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范瑾
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供职机构:
中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心传染病预防控制国家重点实验室
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国家科技重大专项
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王硕
中国疾病预防控制中心性病艾滋病...
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感染性疾病诊治协同创新中心杭州...
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中国疾病预防控制中心性病艾滋病...
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中国疾病预防控制中心性病艾滋病...
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CD137分子在 HIV 特异性 T 淋巴细胞单克隆分选和扩增中的应用
2015年
目的:建立通过CD137分子对HIV特异性T淋巴细胞进行单克隆分选和体外扩增的方案,对扩增后T细胞的数量和表型进行鉴定。方法分离HIV感染者外周血单个核细胞,采用多色流式细胞染色技术,分离HIV Gag特异性CD3+CD8+CD137+T细胞,单个细胞分选入96孔板,在体外加入饲养细胞和细胞因子进行培养,克隆扩增后14 d对扩增的细胞进行表型鉴定,14 d和28 d分别计算扩增倍数。结果 CD137分子在未接受抗原刺激的状态下表达量很低, Gag肽库刺激后, CD137表达升高,并且表达CD137的CD8细胞均分泌IFN-γ。体外扩增14 d可以获得106的CD8 T细胞,28 d可获得107~108的 CD8 T细胞。在 Gag 肽库刺激后可达到接近100%的活化。结论CD137可替代IFN-γ等传统的细胞因子对HIV抗原特异性T细胞进行筛选和体外扩增,扩增后的T细胞仍保持非常好的活性状态。
李丹
梁华
鞠斌
范瑾
李亚锋
王硕
邵一鸣
关键词:
CD137
HIV
体外扩增
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