张博文
- 作品数:10 被引量:3H指数:1
- 供职机构:南京工业大学更多>>
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- 相关领域:轻工技术与工程农业科学生物学医药卫生更多>>
- 一种产顺式‑4‑羟脯氨酸的方法
- 本发明公开了一种产顺式‑4‑羟脯氨酸的方法,该方法通过在宿主菌细胞内构建过表达脯氨酸羟化酶基因Ecp4H,利用CRISPR‑Cas9技术抑制脯氨酸降解途径中脯氨酸羟化酶基因<I>putA</I>以及α‑酮戊二酸降解途径中...
- 陈可泉张博文王昕钱娟蔡沛沛欧阳平凯
- 提高大肠杆菌甲醇代谢途径中限速酶活性的方法
- 本发明公开了一种提高大肠杆菌甲醇代谢途径中限速酶活性的方法,将大肠杆菌过表达基因Mdh和Hps‑Phi后,通过添加激活蛋白nudF,增强甲醇脱氢酶的酶活,从而提高甲醇的代谢量;其中,所述基因Mdh和Hps‑Phi为来源于...
- 陈可泉陆晓璐王昕张博文毛静文
- 文献传递
- 大肠杆菌产L-苯丙氨酸发酵调控及代谢通量分析被引量:2
- 2015年
- 考察了外源添加中间代谢产物、维生素B1和硫酸镁对大肠杆菌发酵产L-苯丙氨酸的影响,结果表明,添加1g/L柠檬酸三钠、1g/Lα-酮戊二酸、150mg/L维生素B1及3g/L硫酸镁均对L-苯丙氨酸的合成有利。根据构建的大肠杆菌合成L-苯丙氨酸的生化反应网络,利用代谢通量分析其原因。结果表明,这些物质的添加均可以调节G6P和PEP节点处的代谢通量分布,为L-苯丙氨酸的合成提供更多的前体物质赤藓糖四磷酸(E4P)、磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)和还原力NADPH。通过补料分批发酵实验得出,优化后菌体对总葡萄糖的消耗提高了24.49%,菌体终浓度提高了23.50%,L-苯丙氨酸的终浓度提高了62.87%,L-苯丙氨酸的收率提高了30.88%,乙酸的合成降低了56.51%。
- 袁佩佩曹伟佳王震张博文陈可泉李艳欧阳平凯
- 关键词:中间代谢产物维生素B1硫酸镁L-苯丙氨酸代谢通量分析
- 一种产顺式-4-羟脯氨酸的方法
- 本发明公开了一种产顺式‑4‑羟脯氨酸的方法,该方法通过在宿主菌细胞内构建过表达脯氨酸羟化酶基因Ecp4H,利用CRISPR‑Cas9技术抑制脯氨酸降解途径中脯氨酸羟化酶基因<I>putA</I>以及α‑酮戊二酸降解途径中...
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- 文献传递
- 提高大肠杆菌甲醇代谢途径中限速酶活性的方法
- 本发明公开了一种提高大肠杆菌甲醇代谢途径中限速酶活性的方法,将大肠杆菌过表达基因Mdh和Hps‑Phi后,通过添加激活蛋白nudF,增强甲醇脱氢酶的酶活,从而提高甲醇的代谢量;其中,所述基因Mdh和Hps‑Phi为来源于...
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- 产顺式-4-羟脯氨酸重组E.coli的构建及催化过程研究
- 顺式-4-羟脯氨酸(cis-4-Hyp)作为一种非天然氨基酸,在医药与食品行业用途广泛。目前cis-4-Hyp主要采用酸水解,但生产顺式-4-羟脯氨酸产率较低、成本较高、对环境污染严重等问题。本文选择来源于中华根瘤菌的脯...
- 张博文
- 产顺式-4-羟脯氨酸枯草芽孢杆菌工程菌的构建及发酵优化被引量:1
- 2017年
- 顺式-4-羟脯氨酸(CHOP)是一种重要的手性结构物质,可广泛用于药物以及香料制造。本研究为开发CHOP的生物合成方法,将来源于中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)的L-脯氨酸-4-羟化酶在枯草芽孢杆菌WB800N中实现了成功表达,构建获得了能够以L-脯氨酸为底物合成CHOP的工程菌株,进而对该菌株的发酵条件以及发酵组分进行了优化研究。结果表明:工程菌株的最适发酵温度为25℃,最适诱导剂浓度为1 mmol/L,最适发酵p H为5;在发酵体系中加入5 mmol/L硫酸亚铁和2.5 g/L L-脯氨酸时最有利于合成CHOP。在最优发酵体系下发酵60 h后,顺式-4-羟脯氨酸的产量可以达到120.2 mg/L。本文成功的构建了羟脯氨酸生产菌株枯草杆菌WB800 p HT-P4H,而研究结果为枯草杆菌工程菌发酵生产顺式-4-羟铺氨酸提供了基础。
- 张博文陈可泉曹伟佳王昕
- 一种生产顺式‑4‑羟脯氨酸的生物转化法
- 本发明公开了一种生产顺式‑4‑羟脯氨酸的生物转化法。本发明方法通过在大肠杆菌BL21(DE3)胞内共表达了脯氨酸羟化酶和脯氨酸转运蛋白,实现了高产顺式‑4‑羟脯氨酸在重组菌中的高效合成。与现有的顺式‑4‑羟脯氨酸发酵法相...
- 陈可泉张博文王昕钱娟蔡沛沛欧阳平凯
- 一种合成匹诺塞林的方法
- 本发明涉及一种合成匹诺塞林的方法,公开了菌株的构建方法与高效合成匹诺塞林的新途径,并对其发酵方式进行了底物浓度和诱导时间的优化,证实该菌能以L-苯丙氨酸和葡萄糖为底物,高效合成类黄酮化合物,特别是以0.03M葡萄糖和3 ...
- 陈可泉曹伟佳马伟超张博文欧阳平凯
- 文献传递
- 一种生产顺式-4-羟脯氨酸的生物转化法
- 本发明公开了一种生产顺式‑4‑羟脯氨酸的生物转化法。本发明方法通过在大肠杆菌BL21(DE3)胞内共表达了脯氨酸羟化酶和脯氨酸转运蛋白,实现了高产顺式‑4‑羟脯氨酸在重组菌中的高效合成。与现有的顺式‑4‑羟脯氨酸发酵法相...
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- 文献传递