李益民
- 作品数：28 被引量：24H指数：3
- 供职机构：大连理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程更多>>
- 一种表面展示生物酶的无载体双固定化生物催化剂及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种表面展示生物酶的无载体双固定化高效生物催化剂及其制备方法和应用，属于生物化工和发酵工程技术领域。本申请利用细胞表面展示技术将酶固定在宿主细胞表面，利用细胞表达絮凝蛋白实现细胞成团，从而固定在反应器中，絮凝...
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- 一种来源于马克斯克鲁维酵母的高表达启动子及其表达系统
- 本发明提供了一种来源于马克斯克鲁维酵母的高表达启动子KmINU1启动子、高效外泌的信号肽及其相应的表达系统及其表达系统。其中，具有SEQ ID No.2表示的核苷酸序列的KmINU1启动子具有最强的启动活性，且活性远远高...
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- 文献传递
- 甲酸脱氢酶在提高微生物发酵菌株对纤维素水解液中甲酸和乙酸抗性中的应用
- 本发明公开了甲酸脱氢酶在提高微生物发酵菌株对纤维素水解液中甲酸和乙酸抗性中的应用，属于生物技术领域。本发明利用氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示的甲酸脱氢酶提高了微生物乙醇发酵菌株对纤维素水解液中甲酸和乙酸抗性的方法...
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- 一种细胞表面展示NP1和AMPD的酿酒酵母工程菌及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种细胞表面展示NP1和AMPD的酿酒酵母工程菌及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域，本发明采用基因重组技术将核酸酶P1基因和腺苷酸脱氨酶基因连接至酵母表面展示载体上，并转化至酿酒酵母中，得到可作为全细胞...
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- 一种提高酿酒酵母对纤维素水解液抑制物耐受性的方法
- 本发明公开了一种可以高效地获得对纤维素水解液抑制物耐性显著提升的酿酒酵母工程菌株的方法。通过过表达ABC(ATP-binding？cassette)转运蛋白基因ADP1提高酿酒酵母对纤维素水解液中多种抑制物(甲酸、乙酸和...
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- 文献传递
- 利用重组大肠杆菌和马克斯克鲁维酵母高效催化合成D-阿洛酮糖被引量：2
- 2022年
- 提出了一种高效、低成本的两阶段生产D-阿洛酮糖的生产工艺。第一阶段,构建异源表达Flavonifractor plautii D-阿洛酮糖3-差向异构酶的重组大肠杆菌用于转化果糖,实现D-阿洛酮糖的全细胞生物合成。重组大肠杆菌在pH 7.5、65℃条件下反应最优,且在不添加金属离子、60℃反应条件下半衰期达到2.7 h,具有高热稳定性。在添加干重2.4 g/L重组大肠杆菌的D-果糖纯水溶液中,产物D-阿洛酮糖的终质量浓度为231 g/L,转化率达到33%。在添加硼酸根离子的条件下,D-阿洛酮糖的终质量浓度为378 g/L,转化率可以达到63%。在第二阶段,利用马克斯克鲁维酵母消耗混合体系中的D-果糖生产乙醇,降低分离成本。在不添加任何营养物质的情况下,在2种不同体系内,D-果糖均可以完全被消耗并产出约0.4 g/g的乙醇。该文研究结果为D-阿洛酮糖的低成本工业化生产奠定了良好的基础。
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- 关键词：生物催化马克斯克鲁维酵母
- 一种乙酸和木糖共利用的马克斯克鲁维酵母菌株及筛选方法
- 一种乙酸和木糖共利用的马克斯克鲁维酵母菌株菌株，生物保藏编号为:CGMCC No.16757。该菌株由马克斯克鲁维酵母经纤维素水解液长期定向驯化后获得，步骤如下:从YPD平板上挑取酵母单菌落，40℃过夜培养；将收集的细胞...
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- 文献传递
- 一种利用未脱毒纤维素原料生产木糖醇和乙醇的发酵方法
- 针对现有纤维素乙醇制备技术中所存在的纤维素水解液中抑制物抑制发酵问题、木糖不能全部转化问题、葡萄糖抑制木糖发酵问题、纤维素酶作用温度与微生物发酵温度不一致的问题，本发明提供了一种利用未脱毒纤维素原料生产木糖醇和乙醇的发酵...
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- 褐藻胶裂解酶基因的克隆表达与酶学性质被引量：3
- 2018年
- 随着大型褐藻生产燃料乙醇以及褐藻寡糖重大药用价值的发现,褐藻胶裂解酶成为国内外多个领域的研究重点。文中对解藻酸弧菌上与褐藻胶降解相关的5个基因分别进行克隆表达,通过SDS-PAGE和酶活性定量测定,发现该基因簇中的4个基因有降解褐藻胶活性。对酶活最高的rAlgV3进行了诱导条件的优化、酶蛋白纯化及酶性质研究,发现优化诱导条件后重组酶rAlgV3的酶活由2.34×10~4 U/L上升为1.68×10~5 U/L,比优化前提高了7.3倍;对酶性质进行表征发现该酶在4–70℃均有活性,最适反应温度为40℃,在4–20℃酶相对稳定;该酶在pH 6.5-9.0环境下均有较高的酶活,最适pH为8.0;pH稳定性好,在pH 4.5–9.5环境下可以稳定存在;适量的NaCl浓度和Fe^(2+)、Fe^(3+)等离子具有促进酶活的作用,SDS和Cu^(2+)离子可明显抑制酶活力。对该酶的底物特性的研究发现,该酶不仅可以降解褐藻胶中的Poly-M片段,也能降解Poly-G片段,具有广泛底物特性;其降解海藻酸钠主要释放二糖和三糖,是一种内切酶。该酶对于第三代燃料乙醇的发展及褐藻寡糖的生产具有重要作用。
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- 关键词：褐藻胶裂解酶克隆表达酶性质燃料乙醇
- 重组大肠杆菌的高密度培养及在丙谷二肽生产中的应用被引量：6
- 2020年
- 以表达α-酯酰基转移酶的重组大肠杆菌作为全细胞催化剂,连接丙氨酸甲酯盐酸盐与谷氨酰胺合成丙谷二肽,是目前生产丙谷二肽最理想的方法。利用高密度发酵法,能提高微生物的生产量,降低二肽生产成本。首先,在摇瓶水平下,利用响应面模型对于基础培养基碳源、氮源、无机盐等因素进行研究,在此基础上,对补料培养的重要因素如补料种类、补料方式等进行研究。最后,利用高密度培养的重组大肠杆菌作为全细胞催化剂进行丙谷二肽的合成。确定了最佳半合成培养基的组成为:葡萄糖质量浓度为10g/L、混合氮源质量浓度为24g/L、KH2PO4质量浓度为4.62g/L、K2HPO4质量浓度为25.08g/L;确定了溶氧反馈补料的最佳补料控制条件,在30h内,菌体OD620值最高达到了67,是优化前摇瓶培养的14倍。丙谷二肽的质量浓度达到34.56g/L,生产效率约为7g/(L·min)。研究为高效低成本生产丙谷二肽奠定了基础。
- 裴绪泽李益民杜聪袁文杰
- 关键词：高密度发酵过程控制优化设计
