陈欣
- 作品数:3 被引量:31H指数:3
- 供职机构:江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金:中央高校基本科研业务费专项资金江苏高校优势学科建设工程项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:化学工程生物学更多>>
- Red同源重组敲除nagE和manX对大肠杆菌发酵生产氨基葡萄糖的影响被引量:10
- 2012年
- 氨基葡萄糖(GlcN)又称氨基葡糖或葡糖胺,是葡萄糖的一个羟基被氨基取代后的化合物,在医药和保健领域具有广泛应用。在前期研究中,我们构建了一株可高效合成GlcN和其乙酰化衍生物N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)的重组大肠肝菌Escherichia coli-glms-gna1(在下游提取过程中用弱酸进行脱乙酰化即可将GlcNAc转化为GlcN)。但研究发现,发酵过程中GlcN和GlcNAc能被转运至胞内作为碳源利用,导致胞外产量显著减少。为阻断胞外GlcN和GlcNAc向胞内的转运,利用Red同源重组技术将E.coli-glms-gna1的乙酰氨基葡萄糖磷酸转运子编码基因nagE和甘露糖磷酸转运子编码基因manX敲除,获得nagE基因敲除的工程菌E.coli-glms-gna1-nagE和nagE/manX基因双敲除的工程菌E.coli-glms-gna1-nagE-manX,并在7 L发酵罐上利用构建的工程菌进行GlcN和GlcNAc的发酵生产。实验结果表明:培养对照菌株E.coli-glms-gna1至12 h时GlcN产量达到最大值4.06 g/L,GlcNAc产量达到最大值41.46 g/L;而培养单基因敲除菌株E.coli-glms-gna1-nagE至12 h时GlcN产量达到最大值4.38 g/L(是对照菌株的1.08倍),GlcNAc产量达到最大值71.80 g/L(是对照菌株的1.7倍);培养双基因敲除菌株E.coli-glms-gna1-nagE-manX至10 h时GlcN产量达到最大值4.82 g/L(是对照菌株的1.2倍),GlcNAc产量达到最大值118.78 g/L(是对照菌株的2.86倍)。这表明nagE和manX基因的敲除可显著降低GlcN和GlcNAc向胞内的转运,进而提高其在胞外的积累。研究结果对最终实现GlcN的工业化生产具有一定的指导意义。
- 陈欣刘龙李江华刘杰堵国成陈坚
- 关键词:氨基葡萄糖
- 以麸皮为唯一底物生产Coniothyrium minitans孢子的研究(英文)被引量:4
- 2004年
- 以一种简单经济的麸皮为唯一固态发酵底物 ,对Coniothyriumminitans(CBS 14 896 )的孢子生产进行了研究 .比较了不同的麸皮 /小麦配比作为底物时的孢子产量 ,发现当以麸皮为唯一底物时 ,能够获得最高孢子产量 .并在此基础上研究了不同的初始含水量 ,麸皮预处理和初始 pH对孢子产量的影响 ,在麸皮初始湿度为 14 0 % ,115℃处理 2 0min ,并调节 pH为 6 .0 ,固态发酵培养 7d可以得到 9.5× 10 9个孢子麸皮 .本研究第一次采用来源广泛 ,价格低廉的麸皮作为唯一底物来进行Coniothyriumminitans的孢子生产 ,并达到了较高的孢子产量 ,为Coniothyriumminitans作为生物农药的工业化生产提供了新的选择 .图 6参
- 陈欣李寅堵国成陈坚
- 关键词:固态发酵麸皮
- 应用响应面方法优化Coniothyrium minitans固态发酵生产生物农药被引量:18
- 2004年
- 利用响应面方法对固态发酵生产生物农药盾壳霉 (Coniothyriumminitans)孢子的培养基条件进行了优化研究。响应面分析结果表明 ,淀粉、尿素和KH2 PO4与Coniothyriumminitans的孢子产量存在显著的相关性 ,通过求解回归方程得到优化发酵条件 :当淀粉为 36 .4 3g L ,尿素3.91g L和KH2 PO41.0 2 g L时 ,孢子产量达到理论最大值 9.94× 10 9孢子 g麸皮 ,在摇瓶发酵条件下 ,实际最大孢子产量为 1.0 4× 10 10 孢子
- 陈欣李寅堵国成陈坚
- 关键词:响应面优化固态发酵生物农药