张巧丽
- 作品数:10 被引量:9H指数:2
- 供职机构:吉林大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- 一种结核分枝杆菌生物被膜检测方法
- 本发明提供了一种结核分枝杆菌生物被膜检测方法,采用Sytox green/Sytox orange荧光染色,用酶标仪检测悬液,进行结核分枝杆菌生物被膜检测,检测方法步骤简单,对仪器的要求低;能在短时间内,检测结核分枝杆菌...
- 于录杨志强宾文范君文庞旭东汪杨申凤鸽张巧丽王超安雅男
- 文献传递
- 巨噬细胞通过产生胞外陷阱捕获并杀伤单增性李斯特菌被引量:3
- 2015年
- 为了研究产单核细胞增生性李斯特菌(Lm)能否引起巨噬细胞产生胞外陷阱,并初步探讨巨噬细胞胞外陷阱(METs)对其杀伤作用。本文通过荧光显微镜、菌落计数和免疫印记等技术分析单增李斯特菌侵袭的2种巨噬细胞胞外陷阱形态、产量及抑菌效果。结果显示,小鼠巨噬细胞系RAW 264.7以及人巨噬细胞系Thp-1均可在单增李斯特菌的诱导下产生胞外陷阱;Lm在侵袭巨噬细胞15min后已有METs产生,1~3h产量明显增大,然后随时间的推移逐渐减弱;METs可以有效抑制Lm的生长。另外,本试验还发现Lm诱导胞外陷阱的产生与细胞外信号调节激酶相关。
- 程威施晓晨王超安雅男张巧丽金琨琪杨志强于录
- 关键词:单增李斯特菌巨噬细胞细胞外信号调节激酶
- 一种检测结核分枝杆菌生物被膜产膜能力的方法
- 本发明公开了一种检测结核分枝杆菌生物被膜产膜能力的方法,它包括:1)提取结核分枝杆菌总RNA,反转录成cDNA;2)以cDNA为模板,用内参基因16SrRNA引物,检测基因Rv3519引物荧光定量PCR检测;最后由公式:...
- 于录王超杨志强郭娜汪杨唐旭东孟日增安雅男张巧丽施晓晨
- 文献传递
- 三氯生通过诱导巨噬细胞非mTOR途径自噬加强胞内菌杀伤被引量:1
- 2016年
- 为了研究三氯生能否引起细胞自噬并探讨其可能的诱导通路,揭示三氯生作为抗菌药物的新作用机制,利用免疫荧光、菌落计数、免疫印迹等技术检测经三氯生处理过细胞的自噬水平、相关蛋白表达量的变化及杀菌能力的改变。结果表明:三氯生能引起Hela细胞和Raw264.7细胞的自噬,并且该自噬为完全自噬。三氯生诱导的小鼠巨噬细胞系Raw264.7细胞自噬依赖的是胞外信号调节激酶(Extracellular signal-regulated kinase,ERK)途径,而非经典的雷帕霉素靶蛋白(Mammalian target of rapamycin,m TOR)途径。此外,三氯生通过该作用机制加强了巨噬细胞对胞内菌的杀伤作用。研究表明,三氯生诱导自噬的现象在细胞中普遍存在,自噬在对抗病原微生物中起到重要作用,诱导自噬是三氯生作为抗菌药物的新作用机制。
- 施晓晨孙青松安雅男张巧丽郭娜于录
- 关键词:三氯生巨噬细胞MTORERK
- 结核分枝杆菌Rv3519表达与其生物被膜形成能力的研究被引量:3
- 2015年
- 采用结晶紫染色检测结核分枝杆菌生物被膜的形成能力,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测生物被膜态的不同结核分枝杆菌Rv3519表达水平,分析Rv3519基因表达与结核分枝杆菌生物被膜形成能力的关系。结果表明:临床分离株产膜能力较H37Rv明显偏低,差异显著(P<0.01);临床分离株之间生物被膜产量差异不显著(P>0.05);生物被膜态的分离株较标准株Rv3519基因表达量偏低,差异显著(P<0.01)。说明结核分枝杆菌生物被膜形成能力与Rv3519基因表达水平相关,Rv3519基因可以作为结核分枝杆菌生物被膜形成能力的潜在分子诊断标志。
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- 关键词:结核分枝杆菌生物被膜实时荧光定量PCR
- 胞外DNA是耻垢分枝杆菌生物被膜的主要成分被引量:1
- 2016年
- 目的本实验以无致病性的耻垢分枝杆菌Mc^2 155为结核分枝杆菌模型菌进行生物被膜成分研究。方法利用24孔细胞培养板建立体外耻垢分枝杆菌生物被膜培养模型;借助DNaseⅠ作为eDNA抑制剂分析其在生物被膜的存在情况,通过结晶紫染色对生物被膜进行定量;早期加入外源基因组DNA对生物被膜的影响进行评估;利用荧光显微镜考察SYTOX orange标记生物被膜的主要成分胞外DNA(eDNA)。结果体外培养的耻垢分枝杆菌Mc^2 155能形成典型生物被膜;早期加入DNaseⅠ明显抑制了生物被膜的产量;早期加入基因组DNA有利于提高生物被膜产量。特异染料SYTOX orange能对耻垢分枝杆菌生物被膜染色,说明eDNA是耻垢生物被膜的主要成分。结论本研究首次证明eDNA是耻垢生物被膜的主要成分,这为治疗分枝杆菌感染和耐药控制提供了新的思路。
- 张巧丽李树林安雅男王超李燕于录
- 关键词:分枝杆菌生物被膜
- 一种利用结晶紫染色检测结核分枝杆菌生物被膜方法
- 本发明公开了一种结晶紫染色检测结核分枝杆菌生物被膜方法,它包括:洗涤生物被膜;50摄氏度干燥,在0.5-1.5%结晶紫溶液中孵育;洗涤后,50摄氏度干燥;加95%乙醇孵育,涡旋震荡,制备悬液;分光光度计测悬液A570nm...
- 于录杨志强孟日增唐旭东范君文汪杨宋宇郭娜张巧丽王超
- 文献传递
- 耻垢分枝杆菌MSMEG_6935基因的敲除对其生物被膜产量的影响被引量:1
- 2015年
- 探索出一套分枝杆菌基因敲除的可靠方案,并研究耻垢分枝杆菌MSMEG_6935基因对其生物被膜产量的影响,结核分枝杆菌相关基因的敲除对其致病机理的深入研究有重要意义。利用融合PCR方法将MSMEG_6935基因的上、下游基因以及替代目的基因的kan基因融合,并将产物克隆到温敏型穿梭质粒pPR27,再电转入耻垢分枝杆菌mc2155中,筛选获得MSMEG_6935基因缺失株mc2155-6935。进一步研究MSMEG_6935基因的敲除对细菌生长曲线和生物被膜产量的研究。成功构建了MSMEG_6935基因的缺失株,并研究证明耻垢分枝杆菌MSMEG_6935基因的缺失对耻垢分枝杆菌的生长曲线没有影响,但会对其生物被膜的产量产生较大影响。
- 金琨琪施晓晨张巧丽安雅男王超程威杨志强于录
- 关键词:基因敲除穿梭载体生物被膜
- 结核分枝杆菌生物被膜体外培养的培养基及培养方法
- 本发明公开了结核分枝杆菌生物被膜体外培养的培养基,它包括:天冬酰胺4g、枸橼酸2g、三水合磷酸氢二钾0.3-1g、七水合硫酸镁0.5-1g、无水柠檬酸铁铵0.05-1g、甘油60ml、加去离子水、氨水调节pH至7.0,定...
- 于录杨志强郭娜唐旭东范君文汪杨孟日增宋宇张巧丽王超
- 文献传递
- CwlM对结核分枝杆菌和耻垢分枝杆菌自溶能力以及生物被膜形成的影响
- 结核病(Tuberculosis,TB)是一种高发病率和高传染性的疾病,主要是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)引起。2013结核患病人数900万有150万人死于此病。2015...
- 张巧丽
- 关键词:结核分枝杆菌耻垢分枝杆菌自溶生物被膜
- 文献传递