王勇
- 作品数：20 被引量：67H指数：6
- 供职机构：沈阳医学院附属中心医院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Notch1和HES1在骨肉瘤组织中的表达及其对U2OS细胞侵袭能力的影响被引量：6
- 2015年
- 目的:研究Notch1和HES1基因在骨肉瘤组织及骨肉瘤细胞系U2OS中的表达及其对U2OS侵袭能力的影响。方法:组织学水平研究中,配对选取23例骨肉瘤及临近瘤旁正常骨骼肌组织标本;细胞学水平研究中,选取骨肉瘤细胞系U2OS及人正常成骨细胞系h FOB1.19;采用免疫组化法检测组织学水平Notch1及HES1蛋白的表达,采用Western blot及Real-time PCR法检测组织学及细胞学水平Notch1、HES1蛋白及mRNA的表达。用Notch1-siRNA沉默U2OS细胞中Notch1基因后,应用Western blot及Real-time PCR法检测U2OS细胞中Notch1及HES1的表达,Transwell法检测U2OS侵袭能力的变化。结果:相比于正常组织,骨肉瘤组织中Notch1、HES1 mRNA和蛋白呈高表达(t配对=22.567,14.830和8.439,7.100,P<0.001)。U2OS细胞中Notch1、HES1 mRNA和蛋白表达强于h FOB1.19细胞(t=11.053,20.482和28.845,34.681,P<0.001)。沉默Notch1基因后,U2OS细胞Notch1、HES1mRNA和蛋白表达下降(t=6.294,9.209和9.151,13.953,P<0.05),侵袭能力下降(t=71.387,P<0.001)。结论:Notch1和HES1在骨肉瘤组织及骨肉瘤细胞系中呈高表达,沉默Notch1基因可降低U2OS细胞侵袭能力。
- 王勇赵伟马骥
- 关键词：NOTCH1HES1骨肉瘤
- miR-335靶向Sp1对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的调控被引量：9
- 2013年
- 目的:探讨miR-335对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的调控是否通过靶向抑制Sp1基因的表达实现。方法:利用萤光素酶报告基因实验验证miR-335能否靶向作用于Sp1基因的3’-非翻译区(untranslated region,UTR);利用real-time PCR和Western blotting分析Sp1 mRNA和蛋白表达的变化;通过MTT法分析MG-63细胞增殖水平。结果:萤光素酶报告基因实验结果显示,miR-335可特异性结合于Sp1基因的3’-UTR。Real-time PCR和Western blotting结果显示,转染miR-335可减少Sp1蛋白的表达,但对mRNA表达无显著影响;转染Sp1表达质粒可上调Sp1 mRNA和蛋白表达。MTT结果显示,miR-335可抑制MG-63细胞增殖,转染Sp1表达质粒可部分逆转miR-335对MG-63细胞增殖的抑制作用。结论:miR-335可能通过靶向Sp1基因抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖。
- 王勇赵伟
- 关键词：骨肉瘤细胞增殖
- 人工股骨头置换术治疗不稳定型老年骨质疏松性股骨粗隆间骨折被引量：4
- 2014年
- 目的探讨人工股骨头置换术治疗老年骨质疏松性股骨粗隆间骨折的临床效果。方法回顾性分析2010年7月至2013年9月沈阳医学院中心医院收治的56例老年不稳定型骨质疏松性股骨粗隆间骨折患者的临床资料,其中22例采用人工股骨头置换术治疗（置换组）,34例行股骨近端防旋髓内针（PFNA）内固定（对照组）。记录两组患者手术时间、术中出血量、住院时间、术后负重行走时间和切口愈合时间,观察患者术后并发症发生情况,按Harris髋关节功能评分评估两组术前和术后14 d、3个月患髋关节功能。结果所有患者获得随访,术后随访时间3~24个月（平均12.5个月）。置换组在术后负重时间、并发症发生率方面优于对照组,两组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;两组住院时间和切口愈合时间比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。术前和术后14 d、3个月Harris评分比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;两组间不同时相点Harris评分及优良率比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。置换组患者无假体脱位、松动及关节感染,对照组2例因螺旋刀片选择过长而出现活动性髋外侧疼痛。结论人工股骨头置换可获得与PFNA内固定相似的临床疗效,同时具有术后负重时间短、并发症少等优点,是治疗老年不稳定型骨质疏松性股骨粗隆间骨折的较好选择。
- 王勇周禹伯赵伟
- 关键词：股骨骨折骨质疏松老年人
- miR-153干预对骨肉瘤细胞MG-63侵袭能力的影响被引量：6
- 2016年
- 目的:探讨不同miR-153干预对骨肉瘤细胞系MG-63侵袭能力的影响。方法:培养骨肉瘤细胞MG-63并随机分为miR-153过表达组、miR-153沉默表达组及阴性对照组,依次分别转染miR-153 mimic、miR-153 inhibitor及空白对照质粒;Real-time PCR检测转染后细胞中miR-153表达以确定细胞模型构建成功;Real-time PCR和Western blot检测转染后细胞中侵袭相关蛋白ROCK1和ROCK2的表达;Transwell侵袭实验检测转染后细胞侵袭能力的变化;理论预测miR-153与ROCK1/ROCK2的靶向结合作用。结果:相比于阴性对照组,miR-153过表达组、miR-153沉默表达组MG-63细胞内miR-153表达水平分别上调和下调,细胞模型构建成功;Real-time PCR和Western blot结果显示,相比于阴性对照组,miR-153过表达组、miR-153沉默表达组MG-63细胞内侵袭相关蛋白ROCK1和ROCK2的mRNA表达变化不明显而蛋白表达水平分别降低和增高;Transwell侵袭实验结果显示上调及沉默miR-153后,MG-63细胞侵袭能力分别下降和增强;Targetscan生物学软件理论预测miR-153与ROCK1/ROCK2同时存在结合位点。结论:不同miR-153干预可明显影响骨肉瘤细胞MG-63的侵袭能力,而这种影响可能通过miR-153-ROCK1/ROCK2途径实现。
- 王勇赵伟马骥
- 关键词：骨肉瘤
- ALDH1A1在肾透明细胞癌组织中的表达及其临床意义
- 2015年
- 目的:探讨ALDH1A1(aldehyde dehydrogenase 1A1,ALDH1A1)在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)组织中的表达及其与患者临床病理特征及预后的关系。方法:应用免疫组化SP法检测95例ccRCC和23例正常肾组织石蜡中ALDH1A1蛋白的表达水平。Realtime PCR和Western Blot检测20例新鲜ccRCC及癌旁组织中ALDH1A1 mRNA和蛋白的表达量。结果:ccRCC石蜡组织中ALDH1A1表达高于正常肾组织,两者之间差异有统计学意义(P<0.05)。新鲜ccRCC组织中ALDH1A1 mRNA及蛋白的表达水平较癌旁正常肾组织显著升高。ALDH1A1表达与肿瘤大小、临床分期、血管侵袭及复发相关(P<0.05)。Log-rank分析进一步表明ALDH1A1高表达提示不良预后。结论:ALDH1A1的表达与ccRCC的生物学行为关系密切,可能为ccRCC的治疗提供新的靶点。
- 王科峰王勇费翔陈小楠詹运洪王侠吴斌
- 关键词：肾透明细胞癌
- 综合护理干预对择期骨肿瘤手术患者术前情绪的影响被引量：6
- 2015年
- 目的探讨综合护理干预对择期骨肿瘤手术患者术前情绪的影响。方法收集48例择期骨肿瘤手术患者,根据随机数字法分为对照组(常规护理干预组)和观察组(综合护理干预组),每组24例,观察和比较两组患者干预前后焦虑、抑郁评分,以及两组患者干预后症状自评量表(SCL-90)各因子评分。结果与干预前比较,两组患者干预后的焦虑、抑郁评分均明显降低(P<0.05)。与对照组比较,观察组患者干预后的焦虑评分、抑郁评分以及SCL-90各因子评分均显著减少(P<0.05)。结论综合护理干预能够缓解择期骨肿瘤手术患者术前不良情绪,值得临床推广。
- 吴莹李辉冯若男王勇
- 关键词：骨肿瘤综合护理干预术前情绪
- 神经生长因子修饰脂肪干细胞移植促进损伤脊髓的修复被引量：6
- 2015年
- 背景:基因修饰的干细胞能够增加多肽和全长蛋白的分泌而起到保护脊髓损伤和促进神经元功能恢复的作用,因而成为近年来的研究热点。目的:探讨神经生长因子修饰的脂肪干细胞移植对大鼠脊髓损伤的保护作用。方法:贴壁培养法原代培养脂肪干细胞,免疫荧光法行表面标志物鉴定;脂质体介导神经生长因子质粒转染修饰脂肪干细胞,Real-time PCR及Western blot检测转染后神经生长因子的表达;改良Allen法构建大鼠脊髓损伤模型,将转染后的脂肪干细胞注射移植入大鼠脊髓损伤部位,BBB评分评估修复效果;脂肪干细胞移植后3周处死大鼠,Real-time PCR及Western blot检测移植后损伤节段脊髓中神经生长因子的表达。结果与结论:原代培养脂肪干细胞获得成功,免疫荧光显示表面抗原CD29和CD44呈阳性表达;转染后脂肪干细胞中神经生长因子mR NA及蛋白表达增高;转染神经生长因子的脂肪干细胞移植后,大鼠BBB评分明显升高,损伤节段脊髓中神经生长因子mR NA及蛋白表达明显升高。结果表明经神经生长因子转染修饰的脂肪干细胞可促进大鼠脊髓损伤修复。
- 王勇赵伟冯健洲陈晓春
- 关键词：干细胞神经生长因子脂肪干细胞脊髓损伤基因修饰
- miR-335靶向Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1抑制人骨肉瘤细胞MG-63侵袭转移的实验研究被引量：4
- 2014年
- 背景与目的:微小RNA(micro RNA,mi RNA)是一类小分子内源性RNA,主要在转录后水平调节靶基因的表达。micro RNA-335(mi R-335)作为一种肿瘤抑制因子,参与了多种人类肿瘤的发生、发展过程。本研究旨在探讨mi R-335是否靶向抑制Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1(Rho associated coiled-coil forming protein kinase,ROCK1)基因的表达,并以此调控人骨肉瘤细胞MG-63侵袭及转移。方法:理论预测并通过荧光素酶基因报告验证mi R-335与ROCK1基因的3'-非翻译区(untranslated region,UTR)的特异性结合作用;real-time PCR和蛋白质印迹法(Western blot)分别从基因和蛋白水平检测mi R-335对ROCK1表达的负性调控作用;Transwell小室法检测mi R-335过表达及下调ROCK1表达后MG-63侵袭及转移能力的变化。结果:Targetscan预测显示,mi R-335与ROCK1 3'-UTR存在结合位点。荧光素酶基因报告实验结果显示,mi R-335 mimic和ROCK1 3'-UTR能够靶向结合;mi R-335在MG-63细胞中低表达,ROCK1则呈高表达。Western blot检测结果显示,转染mi R-335 mimic或转染ROCK1 si RNA后ROCK1的蛋白表达减少。Transwell小室法检测结果显示,过表达mi R-335或下调ROCK1后穿过基膜的细胞数目明显下降。结论:mi R-335能特异性结合于ROCK1基因的3'-UTR并下调ROCK1的表达,抑制人骨肉瘤细胞MG-63侵袭转移。
- 王勇王科峰赵伟
- 川芎嗪对人骨肉瘤MG-63细胞生长的抑制作用观察及机制探讨被引量：3
- 2013年
- 目的探讨川芎嗪对人骨肉瘤MG-63细胞生长的抑制作用及可能机制。方法取对数生长期的人骨肉瘤MG-63细胞,随机分为川芎嗪低浓度组、高浓度组和对照组,川芎嗪低浓度组、高浓度组分别予3、30 mg/mL的川芎嗪,对照组加入完全培养液;48 h后采用四氮唑盐比色法检测MG-63细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期分布;Western blot法检测Bcl-2、CyclinD1及NF-κB p65蛋白表达水平。结果与对照组比较,川芎嗪低浓度组、高浓度组MG-63细胞增殖抑制率、凋亡率及G0/G1期细胞比例均明显升高,NF-κB p65及其靶基因Bcl-2、CyclinD1蛋白表达水平均明显降低,且川芎嗪高浓度组作用更明显;P均<0.05。结论川芎嗪对体外培养的MG-63细胞有增殖抑制作用,其机制可能与其促进MG-63细胞凋亡、诱导G0/G1期阻滞、抑制NF-κB及其靶基因的蛋白表达有关。
- 王勇赵伟
- 关键词：川芎嗪骨肉瘤核转录因子-ΚB
- miR-335及ROCK1在骨肉瘤中表达及相互关系研究被引量：2
- 2015年
- 目的探讨miR-335及rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1(ROCK1)在骨肉瘤组织及细胞系中表达的情况及两者的相关性。方法临床选取18例骨肉瘤组织标本及配对正常骨骼肌组织标本;设定人正常成骨细胞为对照组,骨肉瘤细胞系MG-63和U2-OS为实验组,RT-PCR检测骨肉瘤组织与各组细胞中miR-335与ROCK1 mRNA的表达差异;miR-335 mimic转染MG-63和U2-OS两细胞系,检测miR-335过表达对ROCK1mRNA和蛋白表达的影响。结果 miR-335在骨肉瘤组织及细胞系中特异性低表达,而ROCK1则呈高表达,两者呈负相关;转染miR-335mimic后,miR-335mRNA过表达,ROCK1mRNA和蛋白表达在MG-63和U2-OS两细胞系中受到显著抑制。结论 miR-335与ROCK1表达在骨肉瘤组织学水平和细胞学水平均成负相关;过表达miR-335可降低ROCK1的表达。
- 王勇王科峰赵伟
- 关键词：骨肉瘤基因表达
