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周建文

作品数：11 被引量：27H指数：3
供职机构：中山大学附属第一医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 11篇中文期刊文章

领域

  • 11篇医药卫生

主题

  • 5篇细胞
  • 3篇荧光
  • 3篇肠癌
  • 2篇蛋白
  • 2篇荧光定量
  • 2篇原位
  • 2篇原位杂交
  • 2篇乳腺
  • 2篇乳腺癌
  • 2篇细胞系
  • 2篇腺癌
  • 2篇免疫
  • 2篇结肠
  • 2篇结肠癌
  • 2篇甲基化
  • 2篇癌细胞
  • 1篇动物
  • 1篇动物模型
  • 1篇端粒
  • 1篇端粒酶

机构

  • 11篇中山大学附属...
  • 2篇中山大学附属...
  • 1篇广东省中医院
  • 1篇华南理工大学
  • 1篇中国医学科学...
  • 1篇中山大学
  • 1篇中山大学附属...
  • 1篇中山市人民医...
  • 1篇中山大学附属...
  • 1篇上海市浦东新...
  • 1篇南京中医药大...
  • 1篇深圳市卫光生...

作者

  • 11篇周建文
  • 8篇何琼
  • 3篇王冕
  • 3篇赖英荣
  • 3篇李淑华
  • 2篇柯尊富
  • 2篇梁英杰
  • 2篇郑晓克
  • 2篇王连唐
  • 2篇脱颖
  • 2篇刘俊峰
  • 1篇何丹
  • 1篇孙世珺
  • 1篇陈争
  • 1篇师蕊婷
  • 1篇蔡炳
  • 1篇张芬芬
  • 1篇蒋嵩山
  • 1篇宋新明
  • 1篇刘妮

传媒

  • 2篇中国卫生检验...
  • 2篇解剖学研究
  • 2篇中山大学学报...
  • 1篇山东医药
  • 1篇临床与实验病...
  • 1篇热带医学杂志
  • 1篇中国组织化学...
  • 1篇分子诊断与治...

年份

  • 1篇2021
  • 1篇2020
  • 3篇2018
  • 6篇2015
共 11 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
广东省HER-2基因检测室间质控存在的问题分析
2018年
目的依托广东省临床病理质量控制中心分子病理组对广东省内医院开展的荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)方法检测HER-2基因进行室间质控,全面了解HER-2基因检测的标准操作程序(standard operating procedure,SOP)的关键节点,以更好地指导乳腺癌靶向治疗。方法选择HER-2不同阳性模式的石蜡切片作为质控片,同一表达模式病例采取连续切片,首尾2张各做FISH检测以确保质控片质量的一致性。各参加实验室采用各自的荧光原位杂交法,根据实际情况选择相应的探针和消化酶等。质控结果由质控小组成员采取双盲形式进行结果判读。结果从我省参与HER-2基因检测质控的26家实验室汇报的结果来看,各实验室使用的试剂均为国家食品药品监督管理总局批准的试剂,3种试剂探针本身对质控结果的影响无明显差异;个别实验室仍存在一些细节操作及判读的问题,其中标本(1)结果吻合率96.15%,一家单位误判为簇状扩增,标本(2)结果吻合率84.62%,标本(3)结果吻合率100%;消化液使用了胃蛋白酶和蛋白酶K,2种酶的消化效果无特别明显差异,对质控片进行镜下观察发现有2家单位4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(4′,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)通道下轮廓显示不清,提示存在消化过度的问题。结论各实验室应严格按照各实验室操作流程,保证染色过程中的温度、缓冲液及清洗液的浓度和p H值、探针的配置等参数准确。只有通过不断健全室间质控系统,科学设计基础与临床实验流程步骤和评价标准,配合孰知各项实验内容的检测团队,定期进行监查活动,才能确保提高我省HER-2检测的准确性和一致性。
李淑华郑晓克王芳李丽孙世珺何丹彭燕周建文何琼朱宇辛王连唐柯尊富
关键词：室间质控HER-2荧光原位杂交乳腺癌
品管圈活动在自动免疫组织化学仪进行原位杂交中的应用被引量：3
2018年
目的探讨品管圈活动在规范自动免疫组织化学染色仪进行原位杂交实验流程中的作用,以及品管圈活动提高染色质量降低实验失败率的应用效果,从而为患者提供更全面更精准的医疗诊断。方法成立品管圈活动小组,选定规范自动免疫组化仪行原位杂交的流程,提高染色质量、降低原位杂交失败率为活动主题。对我科2016年7月至2016年12月(活动前)以及2017年1月至2017年6月(活动后)在自动组化仪操作的全部原位杂交项目分析原位杂交质量不佳或失败的原因,并对引起实验失败的各种原因进行统计学分析,制定相应的整改措施并组织实施。结果原位杂交染色质量提高、失败率从5.54%降低到了2.33%。结论品管圈作为全面的质量管理的工具,能规范原位杂交工作流程,提高原位杂交成功率,增强团队凝聚力,值得推广。
脱颖蔡炳何琼李淑华周建文梁英杰
关键词：品管圈原位杂交质量管理
多重MethyLight在结直肠癌相关基因ALX4和SEPT9甲基化检测中的应用被引量：5
2015年
【目的】探讨多重Methy Light方法在检测结直肠癌(CRC)外周血ALX4、SEPT9基因甲基化状态中的价值,为CRC无创检测提供新方法。【方法】采用不同的荧光报告基团标记ALX4、SEPT9基因甲基化探针,利用高敏感性、高特异性的多重实时定量甲基化特异性PCR方法(MSP,Methy Light),同时检测ALX4、SEPT9基因在CRC外周血中的甲基化情况。【结果】ALX4、SEPT9基因可分别在48%(24/50),75%(38/50)的CRC患者外周血及6%(3/50),4%(2/50)的健康人群外周血中检测到甲基化;与健康人群相比,CRC患者外周血中ALX4、SEPT9基因的甲基化水平均明显升高(P<0.001)。【结论】利用多重Methy Light多基因联合检测技术,可高效特异地检测到CRC外周血中ALX4、SEPT9基因甲基化水平明显升高。
何琼王冕周建文刘妮赖英荣
关键词：结直肠癌甲基化
干细胞标记物LGR5在小鼠结肠癌模型中的表达被引量：2
2015年
目的 探讨富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体（LGR5）在小鼠结肠癌模型中的表达特点。方法 选取80只6~10周龄C57/BL6小鼠,采用腹腔注射氧化偶氮甲烷法建立小鼠结肠癌模型,以生理盐水注射组作为对照,采用RT-PCR和免疫组化方法检测LGR5 m RNA及蛋白在小鼠结肠癌组织中的表达特点。结果 接受氧化偶氮甲烷注射的40只小鼠中有30只成功诱发结肠癌,其中24只结肠癌中LGR5 m RNA和蛋白表达水平显著升高;与LGR5阴性细胞相比,LGR5阳性细胞中的Ki67表达水平明显升高。结论 LGR5在结肠癌组织中表达水平显著升高,可能在结肠癌的发生发展中起到了重要作用。
何琼江洁周建文王冕
关键词：结肠癌KI67蛋白动物模型
四种全自动免疫组化仪染色结果的比较分析被引量：2
2020年
免疫组化技术已成为临床病理诊断中常规检测手段之一,特别是在判断肿瘤组织的起源、分类以及良、恶性肿瘤的鉴别诊断等方面发挥重要作用。但在实际工作中,因工作环境、检测方法及个人操作差异等因素影响染色结果的准确性和稳定性。全自动免疫组化仪的应用对免疫组化标准化染色起到了推动作用,可以有效解决人为因素对染色结果的影响[1-4]。本实验对四种全自动免疫组化仪检测五种抗体染色的结果进行比较,优化染色流程,最终达到一致性高的检测结果。
高丽丽脱颖周建文张芬芬梁英杰朱长乐
关键词：CALPONINCD5BCL-6
ARMS法与下一代测序法检测非小细胞肺癌EGFR基因突变的比较被引量：2
2018年
目的本研究旨在通过对突变扩增阻滞系统(ARMS)法与下一代测序法(NGS)检测非小细胞肺癌(NSCLC)EGFR基因突变的比较分析,来探索更适合我国临床肺癌患者EGFR基因突变的检测方法。方法收集22例NSCLC患者标本,分别用ARMS法及二代测序法对标本进行EGFR基因突变检测,分析比较两种方法的优劣。结果本次实验的22例标本其中17例EGFR基因突变结果两种检测方法一致,结果为EGFR单突变6例,双突变1例,阴性10例;2例ARMS法检测为单突变,二代测序法检测为双突变;3例ARMS法未检测到突变,二代测序法检测到突变。结论 ARMS法与二代测序法检测EGFR基因突变结果基本一致,但各有优缺点,两种方法结合检测效果更好。
唐翠兰郑晓克周建文何琼李淑华王连唐柯尊富
关键词：EGFR基因突变ARMS法非小细胞肺癌
远端型遗传性运动神经元病家系全基因组外显子测序研究被引量：7
2015年
【目的】报告1例远端型遗传性运动神经元病(d HMN)家系,对家系进行分子遗传学研究,探寻致病基因,并探讨全基因组外显子测序在临床诊断和研究中的应用价值。【方法】对该家系进行临床及电生理检查,在排除与临床诊断相关已知基因的突变后,先对该家系的先证者和另一旁支的患者进行全基因组外显子测序、生物信息学分析,然后对采集到血样的22名家系成员,包括10例患者进行突变筛查及突变与疾病共分离分析。【结果】全基因组外显子测序、突变筛查及突变与疾病共分离分析结果显示该家系先证者和患者BSCL2基因3号外显子糖基化位点发生p.Ser90Leu突变,为国内首次报导。【结论】d HMN是一类临床和遗传异质性都很强的遗传病,外显子测序是诊断d HMN的有效方法。在研究具有高度遗传异质性的遗传病时,运用外显子组测序技术发现致病性突变比常规的PCR加产物测序更为简便、快速。
师蕊婷周建文邓素雯蒋嵩山何姝婧宋新明陈争
采用茎环引物实时荧光定量PCR检测胶质瘤细胞系中miR-23a的相对表达量
2015年
目的神经胶质瘤是中枢神经系统中最普遍、最具侵袭性的原发性肿瘤,具有高发病率和高死亡率的特征。microRNAs(miRNAs)是一类平均长约22nt的非编码小RNA,主要在转录后水平负责调控基因的表达,参与癌症发生发展过程。miR-23a起着原癌基因的作用,在多种恶性肿瘤中miR-23a高表达,本文比较人正常脑组织和胶质瘤细胞系中miR-23a的相对表达水平。方法分别抽提正常脑组织和胶质瘤细胞系中的总RNA,设计反转录miR-23a的茎环引物及定量的正反向引物,使用SYBR Green试剂对其进行实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测。结果设计的引物能高效且特异地逆转录并且扩增miR-23a;miR-23a在胶质瘤细胞系A172、U87、U251中均显著高表达,是正常脑组织表达量的4倍以上。结论设计的miR-23a引物能有效地进行qRT-PCR;miR-23a在胶质瘤细胞系中高表达。
周建文何琼刘俊峰谢晨赖英荣
关键词：胶质瘤细胞实时荧光定量PCR
采用优化TRAP方法检测乳腺癌细胞系中端粒酶活性被引量：1
2021年
目的端粒酶活性的检测方法-TRAP技术被广泛应用于肿瘤相关研究。方法用293T细胞优化端粒酶活性反应体系,并用优化的TRAP方法检测3种乳腺癌细胞系(MCF-7、MDA-MB-231和SK-BR-3)的端粒酶活性。结果293T细胞端粒酶活性随蛋白含量的降低逐渐下降。当反应体系中加入含10 ng蛋白的细胞裂解液时,尚有明显的PCR扩增条带。3种乳腺癌细胞系端粒酶活性随着反应体系中蛋白浓度的下降而下降。MDA-MB-231端粒酶活性最高,MCF-7次之,SK-BR-3端粒酶活性最低。结论优化了TRAP端粒酶活性检测方法并检测3种乳腺癌细胞系的端粒酶活性。优化的TRAP方法具有更高的敏感性并且降低了检测成本,可被广泛应用于肿瘤细胞及永生化细胞端粒酶活性的检测。
王皓莉周建文彭娅娅蔡美虹王维
关键词：端粒酶活性TRAP乳腺癌
去甲基化药物DAC对结肠癌细胞及其TMEFF2基因表达的影响被引量：2
2015年
目的探讨去甲基化药物5-氮杂-2′脱氧胞苷(DAC)对结肠癌细胞及其表皮生长因子和卵泡抑素结构域跨膜蛋白(TMEFF2)基因表达的影响。方法以不同浓度的DAC药物处理结肠癌细胞Caco-2,采用Caspase 3/7试剂盒检测细胞凋亡率,同时提取药物处理前后的细胞总RNA,利用实时荧光定量RT-PCR的方法检测TMEFF2基因表达情况。结果DAC药物处理后Caco-2细胞凋亡率明显增加(P<0.05),且呈时间、药物浓度依赖性。去甲基化药物处理后,Caco-2细胞中TMEFF2基因m RNA表达水平明显升高(P<0.05)。结论 TMEFF2基因处于甲基化状态时,其在Caco-2细胞株中表达水平升高,提示TMEFF2基因启动子区的甲基化对下游m RNA的表达可能具有调控作用。
何琼周建文王冕
关键词：结肠癌去甲基化
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