柯志强
- 作品数：13 被引量：26H指数：4
- 供职机构：湖北科技学院更多>>
- 发文基金：湖北省高等学校优秀中青年科技创新团队计划项目湖北省教育厅青年基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人G6PD在大肠埃希菌中的表达及体外抑制剂筛选模型的建立
- 2022年
- 目的表达人6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PD)并建立其体外抑制剂筛选模型。方法设计一对5′端分别带NdeⅠ、XhoⅠ位点的引物,PCR扩增G6PD cDNA。将cDNA和质粒pET-28a经NdeⅠ+XhoⅠ酶切后连接,连接产物转化大肠杆菌Top10。将鉴定的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用0.4 mmol/L IPTG诱导G6PD表达,镍离子亲和层析柱纯化G6PD。以6-磷酸葡萄糖(G6P)和烟酰胺腺嘌呤核苷二磷酸(NADP+)为G6PD的底物和辅因子,检测340 nm波长处光吸收值(A_(340))的变化,确定G6PD及其抑制剂脱氢表雄酮(DHEA)的最佳浓度,计算模型的可靠性指数—Z′因子。结果构建了重组质粒pET-28a-G6PD,重组菌BL21(DE3)-pET-28a-G6PD经IPTG诱导后,可溶性G6PD表达量为2.5 mg/L,G6PD、DHEA的最适浓度分别为900μg/L、20μmol/L,筛选模型的Z′因子为0.88。结论在大肠杆菌中表达了有活性的G6PD,建立了可靠的体外抑制剂筛选模型。
- 金科华游云悠魏友煜左越柯志强尧青刘洁
- 关键词：抑制剂
- 复方总黄酮对小鼠慢性酒精性肝病治疗作用的研究被引量：1
- 2015年
- 目的探讨复方总黄酮对慢性酒精中毒小鼠肝损伤的治疗作用。方法选用SPF级C57BL/6小鼠100只随机分为5组,正常组、正常+高剂量药物组、模型组、模型+低剂量药物组、模型+高剂量药物组,每组20只。采取用酒精自由饮法建立小鼠慢性酒精肝中毒模型,同时用复方总黄酮进行干预,实验6个月。观察小鼠体重变化及计算肝体质比,检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平,肝丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)等指标,制作肝组织石蜡切片并HE染色观察其形态学变化。结果酒精模型组小鼠体重减轻,肝体质比增大,血清TC、TG、肝MDA明显增高,肝SOD、GSH-Px、CAT降低,肝组织脂肪变。模型+复方总黄酮给药组较模型组各种中毒症状均有所缓解;肝脂肪病变程度明显减轻。结论酒精通过脂质过氧化反应损伤肝脏,复方总黄酮可以提高抗氧化酶水平抑制脂质过氧化。
- 李丹柯志强杨洁陈清杰刘超吴基良
- 关键词：C57BL/6小鼠酒精性肝病脂质过氧化抗氧化酶
- AMPK信号通路在白藜芦醇改善高糖诱导乳鼠心肌细胞损伤中的作用
- 目的：本研究旨在探讨Res是否通过抑制NADPH氧化酶活性，减少ROS产生，从而抗高糖介导的心肌凋亡，并进一步探讨其机制。 方法：30mmol/L高糖刺激原代乳鼠心肌细胞，采用Western blot方法检测在有或无Re...
- 柯志强
- 关键词：白藜芦醇凋亡AMPK心肌细胞
- 文献传递
- 磷酸肌酸钠通过miR-25-3p/肌浆网Ca^2+泵-2a信号通路改善多柔比星诱导大鼠心肌损伤被引量：5
- 2019年
- 目的探讨磷酸肌酸钠(CP)对多柔比星(DOX)所致大鼠心肌损伤的保护机制.方法①体内实验:雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、DOX组和CP+DOX联合组,均隔天给药1次,持续26 d.DOX组前3次ip给予生理盐水5 mL·kg^-1;之后ip给予DOX 2 mg·kg^-1,共7次.CP+DOX组,前3次ip给予CP 200 mg·kg^-1;之后隔天ip给予CP 200 mg·kg^-1,30 min后再ip给予DOX 2 mg·kg^-1,共7次;之后继续隔天ip给予CP 200 mg·kg^-1,共3次.停药1周后进行指标检测.②体外实验DOX 1μmol·L^-1单独或与N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)0.5 mmol·L^-1或与CP 1 mmol·L^-1共同处理H9C2心肌细胞24 h.HE染色观察大鼠心肌组织病理变化;Masson染色检测大鼠心肌组织胶原纤维沉积;TUNEL染色检测大鼠心肌组织细胞凋亡;荧光定量PCR分析大鼠心肌组织和心肌细胞H9C2中miR-25-3p mRNA表达;CCK8法检测心肌细胞H9C2存活率;Western印迹法检测大鼠心肌组织和H9C2心肌细胞中超氧化物歧化酶2(SOD2)、肌浆网Ca^2+泵-2a(SERCA2a)和活化的胱天蛋白酶3蛋白表达.结果①体内实验:与正常对照组相比,DOX组心肌组织中肌纤维排列紊乱,胶原纤维累积增加,细胞凋亡增加明显,miR-25-3p mRNA和活化的胱天蛋白酶3蛋白表达水平上升(P<0.05),而SOD2和SERCA2a蛋白表达水平下降(P<0.05);与DOX组比较,CP+DOX联合组心肌组织肌纤维排列较为整齐,胶原纤维累积减轻,凋亡细胞明显减少(P<0.05),miR-25-3p mRNA和活化的胱天蛋白酶3蛋白表达水平降低,而SOD2和SERCA2a蛋白表达水平明显增加(P<0.05).②体外实验:DOX诱导心肌细胞H9C2内miR-25-3p mRNA和活化的胱天蛋白酶3蛋白表达呈时间依赖性上调(r=0.9681,r=0.66,P<0.05),而SERCA2a蛋白表达水平在DOX处理3 h后达到峰值,随后逐渐下降至低于细胞对照组.与细胞对照组比较,DOX组存活率显著降低(P<0.05);与DOX组比较,CP+DOX组细胞存活率显著升高(P<0.05);与DOX组相比,CP+DOX组H9C2细胞miR-25-3p mRNA和活化的胱天蛋白酶3蛋白表
- 张雪洁尧青胡玲柯志强张波张波杨晓松
- 关键词：磷酸肌酸钠多柔比星
- 姜黄素对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用研究被引量：6
- 2016年
- 目的探讨姜黄素对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及可能机制。方法雄性SD大鼠110只,随机抽取10只大鼠作为正常对照组(Con组),其余100只大鼠给予高糖高脂饮食喂养8周后,腹腔注射链脲佐菌素STZ 35 mg/kg,给药72h随机血糖≥16.7mmol/L为造模成功。糖尿病大鼠随机分为糖尿病肾病组(DN组)、姜黄素治疗组(DN+Cur组)。测定血清肌酐(Crea)、尿素氮(BUN)水平,测定肾脏组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)含量,测定24h尿蛋白含量,Western blotting方法检测肾脏组织中TGF-β1、LC3-Ⅱ、P62蛋白表达。结果姜黄素治疗后可明显改善糖尿病所致的大鼠血清中Crea、BUN升高变化,抑制肾脏中MDA的产生,并升高SOD、GSH-Px、CAT活性,减少24h尿蛋白含量,下调糖尿病大鼠肾脏组织TGF-β1、P62的蛋白表达,上调LC3-Ⅱ蛋白的表达。结论姜黄素对大鼠糖尿病肾病具有保护作用,其机制可能与抑制氧化应激有关,可能与TGF-β1调控自噬有关。
- 赵辛元李丹柯志强
- 关键词：糖尿病肾病姜黄素氧化应激TGF-Β1自噬
- 基于fQRS波构建的列线图模型对急性前壁ST段抬高型心肌梗死PCI术后近期MACE的预测价值被引量：3
- 2023年
- 目的:构建基于体表心电图的碎裂QRS(fQRS)波列线图模型,评估该模型对急性前壁ST段抬高型心肌梗死行经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术病人近期发生主要心脑血管不良事件(MACE)的预测价值。方法:回顾性选取2017年8月—2020年7月于湖北科技学院附属第一医院急诊行PCI术的急性前壁ST段抬高型心肌梗死病人218例的临床资料。根据入院时心电图是否存在fQRS波分为fQRS波组(69例)和非fQRS波组(149例);根据病人PCI术后12个月内是否发生MACE事件分为MACE组(98例)和非MACE组(120例)。采用LASSO与多因素Logistic回归分析法分析fQRS波与急性前壁ST段抬高型心肌梗死PCI术后病人12个月内发生MACE的相关性,并评估其独立危险因素,通过R语言构建基于fQRS波的列线图模型并对该模型进行验证。结果:fQRS波组MACE发生情况较非fQRS波组高(P<0.05)。单因素分析结果显示,MACE组与非MACE组左心室舒张末期内径(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)、左心室收缩末期内径(LVESD)及氨基末端脑利钠肽前体(NT-proBNP)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、三酰甘油、心肌肌钙蛋白I(cTnI)比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。LASSO结合多因素Logistics回归分析显示,血红蛋白浓度、LVEF与MACE发生呈负相关(P<0.05),NT-proBNP、fQRS波、白细胞计数、三酰甘油与MACE发生呈正相关(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线显示,列线图预测MACE发生风险的曲线下面积(AUC)为0.85,95%CI(0.73,0.91);采用Bootstrap方法重复抽样1000次验证列线图,校准曲线的平均绝对误差为0.019,说明校准曲线与理想曲线贴合良好;且临床决策曲线显示,当MACE的发生阈值为0.08~0.88时该模型图的适用性佳。结论:基于体表心电图的碎裂QRS波构建的列线图模型能较好地预测急性前壁ST段抬高型心肌梗死行PCI术治疗病人近期发生MACE的风险,具有较好的临床适用性。
- 孙慧荣柯志强王艺烨王欢王曲解
- 关键词：碎裂QRS波主要心血管不良事件
- 一种GLP-1受体激动剂高通量筛选细胞模型
- 2023年
- 目的构建GLP-1受体激动剂高通量筛选细胞模型。方法构建pEGFP-GLP-1R-3C重组质粒,转染HEK293T细胞,用G418和流式细胞仪进行筛选。所构建的细胞系命名为HEK293T-GLP-1R-3C-eGFP细胞系。Western blot和激光共聚焦检测GLP-1R-3C-eGFP蛋白的表达。将环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)响应元件报告基因转染HEK293T-GLP-1R-3C-eGFP细胞,不同浓度的GLP-1刺激后,用一步法荧光素酶报告基因检测试剂盒检测发光值反映细胞cAMP水平,采用cAMP试剂盒(ELISA)进行验证。结果成功构建HEK293T-GLP-1R-3C-eGFP细胞系。不同浓度GLP-1刺激后,发光值变化趋势与细胞cAMP水平变化趋势相似。本实验中Z′因子的值为0.52。结论本研究建立了基于重组HEK293T细胞株,其可用于GLP-1受体激动剂高通量筛选。
- 王芮杨紫鑫柯志强柯志强苏正定
- 关键词：GLP-1GLP-1受体激动剂荧光素酶报告基因
- GLP-1R激动剂及正变构调节剂研究进展
- 2023年
- 胰高血糖素样肽-1受体(glucagon-like peptide-1 receptor,GLP-1R)是治疗2型糖尿病的重要靶标,作为一种G蛋白偶联受体可通过胰高血糖素样肽-1介导胰岛素分泌。该文对胰高血糖素样肽-1和GLP-1R的结构与功能进行综述,并对肽类GLP-1R激动剂、非肽类小分子GLP-1R激动剂和GLP-1R正变构调节剂的设计开发进行讨论,旨在为进一步探寻2型糖尿病的治疗方案提供思路。
- 王芮杨紫鑫宋士奎柯志强柯志强
- 关键词：胰高血糖素样肽-1胰高血糖素样肽-1受体
- GLP-1受体激动剂对心血管作用的研究进展
- 2024年
- 胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)由肠道内分泌细胞产生。GLP-1受体激动剂(GLP-1 receptor agonists,GLP-1RAs)促进葡萄糖相关的胰岛素分泌和抑制胰高血糖素分泌。GLP-1RAs还能抑制胃排空、食物摄入和限制体质量增加。在过去的十年中,GLP-1RAs对心血管系统影响的研究已经取得重大进展。口服小分子GLP-1RAs具有潜在优势,可以提高该类药物的应用。该文综述了GLP-1RAs在心血管疾病治疗中的多种作用,为GLP-1RAs的心血管获益提供新见解。
- 柯志强马倩倩李丹赵辛元赵辛元刘超
- 关键词：GLP-1GLP-1受体激动剂
- Ang Ⅱ和Cx43通过VSMCs参与血管钙化的研究进展被引量：1
- 2015年
- 血管钙化（vascular calcification）主要由过量的钙盐在细胞介导下主动沉积于血管组织所致。钙化血管的舒张功能下降,血管僵硬度增加,并且血管里面的血小板粘附和聚集性都增强,易引起动脉血栓的形成和动脉粥样硬化斑块的破裂,因此,可以认为血管钙化是导致心血管疾病的重要危险因子。
- 柯志强尧青吴基良
- 关键词：血管钙化VSMCSCX43
