刘海朋
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：四川大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- XIAP在TRAIL抗性细胞HCT116 bax^(-/-)中的作用机制研究被引量：4
- 2016年
- 为了探索结直肠癌细胞HCT116抗TRAIL诱导凋亡的分子机制,本课题以其抗性细胞HCT116 bax^(-/-)为实验对象进行了研究.通过利用目前最热的基因定点编辑技术Clustered regularly interspaced short palindromic repeats(CRISPR)/CRISPR-associated(Cas)9系统将HCT116bax^(-/-)的XIAP(X-linked inhibitor of apoptosis protein)基因彻底敲除后,用TRAIL处理,发现其恢复了对TRAIL的敏感,形态学发生了明显凋亡,而且western blot检测显示PARP蛋白发生了完全剪切.由此证明敲除XIAP基因能克服HCT116 bax^(-/-)对TRAIL的抗性.这些发现对肿瘤细胞抗TRAIL的分子机理研究以及肿瘤的个性化治疗有非常重要的意义.
- 龙添珍黄学琴刘海朋冯海燕徐阳梁朋
- 关键词：TRAILHCT116XIAP细胞凋亡
- 全文增补中
- 基于TRAIL受体热稳定的亲和性定量检测
- 2015年
- 目的基于肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)受体的热稳定性建立其在肿瘤中定量检测的新途径。方法检测胰腺癌细胞AsPC-1和Capan-2內源碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)的活性和变性温度。利用AP标记的TRAIL(AP-TRAIL)分别孵育转膜后的死亡受体5(death receptor 5,DR5)融合蛋白(DR5-AP)和经100℃沸水蒸煮去除内源AP活性的胰腺癌细胞系AsPC-1和Capan-2,再与AP的底物Reagent S和Reagent A进行颜色反应,进行细胞受体定量检测和细胞原位受体结合试验。结果胰腺癌细胞系AsPC-1和Capan-2的内源AP在65℃水浴下不能完全失活,阻碍了对TRAIL受体的检测,在沸水蒸煮后其AP活性显著下降,而DR5-AP在沸水中具有热稳定性。AP-TRAIL能够识别并结合高温蒸煮后的胰腺癌细胞AsPC-1和Capan-2表面的受体,AP-TRAIL孵育的读数为2.210±0.393和2.027±0.019。结论 TRAIL受体具有热稳定的性质,它的发现能够为更好的肿瘤诊断、预测及个性化治疗提供新方法。
- 徐阳刘海朋龙添珍罗光平梁朋
- 关键词：肿瘤治疗TRAIL受体热稳定性
