- 过表达RIP3增强乳腺癌细胞对小白菊内酯的敏感性的作用机制研究
- 目的:构建含有RIP3基因的真核表达载体，研究过表达RIP3基因对小白菊内酯抗乳腺癌细胞作用的影响及机制。为其作为抗乳腺癌新药的临床应用提供理论基础。 方法:反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测及比较4株人乳腺癌细胞...
- 路灿
- 关键词：小白菊内酯乳腺癌活性氧簇
- 文献传递
- 肿瘤铁代谢研究进展被引量：4
- 2012年
- 铁是机体不可缺少的元素,在细胞呼吸、能量代谢及DNA转录和修复等过程中发挥着重要的作用。然而由于其具有潜在的毒性而受到相关蛋白的严密调控,如铁转运蛋白、铁蛋白和转铁蛋白等。肿瘤细胞常表现为对铁的需求增加,使人们认识到铁代谢在肿瘤发生发展中的重要作用。铁代谢相关分子因此成为肿瘤研究中新的突破点,本文就肿瘤铁代谢的相关研究进展进行综述。
- 路灿佟仲生贾勇圣
- 关键词：肿瘤转铁蛋白铁蛋白
- RIP3基因重组质粒构建及其表达对MCF7细胞死亡方式的影响
- 2014年
- 目的建立稳定过表达RIP3基因的乳腺癌细胞株,并证实融合蛋白在细胞内的表达、定位及对MCF7细胞死亡方式的影响。方法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测4种乳腺癌细胞及正常乳腺上皮细胞中RIP3mRNA的表达。以正常乳腺上皮细胞MCF10A cDNA为模板,PCR扩增RIP3基因cDNA全长,将合成的RIP3编码区序列,克隆入mCherry载体的N末端,构建重组质粒mCherry-RIP3,对重组质粒进行酶切鉴定及DNA测序。钙法转染293T细胞,收集病毒感染MCF7细胞,杀稻瘟菌素(4 mg/L)维持筛选,构建稳定表达细胞株。Western blot、荧光显微镜等检测目的基因表达效率及蛋白定位。显微镜下观察肿瘤坏死因子(TNF)-α及Caspase抑制剂Z-VAD-FMK处理下mCherry-RIP3-MCF7细胞的死亡形态及比例。结果 RIP3 mRNA在乳腺癌细胞中普遍低表达。RIP3基因成功克隆入载体。过表达mCherry-RIP3基因的MCF7细胞可见红色荧光蛋白表达,定位于胞质。目的基因RIP3在转染细胞中为过表达。mCherry-RIP3转染后增强MCF7细胞对TNF-α联合Z-VAD-FMK诱导的细胞坏死的敏感性。结论成功构建RIP3基因过表达重组质粒,获得外源性RIP3稳定过表达的乳腺癌MCF7细胞株,mCherry-RIP3定位于胞质,并在TNF-α介导的程序性坏死中起作用。
- 路灿徐惠君贾勇圣佟仲生
- 关键词：蛋白质类蛋白质构象质粒坏死
