苏晔
- 作品数：11 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市科技计划天津市科技发展战略研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗P-gp抗体PHMA02在裸鼠体内的影像分布研究
- 2006年
- 目的研究抗P-糖蛋白(P-gp)的鼠源性单克隆抗体PHMA02在移植有K562/A02细胞瘤的裸鼠体内的影像分布。方法通过杂交瘤技术制备PHMA02抗体,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western-blot技术鉴定纯度,荧光激活细胞分选术(FACS)测抗体与K562和K562/A02细胞的结合活性,改良氯胺T法125I标记抗体,尾静脉注射入裸鼠,分时间点行SPECT扫描。结果纯化所得PHMA02纯度较高,与P-gp+的K562/A02细胞特异性结合阳性率为94.47%,注入125I标记的PHMA02后,P-gp+(K562/A02)组第2日全部裸鼠瘤区出现放射性浓聚,并在随后数日浓集进一步增强。结论125I-PHMA02抗体在P-gp+(K562/A02)组和P-gp-(K562)对照组的影像学差异可以明确区分P-gp+的肿瘤组织。
- 秦岚邵梦麟王树滨苏晔吕晶丽高瀛岱刘芳郭红
- 抗耐药肿瘤新药PHII-7的合成与作用机理研究
- 苏晔熊冬生杨纯正
- 4-1BBL胞膜外区蛋白对人外周血淋巴细胞体外活性的调节作用
- 2008年
- 目的:研究4-1BBL胞膜外区融合蛋白(ex4-1BBL)对人外周血淋巴细胞(PBL)体外活性的调节作用。方法:表达纯化人4-1BBL胞膜外区融合蛋白,台盼蓝计数观察其对淋巴细胞增殖的作用;CytoTox 96非放射性细胞毒试剂盒检测培养液的乳酸脱氢酶(LDH)水平,ELISA检测白介素-2(IL-2)水平。CytoTox 96检测其联合应用anti-CD3/anti-Pgp微型双功能抗体及PBL对靶细胞K562/A02细胞的杀伤作用。结果:4-1BBL胞膜外区融合蛋白能够促进淋巴细胞增殖,减少细胞死亡,促进IL-2分泌;联合应用ex4-1BBL的淋巴细胞组的杀伤效率优于对照组。结论:ex4-1BBL可能成为增强淋巴细胞活性的重要免疫佐剂。
- 郭红星程昕苏晔范冬梅邵晓枫许元富杨纯正熊冬生
- 关键词：4-1BBL淋巴细胞双功能抗体
- 二硫键稳定的抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体的构建、表达及活性测定被引量：1
- 2009年
- 向抗CD3/抗Pgp(P-glycoprotein)微型双功能抗体(Diabody)中引入二硫键,使diabody两条链以共价键交联,增强其稳定性。用重叠PCR(Overlap PCR)和PCR方法,将抗CD3/抗Pgp diabody中抗CD3或抗Pgp轻重链可变区的适当部位定点突变成半胱氨酸,进行原核表达。表达产物经阳离子层析柱和抗Etag亲和层析柱分离纯化,还原性和非还原性SDS-PAGE电泳鉴定。应用间接免疫荧光和竞争性免疫荧光结合流式细胞分析技术(FCM)检测生物学活性。将改造前后的两种抗体分别置37oC含0.2%人血清白蛋白(Human serum albumin,HAS)的PBS中孵育,取多个时间点比较两者与两种把抗原的结合能力。基因重组质粒经测序证实序列正确。向抗Pgp轻重链引入突变的diabody(dsPgp-diabody)在原核表达系统中,SDS-PAGE显示纯化后的蛋白二硫键不能配对。而向抗CD3轻重链引入突变的diabody(dsCD3-diabody)能够在原核表达系统中进行可溶性表达,二硫键能够正确配对。并且与改造前的diabody相比,dsCD3-diabody的抗原结合特异性没有改变,抗原结合和竞争活性均无下降。改造前的diabody在37oCPBS(0.2%HAS)中孵育1h后活性即开始下降,24h后活性完全丧失;而dsCD3-diabody孵育72h后活性并无明显下降。本实验成功构建了dsCD3-diabody,并且能够进行可溶性表达。向diabody抗CD3轻重链区引入的二硫键在宿主菌中可以正确配对,抗原结合活性没有明显下降,而稳定性大大增强。向diabody轻重链区引入二硫键,以增强其稳定性的方法是可行的。
- 苏晔刘娟妮高瀛岱秦立杨铭王金宏许元富邵晓枫纪庆熊冬生杨纯正
- 关键词：基因工程抗体DIABODY二硫键药物稳定性
- PHⅡ—7增强阿霉素杀伤HL-60／ADR细胞的作用及机制研究被引量：2
- 2008年
- 目的研究PHⅡ-7增强阿霉素杀伤HL-60／ADR细胞的作用及其相关机制。方法用MTT法测定阿霉素、PHⅡ-7单独及联合用药对阿霉素杀伤人急性髓系白血病耐药细胞株（HL-60／ADR）及其亲代细胞系（HL-60）作用的，IC50值，提取不同浓度PHⅡ-7处理不同时间后HL-60和HL-60／ADR细胞的RNA，RT—PCR法分析PHⅡ-7对MRP基因表达水平的影响，通过激光共聚焦显微镜和流式细胞术观察PHⅡ-7处理前后HL-60和HL-60／ADR细胞内阿霉素浓度的改变。结果PHⅡ-7本身具有抗肿瘤活性，对HL-60和HL-60／ADR的，IC50值分别为（0．83±0．08）μmol／L，（1．74±0．56）μmoL／L。PHⅡ-7还能协同提高阿霉素的细胞毒作用，HL-60组两药相互作用指数（CDI）值为0．7，HL-60／ADR组CDI值为0．43，其对耐药细胞的协同作用更为显著。随PHⅡ-7作用时间延长及剂量增加，细胞MRP基因表达水平逐渐下降，细胞内阿霉素浓度逐渐提高，可达敏感细胞的55％。结论PHⅡ-7是有效的肿瘤细胞化疗药物，还具有下调MRP耐药基因表达的作用，从而有效逆转HL-60／ADR细胞的耐药现象，协同增强化疗药物对细胞的杀伤作用。
- 张砚君王锐邵晓枫范冬梅许元富周圆刘芳刘芳苏晔
- 关键词：多药MRP基因阿霉素HL-60细胞
- 抗耐药肿瘤新药PHⅡ-7的合成及作用机理的基因组学研究
- 目的多药耐药作为肿瘤化疗中的常见现象,当今仍然是化疗失败和肿瘤病人死亡的最主要原因之一。本实验目的是发现能有效抗耐药肿瘤的先导化合物,并研究其作用机理。方法中药当归龙荟丸可有效治疗慢性粒细胞性白血病,我们以其有效成分靛玉...
- 苏晔杨纯正熊冬生
- 关键词：肿瘤多药耐药
- 文献传递
- 抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体在小鼠体内性质的研究被引量：2
- 2006年
- 目的:研究抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体的体内作用。方法:125I标记抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体采用氯胺T法,并采用昆明鼠和人K562耐药裸鼠移植瘤模型分别测定该微型双功能抗体在小鼠体内的药代动力学和体内组织分布;采用人K562耐药及敏感裸鼠移植瘤模型测定该微型双功能抗体介导的体内靶向杀伤活性及其不良反应。结果:抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体在昆明鼠体内的半衰期为2h;尾静脉注射抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体6h后,其在肿瘤部位的分布高于其他组织,在12h和24h时,其在肿瘤与血液分布的比率分别为2.69和8.09;抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体能介导人T细胞有效杀伤表达Pgp抗原的K562耐药细胞。结论:抗Pgp/抗CD3微型双功能抗体能在裸鼠皮下人白血病细胞移植瘤部位富集,并能有效地抑制耐药白血病移植瘤的生长,无明显的不良反应。
- 秦岚赵艳津高瀛岱杨铭苏晔吕晶丽邵梦麟熊冬生杨纯正
- 关键词：P糖蛋白小鼠
- 抗耐药肿瘤新药PHII-7的合成与作用机理研究
- 目的:多药耐药作为肿瘤化疗中的常见现象,当今仍然是化疗失败和肿瘤病人死亡的最主要原因之一。本课题目的是发现能有效抗耐药肿瘤的先导化合物,并研究其作用机理。方法:中药当归龙荟丸可有效治疗有效治疗慢性粒细胞性白血病,我们以其...
- 苏晔熊冬生杨纯正
- 关键词：多药耐药表达谱芯片
- 文献传递
- 抗耐药肿瘤新药PHII-7的合成与作用机制研究
- ＜正＞目的多药耐药作为肿瘤化学药物治疗中的常见现象,当今仍然是化学药物治疗失败和肿瘤病人死亡的最主要原因之一。笔者研究目的是发现能有效抗耐药肿瘤的先导化合物,并研究其作用机制。
- 苏晔杨纯正熊冬生
- 文献传递
- 3-取代芳基氧化吲哚在肿瘤细胞内的定位被引量：2
- 2009年
- 目的观察3-取代芳基氧化吲哚(PHⅡ-7)在肿瘤细胞内的定位。方法通过化学合成的方法,在PHⅡ-7的1位引入氨烷基侧链,并将其氨基端进行FITC衍生化,在进行此衍生物体外抗肿瘤活性测定后,用激光共聚焦成像技术进行其在肿瘤细胞内的定位。结果成功合成具有氨烷基侧链的PHⅡ-7衍生物,并使之与FITC偶联;合成衍生物具有一定体外抗肿瘤活性;随着PHⅡ-7作用时间的增加,药物在肿瘤细胞系K562及其耐药肿瘤细胞系K562/A02中均逐渐由细胞质向细胞核内聚集。结论对于肿瘤细胞系K562及其耐药肿瘤细胞系K562/A02,PHⅡ-7作用靶位均为细胞核。
- 周园王彩云苏晔程昕彭洪薇杨纯正熊冬生
- 关键词：多药耐药细胞内定位
