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李昆: 作品数：10 被引量：25H指数：4; 供职机构：江西农业大学动物科学技术学院更多>>; 发文基金：江西省科技支撑计划项目国家自然科学基金江西省高等学校教学改革研究课题更多>>; 相关领域：农业科学历史地理电子电信更多>>

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木质素降解菌的筛选及其漆酶性质研究被引量：4: 2015年; 为筛选产漆酶的木质素降解菌,采用愈创木酚平板法和RB亮蓝平板法进行菌株筛选,利用16S rDNA序列分析对菌株进行鉴定,通过液体发酵培养对漆酶活性和木质素降解能力进行研究。将漆酶基因cotA克隆到表达载体pET-32a（＋）上获得重组质粒pET-32a（＋）-CotA并转化到BL21中进行表达,通过酶活测定将表达条件进行优化。结果：从白蚁肠道中成功筛选出1株产漆酶的木质素降解菌,鉴定为枯草芽胞杆菌。漆酶的最适酶活温度为60℃,最适酶活pH为3.5-4.0;0.2 mmol/L Cu^2＋可诱导菌株漆酶的产生,缩短了产酶时间并提高了酶活性。菌株木质素降解率在液体发酵培养24 h后达到了17.1%。漆酶基因大小为1542 bp,表达的重组蛋白为85 ku,属于有活性的可溶性蛋白。在IPTG浓度为1mmol/L、Cu^2＋浓度为0.3mmol/L、诱导时间为9 h的条件下,漆酶蛋白活性可达到113.10 U/L。研究表明,本试验成功筛选出1株降解木质素能力较强的枯草芽胞杆菌,获得可分泌较高活性漆酶的重组菌,为木质素酶在畜牧业生产实践上的应用奠定了基础。; 樊云燕李昆张锦华; 关键词：漆酶枯草芽胞杆菌

A型产气荚膜梭菌beta2毒素基因克隆及生物学信息分析: 背景:A型产气荚膜梭菌是一种潜在引起新生仔猪腹泻的病原菌,该菌产生的beta 2毒素与新生仔猪肠炎密切相关。目的 :为了研究A型产气荚膜梭菌beta 2毒素基因的结构特征及编码蛋白的功能。方法 :根据Gen Bank中b...; 李昆樊云燕闫学艳张锦华; 关键词：A型产气荚膜梭菌克隆; 文献传递

江西地区哺乳仔猪携带beta2毒素基因CpA的分离与鉴定: 本试验根据产气荚膜梭菌α、p、β2、ε、v和e毒素基因分别设计合成6对引物,建立PCR检测方法,对江西部分地区56份仔猪腹泻样品进行肠毒素基因检测,结果检测出2份e毒素基因阳性的样品.采用改良D-环丝氨酸培养基对54份e...; 周姣刘宝生李昆陈瑞光张锦华; 关键词：仔猪 A型产气荚膜梭菌肠毒素基因

一种仔猪坏死性肠炎微生态调节剂及其制备方法、包含调节剂的饲料: 本发明公开了一种仔猪坏死性肠炎微生态调节剂及其制备方法、包含调节剂的饲料，属于兽用生物制品制造领域。该调节剂为包括唾液乳杆菌CGMCC No.14458和枯草芽孢杆菌GIM 1.976两种菌种的微生物发酵液，以纯种扩大培...; 张锦华刘宝生张庆生周姣李昆韩春生; 文献传递

A型产气荚膜梭菌beta 2毒素基因克隆及生物学信息分析: 背景：A型产气荚膜梭菌是一种潜在引起新生仔猪腹泻的病原菌，该菌产生的beta 2毒素与新生仔猪肠炎密切相关。目的：为了研究A型产气荚膜梭菌beta2毒素基因的结构特征及编码蛋白的功能。方法：根据GenBank中beta ...; 李昆樊云燕闫学艳张锦华; 关键词：A型产气荚膜梭菌克隆

健康与腹泻仔猪肠道菌群多样性差异分析被引量：5: 2015年; 探讨腹泻对仔猪肠道菌群变化的影响,以健康仔猪和腹泻仔猪新鲜粪便为研究对象,利用传统平板计数的方法和PCR-DGGE技术比较了不同日龄健康和腹泻仔猪肠道菌群数量差异和菌群结构变化。结果表明不同日龄的仔猪粪便样品中的细菌总数,乳酸杆菌数腹泻组较健康组均有下降,其中21日龄健康与腹泻仔猪的细菌总数差异极显著,乳酸杆菌数差异显著;DGGE指纹图谱聚类分析表明,与其它日龄组相比21日龄健康组与腹泻组样品肠道总细菌和乳酸杆菌菌群结构均相似度最低。说明仔猪发生腹泻引起的细菌数量变化与菌群结构复杂程度变化可能存在一定的相关性。; 闫学艳何后军刘宝生李昆张锦华; 关键词：仔猪腹泻活菌计数乳酸杆菌 PCR-DGGE

江西地区仔猪肠道A型产气荚膜梭菌的分离及其β_2毒素的研究被引量：8: 2018年; 为研究A型产气荚膜梭菌(CpA)的β_2毒素对仔猪坏死性肠炎(NEC)的影响,本试验采用改良FTG培养基从江西地区健康与腹泻哺乳仔猪新鲜粪便中初分离Cp,再对所分离Cp菌株进行生化和16S r DNA分子鉴定,统计江西省7个地区健康和腹泻仔猪肠道Cp分离率;通过多重PCR技术对CpA菌株及CpA β_2^+毒素基因携带率进行测定;将CpA(β_2^+/β_2^-)分离株进行小鼠毒性试验。结果显示:255份哺乳仔猪粪便样品中,腹泻样品Cp分离率为89.6%(138/154),健康样品Cp分离率为90.1%(91/101),其中CpA占分离菌株的89.5%(205/229);CpA菌株的β_2毒素携带率为99.5%(204/205),表明江西地区仔猪肠道CpA携带率及CpA(β_2^+)比例均较高;所分离的CpA菌株通常携带2个以上质粒,且β_2毒素基因位于CpA菌其中的质粒中;来源于腹泻仔猪的CpA(β_2^+)、CpA(β_2^-)和健康仔猪的CpA(β_2^+)培养上清分别以腹腔接种小鼠,均可引起小鼠不同程度死亡。从小鼠毒性试验结果表明CpA与菌株来源健康或腹泻仔猪、是否携带β_2毒素没有直接关系,其毒性作用可能主要与宿主肠道环境有关。本实验为研究CpA(β_2^+)在NEC中的影响提供初步实验依据。; 周姣刘宝生韩春生李昆戴益民张锦华; 关键词：仔猪 CPA 多重PCR 毒性试验

江西部分地区哺乳仔猪含β2毒素基因的A型产气荚膜梭菌分子流行病学调查及拮抗CpA的乳酸杆菌筛选: 产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens，Cp）是引起家畜动物梭菌性肠炎的重要病原菌之一，因该菌所产生的不同毒素组合依次可以将其分为A、B、C、D、E五种毒素型。其中A和C型产气荚膜梭菌是猪的主要肠道...; 李昆; 关键词：哺乳仔猪 A型产气荚膜梭菌分子流行病学乳酸杆菌; 文献传递

多种饲料添加剂类抗生素对猪源产气荚膜梭菌的抑菌效果研究被引量：4: 2015年; 本试验目的在于研究多种不同饲料添加剂类抗生素对产气荚膜梭菌的抑菌试验,筛选出对产气荚膜梭菌抑菌效果强的药物,为饲料、养殖业临床上控制产气荚膜梭菌提供理论依据。试验选用喹乙醇、4%恩拉霉素、盐霉素、硫酸黏霉素、15%杆菌肽锌、黄霉素、吉他霉素和盐酸金霉素八种饲料常用抗生素添加剂,采用试管稀释法对猪源产气荚膜梭菌野毒株进行抑菌试验。试验结果表明:(1)恩拉霉素抑菌作用最强,其MIC为1.6μg/m L;(2)喹乙醇和15%杆菌肽锌抑菌作用较强,它们的MIC分别为4μg/m L和6μg/m L;(3)黄霉素、硫酸黏霉素、吉他霉素抑菌作用较弱,它们的MIC分别为40μg/m L、200μg/m L、300μg/m L;(4)盐霉素及盐酸金霉素对该产气荚膜梭菌野毒株几乎没有抑菌作用。由以上八种抗生素对产气荚膜梭菌的抑菌试验结果得出,八种抗生素对该产气荚膜梭菌野毒株均有不同程度的抑菌作用,而恩拉霉素对产气荚膜梭菌抑菌效果最强。; 李昆樊云燕闫学艳周姣张锦华; 关键词：抑菌试验

江西地区哺乳仔猪携带beta2毒素基因CpA的分离与鉴定: 本试验根据产气荚膜梭菌α、β、β2、ε、τ和e毒素基因分别设计合成6对引物,建立PCR检测方法,对江西部分地区56份仔猪腹泻样品进行肠毒素基因检测,结果检测出2份e毒素基因阳性的样品。采用改良D-环丝氨酸培养基对54份e...; 周姣刘宝生李昆陈瑞光张锦华; 关键词：仔猪 A型产气荚膜梭菌肠毒素基因

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