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β防御素2对大鼠肺部炎症细胞因子的影响被引量：10: 2013年; 目的探讨β防御素2(rBD2)对大鼠肺部炎症反应的影响及其可能机制。方法构建大鼠rBD2的cDNA慢病毒载体和RNA干扰载体,双向调节rBD2在大鼠肺组织内的表达水平,ELISA法检测肺组织中IL-1α、IL-1β、IL-4、IL-10的表达变化,Western blot检测肺组织中rBD2的表达,Real time PCR法检测肺组织中rBD2mRNA的表达。结果成功构建rBD2cDNA慢病毒和RNA干扰载体,并成功转染。大鼠肺部感染时,上调rBD2可降低IL-1α、IL-1β等促炎细胞因子的水平,提高抗炎细胞因子IL-4、IL-10的含量(P<0.01)。结论 rBD2可调节大鼠肺组织炎症相关细胞因子的水平,参与并抑制大鼠肺部炎症反应。; 沈桢巍方路姜敏敏刘显东雷撼; 关键词：细胞因子

β-防御素2与病原疫苗及其免疫效应的关联性研究被引量：1: 2015年; 目的研究病原菌疫苗及其免疫反应与大鼠β-防御素2蛋白（rBD-2）表达的关系，探讨β-防御素2人为诱导的方法及其在疫苗免疫防御中的作用。方法使用两种疫苗（23价肺炎链球菌多糖疫苗、B型流感嗜血杆菌结合疫苗）分别滴人大鼠肺内，Western blotting法检测肺组织rBD-2蛋白含量；选择作用显著的疫苗滴人鼠肺，不同时间检测肺组织rBD-2蛋白含量，EUSA检测血清中TNF-α、IL—1β、和IL-10蛋白含量。结果两组疫苗作用大鼠后肺组织中rBD-2蛋白均明显上升，B型流感嗜血杆菌结合疫苗的作用更明显；B型流感嗜血杆菌结合疫苗作用后21d，rBD-2随时间逐渐升高，血清细胞因子含量均呈先升高、后降低的趋势，与对照组比较差异显著。结论病原菌疫苗可明显上调大鼠肺组织rBD-2的表达，rBD-2与疫苗引起的免疫反应存在关联，在疫苗的免疫防御效应中有一定作用。; 方路姜敏敏张梦洁沈桢巍刘爱红雷撼; 关键词：Β防御素-2 免疫反应

大鼠β防御素2基因慢病毒载体的构建及功能检测被引量：1: 2010年; 目的构建大鼠β防御素2（rBD2）基因慢病毒表达载体,并转染培养细胞检测其表达,为rBD2研究及大鼠体内实验奠定基础.方法提取大鼠上皮细胞总RNA,PCR扩增获得rBD2基因,双酶切PCR产物和慢病毒载体Lentivirus[含H1启动子和绿色荧光蛋白（GFP）],连接构成rBD2基因慢病毒表达载体LV-rBD2,行测序鉴定.用慢病毒包装系统对LV-rBD2进行慢病毒颗粒包装并梯度稀释法测定病毒滴度,病毒液感染培养细胞,RT-PCR和Western Blot检测rBD2表达.结果凝胶电泳和测序结果表明rBD2基因克隆到慢病毒载体中,序列正确.完成慢病毒颗粒包装,调整病毒滴度至1×105ifu/μl.RT-PCR和Western-Blot显示rBD2基因获得表达.结论 rBD2基因慢病毒表达载体LV-rBD2被成功构建,能转染细胞并获得有效表达.; 雷撼方路何翔; 关键词：基因转染技术逆转录聚合酶链反应

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方路