傅雅娟
- 作品数:16 被引量:23H指数:3
- 供职机构:福建师范大学更多>>
- 发文基金:福建省自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生文化科学更多>>
- DNA-PK抑制剂在头颈部鳞癌中提高联合放疗和免疫检查点抑制剂的抗肿瘤活性
- 研究背景:近年来,免疫检查点抑制剂(ICIs)已被证实对晚期HNSCC患者有积极的治疗作用,然而其疾病控制率只约为20%。HNSCC对放射治疗较敏感,根治性放疗能够有效控制早期HNSCC进程,但是很多患者确诊室已经是晚期...
- 甘林川傅雅娟陈骐
- 关键词:DNA-PKHNSCC
- 从单个兔B细胞获得抗人cGAS蛋白单克隆抗体
- 2019年
- 为研究环鸟苷酸-腺苷酸合成酶入核的机制,利用兔外周血B细胞筛选抗人cGAS蛋白单克隆抗体.针对已三次免疫人cGAS(161-522)蛋白的新西兰兔,运用流式细胞术得到阳性效应B细胞,在单管里对单细胞裂解,得到总RNA,逆转录生成cDNA,两步巢式PCR扩增同一个B细胞来源的抗体重链和轻链可变区序列,抗体基因扩增成功率高达80%以上.293T重组表达兔抗人cGAS蛋白单克隆抗体并鉴定,获得1个具有较好结合特异性的兔抗人cGAS蛋白单克隆抗体,ELISA检测结果显示抗体的效价达1∶10 000.
- 傅雅娟陈苏星蔡少丽蔡少丽林莉莉
- 关键词:单细胞B细胞抗体
- 利用电转的方法对T细胞TET2基因敲除并探讨TET2对T细胞增殖的影响被引量:1
- 2020年
- 近年来,利用重组病毒对T细胞进行基因编辑用于免疫治疗,受到了广泛重视。然而,重组病毒因存在随机整合,制备耗时长且昂贵的缺点制约了其应用。与此同时,电转染技术的应用能够快速将外源DNA带入细胞内,有助于提高T细胞基因编辑效率。TET(Ten-eleven translocation)家族蛋白可以催化5-甲基胞嘧啶(5mC)转化为5-羟甲基胞嘧啶(5hmC),5hmC作为细胞中的DNA去甲基化酶,在细胞基因组表观遗传学中起着重要调控作用。研究表明TET2基因的缺失能够促进CAR-T细胞的快速繁殖,产生强力的CAR-T细胞。该研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对TET2基因进行敲除。首先对sgRNA进行体外转录,与大肠杆菌诱导表达的Cas9蛋白孵育形成Cas9:gRNA核糖核蛋白复合物(RNP),并在体外酶切验证sgRNA的活性。接着利用电转染技术将Cas9:gRNA核糖核蛋白复合物(RNP)带入细胞内,并检测T细胞基因编辑效率。最后利用流式细胞分析技术检测T细胞的增殖情况。基因测序与T7EⅠ酶切结果表明,T细胞中的TET2基因被成功敲除,T细胞活力和功能并未受到影响。流式细胞技术,CCK-8以及台盼蓝细胞活率检测结果显示缺失Tet2蛋白后,T细胞的增殖速率明显快于野生型T细胞。该研究为非病毒载体替代传统的慢病毒载体构建携带嵌合抗原T细胞奠定了基础,具有制备周期短,安全性高的特点。同时TET2缺失促进了CAR-T细胞的增殖,使其能够引发有效的抗肿瘤反应,为CAR-T细胞免疫治疗提供了新的思路。
- 杨雷叶洲杰李兆龙沈阳坤傅雅娟
- 关键词:电转染基因敲除T细胞增殖
- 生物学一级学科硕士课程体系优化被引量:3
- 2015年
- 课程学习是我国研究生教育制度的重要特征,是培养具有创新能力、适应社会需求的生物学人才的重要保障。该文就目前生物学一级学科硕士课程体系存在的具体问题进行分析,结合福建师范大学生命科学学院生物学一级学科硕士授权点的实际情况,对生物学一级学科硕士课程体系的优化路径进行了探讨,以期为生物学一级学科硕士课程体系的优化提供基础资料。
- 程林洁王正朝黄鹭强傅雅娟黄建忠
- 用于提高细胞转染效率的试剂组合物
- 本发明涉及用于提高细胞转染效率的试剂组合物,属于生物技术领域,所述试剂组合物包含化合物BX795 0.01—10μM、化合物Ruxolitinib 0.1—100μM、化合物Tofacitinib 0.1—100μM、化...
- 陈骐傅雅娟郑立群
- 文献传递
- 浅谈高校科研实验室危险化学品安全管理被引量:9
- 2015年
- 规范危险化学品的安全管理是高校实验室安全的基础,对高校教学、科研与生产活动的顺利开展有着重要的意义。本文阐述了当前高校实验室在危险化学品安全管理方面存在的漏洞,并针对其中存在的主要问题,提出了相应的管理措施,为消除实验室安全隐患以及加强实验室安全管理提供帮助。
- 傅雅娟牛海涛程林洁肖华山
- 关键词:高校实验室危险化学品安全管理
- 靶向Siglec-15的单克隆抗体、制备方法及其应用
- 本申请涉及生物医学技术领域,更具体地涉及一种靶向Siglec‑15的单克隆抗体、制备方法及其应用。本发明提供了一种新的靶向Siglec‑15的单克隆抗体,相较于现有技术中靶向Siglec‑15的多克隆抗体而言,特异性更强...
- 傅雅娟陈骐苏敏存
- IFIT1负反馈上调干扰素β表达促进抗HSV-1病毒保护被引量:2
- 2020年
- Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)是危害人类健康的常见病原体之一,能够通过受损皮肤或黏膜感染宿主细胞并引起多种疾病。HSV-1的侵入激活先天免疫模式识别受体,诱导干扰素β(IFN-β)的产生,通过表达干扰素刺激基因(ISG)发挥抗病毒功能。近年来,干扰素诱导的四肽重复蛋白1(IFIT1)在病毒感染过程中的作用引起了广大研究者的关注。然而,其具体机制尚未完全清楚。本研究利用CRISPR/Cas9技术构建了小鼠成纤维细胞(L929)IFIT1敲除细胞株,免疫印迹方法检测敲除细胞株IFIT1在蛋白质水平的表达。转染HT-DNA和Poly[I:C]刺激L929 WT和IFIT1敲除细胞株,实时定量PCR技术检测发现,HT-DNA刺激敲除细胞时,IFN-β及下游ISGs的表达量显著升高。IFN-β的表达量比L929-WT组平均高出13.4倍,IFIT1和趋化因子10(CXC chemokine ligand-10,CXCL10)的表达量比L929 WT组分别平均高出6.7倍和21倍(P<0.001),而Poly[I:C]刺激无明显变化(P>0.05),表明IFIT1是通过DNA信号通路来行使其负反馈调节作用。为研究IFIT1基因的抗病毒作用,利用CRISPR/Cas9技术改造的HSV-1-VP26-mCherry病毒感染该敲除细胞株,通过测定病毒荧光数及病毒拷贝数,发现IFIT1敲除细胞株与L929 WT细胞相比,存活率提高了60%(P<0.001),病毒增殖能力在48 h后降低28.6倍(P<0.001)。该结果表明,IFIT1基因的缺失有利于抵抗HSV-1的感染。综上所述,IFIT1通过DNA信号通路负反馈上调IFN-β及ISG的表达,IFIT1的缺失对病毒入侵发挥了保护作用。该结果为后续研究开发治疗HSV-1感染相关的治疗药物提供了一个新思路。
- 方义军胡好蔡少丽丰志华傅雅娟
- 关键词:干扰素Β
- 一种新的靶向Siglec-15的单克隆抗体、制备方法及其应用
- 本申请涉及生物医学技术领域,更具体地涉及一种新的靶向Siglec‑15的单克隆抗体、制备方法及其应用。本发明提供了一种新的靶向Siglec‑15的单克隆抗体,相较于现有技术中靶向Siglec‑15的多克隆抗体而言,特异性...
- 陈骐傅雅娟苏敏存
- 用于提高细胞转染效率的试剂组合物
- 本发明涉及用于提高细胞转染效率的试剂组合物,属于生物技术领域,所述试剂组合物包含化合物BX795 0.01—10μM、化合物Ruxolitinib 0.1—100 μM、化合物Tofacitinib 0.1—100 μM...
- 陈骐傅雅娟郑立群