛交联法研究高温条件下大肠杆菌体内小分子热休克蛋白IbpB的客户蛋白
- 2015年
- 目的：研究高温条件下小分子热休克蛋白IbpB在大肠杆菌体内的客户蛋白以及在此温度下IbpB对其客户蛋白的作用。方法构建表达IbpB蛋白的重组质粒pBAD－ibpB，pBAD质粒为对照，转化到BW25113－ΔibpB菌株。转化pBAD－ibpB质粒的BW25113－ΔibpB菌株在45℃热处理之后加入甲醛进行交联，亲和层析法对交联产物进行纯化，质谱法对捕获的客户蛋白进行鉴定，过氧化氢酶活性测定和蛋白热聚集体分离的方法检测IbpB对其客户蛋白的作用。结果质谱鉴定结果表明IbpB在高温条件下互相作用的客户蛋白主要是过氧化氢酶KatG、色氨酸降解酶TnaA和延伸因子EF－Tu；在ibpB敲除株中回补IbpB可以减少过氧化氢酶在高温条件下的活性丧失，可以阻止TnaA和EF－Tu在高温条件下发生的热聚集。结论 KatG、TnaA和EF－Tu是IbpB在高温条件下相互作用的主要客户蛋白，IbpB在高温条件下对上述客户蛋白具有明显的保护作用。
- 石小东胡蕊胡秋梅
- 关键词：小分子热休克蛋白
- 小分子热休克蛋白AgsA过量表达提高大肠杆菌的抗热性
- 2015年
- 目的探讨来自鼠伤寒沙门氏菌的小分子热休克蛋白AgsA过量表达对大肠杆菌（E．coli）抗热性的影响。方法将重组质粒pET21a—agsA转化到E．coliBL21（DE3）感受态细胞中，表达AgsA蛋白，并对其进行纯化。分别以乙醇脱氢酶和过氧化氢酶作为底物，检测AgsA蛋白的分子伴侣活性。将过量表达AgsA的E．coli在不同温度下处理，检测AgsA对Ecoli的热保护作用。结果重组质粒pET21a—agsA转化到E．coliBL21（DE3）感受态细胞之后，诱导目的蛋白表达，经纯化，获得高纯度的AgsA蛋白。该蛋白可以在体外阻止乙醇脱氢酶和过氧化氢酶在高温条件下发生的聚集。体内过量表达AgsA蛋白可以显著提高大肠杆菌的抗热性。结论AgsA蛋白通过其分子伴侣活性阻止大肠杆菌体内蛋白在高温下发生的聚集，从而提高大肠杆菌在高温环境下的生存率。
- 郭昊石小东
- 关键词：小分子热休克蛋白抗热性
