刘瑛
- 作品数：5 被引量：17H指数：3
- 供职机构：北京大学更多>>
- 发文基金：国家公益性行业科研专项中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程天文地球更多>>
- 深圳海域6株破囊壶菌的生长特性及油脂成分分析被引量：7
- 2015年
- 【目的】从深圳海域分离得到6株破囊壶菌,对其基本形态特征、生活史和油脂含量等进行研究,开发其应用潜力。【方法】使用松花粉垂钓法对破囊壶菌进行分离,通过18S r RNA基因测序的方法对破囊壶菌进行鉴定,用显微镜观察其基本形态特征,通过使用尼罗红(Nile Red)染色法对油脂含量进行定性检测,并用GC-MS分析菌株的油脂含量和组成情况。【结果】18S r RNA基因鉴定其属于Aurantiochytrium sp.、Schizochytrium sp.和Thraustochytrium sp.三个属。破囊壶菌的脂肪酸主要成分为十六碳饱和脂肪酸和二十二碳六烯酸(DHA),其中Mn11和Mn15的饱和脂肪酸含量达到总脂肪酸含量的70%以上,Mn16和Sw7的DHA产量分别达到1.29 g/L和1.26 g/L。【结论】Mn11和Mn15菌株适合用于生物柴油的生产,Mn16和Sw7是DHA发酵生产的潜力菌株。
- 李晶晶刘瑛成家杨Maurycy Daroch
- 关键词：破囊壶菌生活史生物柴油DHA
- 破囊壶菌脂肪酶基因的克隆、双温控自诱导表达及酶学性质研究被引量：1
- 2016年
- 【目的】克隆破囊壶菌Aurantiochytrium sp.PKU#SW7的脂肪酶基因,实现其在大肠杆菌细胞中异源高效表达,并进行初步酶学性质研究。【方法】基于转录组数据注释,获得脂肪酶基因lip,构建重组基因工程菌Rosetta(DE3)/p ET30-lip,利用双温控自诱导方法高效表达蛋白,表达产物(LIP)经Ni-Agarose His亲和层析柱纯化后进行酶学性质研究。【结果】从Aurantiochytrium sp.PKU#SW7中克隆得到一个大小为873 bp的脂肪酶基因(Gen Bank登录号为KT305964),该酶对p-NPB最适反应温度和pH分别为40°C和8.0。以不同浓度的金属离子Ca^(2+)和Co^(2+)溶液分别保温处理酶液30 min可使酶活提高1.3倍左右;甲醇对脂肪酶的抑制作用不明显。在最适反应条件下对p-NPP与p-NPB的酶活力分别为70.0±3.1 U/mg和102.5±2.6 U/mg。【结论】Aurantiochytrium sp.PKU#SW7脂肪酶具有良好的特性,符合生物柴油生物催化剂基本要求。
- 梁园梅刘瑛Maurycy Daroch成家杨
- 关键词：破囊壶菌脂肪酶
- 破囊壶菌细胞破壁及DHA提取的研究被引量：1
- 2015年
- 为了确定破囊壶菌Aurantiochytrium sp.的最佳破壁方法,分别使用反复冻融法、超声法、高速匀浆法、碱热法和研磨法对破囊壶菌进行破壁处理。为了解各方法的破壁效果,使用显微镜观察破壁前后的细胞个数变化,并利用SEM(Scanning Electron Microscope)观察细胞的形态变化。为探究不同破壁方法对油脂提取的影响,首先使用尼罗红荧光染色法对油脂含量进行了定性检测,随后采用正己烷提取油脂。为探究不同破壁方法对油脂组分的影响,使用气相色谱法分析了油脂的组成情况。结果显示:(1)碱热的破壁效果最好,破壁率达到95.51%;(2)碱热破壁后得到的油脂产率最高,达到61.33%,远高于其他4种方法 ;(3)碱热破壁后得到的油脂中DHA含量最高、达到41.33%,相应的DHA产量也远高于其他方法、达到2.192 g/L。从制备高纯度DHA的角度出发,碱热法是最佳的破壁方法。
- 吴海龙崔岩刘瑛梁园梅成家杨
- 关键词：破囊壶菌破壁DHA
- 破囊壶菌生产DHA的应用前景被引量：5
- 2013年
- DHA(二十二碳六烯酸)是对人体生理功能具有重要作用的一种长链不饱和脂肪酸。破囊壶菌因其DHA含量高,生长速度快而备受关注,是目前最具前景的工业化生产DHA的微生物。破囊壶菌主要通过FAS和PKS两种途径合成DHA,影响DHA合成的主要环境因素有碳氮源、温度、无机盐等。随着基因工程技术的发展,从分子水平提高DHA产量将成为可能。现就破囊壶菌生产DHA的研究现状和应用前景作一综述,为利用破囊壶菌工业化生产DHA的研究提供参考。
- 李晶晶刘瑛马炯
- 关键词：破囊壶菌DHA代谢途径基因工程
- 高产DHA破囊壶菌Aurantiochytrium sp.PKU#SW7诱变株的筛选被引量：6
- 2016年
- 【目的】对野生菌株Aurantiochytrium sp.PKU#SW7诱变育种,筛选高产DHA突变株。【方法】采用UV诱变和化学药物胁迫筛选方式,以菌株的生物量、油脂产量、DHA产量作为筛选指标,获得高产DHA突变株。【结果】经鉴定获得一株DHA高产突变株PKU#PM003,该菌株传代4次后仍保持较好的遗传稳定性。摇瓶发酵后,PKU#PM003生物量产量高达6.62 g/L,比原始菌株5.95 g/L提高了11.26%,脂肪酸含量高达4.01 g/L,比原始菌株3.18 g/L提高了26.1%,DHA在脂肪酸中所占比例由29.97%增加到33.43%,产量提高了41.01%,油脂突变效果显著。【结论】突变株PKU#PM003可作为性状优良的工业化发酵生产菌种,并在DHA产量提升上仍具有巨大的空间。
- 梁园梅刘瑛李晶晶Maurycy Daroch成家杨
- 关键词：破囊壶菌DHA紫外诱变化学药物
