杨延飞
- 作品数：7 被引量：7H指数：1
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- 生物反应器内工程化软骨的三维动态构建
- 2015年
- 组织工程化软骨的体外构建,可克服传统治疗方法的一些不足,被认为是一种有望治疗关节软骨缺损的有效途径。文章旨在探究人源脂肪干细胞结合壳聚糖/明胶水凝胶支架,在体外动态环境下构建工程化软骨的优势。实验制备了壳聚糖/明胶水凝胶支架,对其理化性能进行了检测,后将人源脂肪干细胞作为种子细胞,接种在支架上进行软骨的诱导培养,其中,选用转瓶作为动态的培养环境。分别通过组织学染色、共聚焦显微镜观察、扫描电镜观察等考察了软骨的构建情况,结果显示壳聚糖/明胶支架的平均孔径为(118.25±19.51)μm,孔隙率为(82.60±2.34)%,溶胀率为(361.28±0.47)%,弹性模量为(61.2±0.16)k Pa,具有良好生物相容性。动态载支架-转瓶内水凝胶支架中细胞蛋白多糖的表达更显著,细胞生长分布更加均匀,分泌细胞外基质基本填满整个支架,可促进人源脂肪干细胞的软骨分化和体外软骨的构建。
- 宋克东杨延飞李文芳李丽颖张钰刘天庆
- 关键词：脂肪干细胞软骨细胞组织工程化软骨生物反应器种子细胞
- ADSCs-壳聚糖/明胶水凝胶工程化软骨的三维动态构建被引量：5
- 2015年
- 组织工程软骨的体外构建被认为是一种有希望治疗关节软骨缺损的有效途径。为评估载脂肪干细胞(Adipose-derived stem cells,ADSCs)壳聚糖/明胶水凝胶支架,在体外动态构建组织工程软骨相对传统静态培养的优势,本研究用壳聚糖/明胶制备了软骨仿生支架,并检测其物理性质。在制备的水凝胶支架上以1×107cells/m L密度接种ADSCs后,分别置于转瓶及T-瓶的软骨诱导基中培养两周,通过试剂染色、代谢检测和电镜观察,考察了细胞的软骨分化能力、活性、生长分布、渗透深度、增殖及胞外基质分泌情况。结果表明,壳聚糖/明胶支架的平均孔径为118.25±19.51μm,孔隙率为82.60±2.34%,吸水率为361.28±0.47%,弹性模量为61.2±0.16 k Pa,具有良好生物相容性。ADSCs生长状态良好,可向软骨细胞分化,适于作为组织工程软骨构建的种子细胞。表征结果显示,转瓶内水凝胶支架中细胞蛋白多糖的表达更显著,细胞生长分布更加均匀,细胞外基质分泌基本填满整个支架。因此,转瓶载壳聚糖/明胶支架所提供的三维动态环境,是体外构建组织工程软骨的良好方法。
- 宋克东杨延飞李文芳李丽颖朱艳霞刘天庆
- 关键词：转瓶组织工程软骨脂肪干细胞细胞培养
- 一种用于造血干细胞体外培养的免疫隔离动态共培养生物反应器
- 一种用于造血干细胞体外培养的免疫隔离动态共培养生物反应器，包括旋转培养室和控制培养室轴向旋转的电机动力系统，可连续或间歇操作。旋转培养室由聚碳酸酯隔膜组件隔开，隔膜组件能够实现并促进两侧物质扩散，分隔不同细胞。左侧培养室...
- 宋克东李丽颖聂毅胡雪岩杨延飞刘天庆
- 用于造血干细胞体外培养的免疫隔离动态共培养反应器
- 用于造血干细胞体外培养的免疫隔离动态共培养反应器，包括旋转培养室和控制培养室轴向旋转的电机动力系统，可连续或间歇操作。旋转培养室由聚碳酸酯隔膜组件隔开，隔膜组件能够实现并促进两侧物质扩散，分隔不同细胞。左侧培养室包含与不...
- 宋克东李丽颖聂毅胡雪岩杨延飞刘天庆
- 文献传递
- BMMSCs在温敏性玻璃微载体上的培养及收获被引量：1
- 2016年
- 贴壁型种子细胞的培养和收获,常在二维静态的培养环境下进行,而后采用酶解法或机械刮刀法来进行收获,但是其存在着一定的弊端,细胞扩增数量有限且在收获时细胞易受到损伤,同时也会失去一定的干性。论文研究整合了具有较大比表面积和三维立体环境的微载体,及温敏性材料无损收获细胞的优点,采用表面自由基共聚合方法,用3-丙基三甲氧基硅烷甲基丙烯酸TMSPM为偶联剂,在微载体表面接枝上N-异丙基丙烯酰胺NIPAAm(N-isopropylacrylamide)及甲基丙烯酸羟基丙基酯(Hydroxypropyl methacrylate,HPM),制备出P(NIPAAm-co-HPM)-g-TMSPM-g-微载体。其次,将骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)接种在制备的温敏性玻璃微载体上,通过细胞的培养与降温收获考察制备的温敏性微载体是否适宜细胞的降温脱附及其细胞相容性。扫描电镜及能谱分析表明温敏材料NIPAAm可成功地接枝到含硅羟基的玻璃微载体表面。BMMSCs的粘附和生长曲线测定结果证明材料具有较好的生物相容性,降温收获后细胞的活性对比及再培养实验表明细胞可很好的从载体上脱附,并保持良好的生长活性。
- 宋克东杨延飞武爽李丽颖闫新宇刘天庆
- 关键词：N-异丙基丙烯酰胺骨髓间充质干细胞
- 包埋的脐血CD34+细胞与仿生壁龛的动态共培养
- 脐带血(Umbilical cord blood，UCB)，由于富含造血干/祖细胞(Hematopoieticstem/progenitor cells，HSPCs)、具有良好的移植优势，被视为治疗人类疾病的宝贵生物资源...
- 杨延飞
- 关键词：脐带血CD34细胞动态环境
- 用于ADSCs增殖分化的海藻酸钙/骨粉微胶珠的制备与检测被引量：1
- 2015年
- 海藻酸钙微胶珠具有良好的生物相容性、可降解、机械强度高、韧性好等优点,已被广泛应用于组织工程研究。骨粉中含有大量的羟基磷灰石及BMP等生长因子,具有良好的骨诱导活性。结合上述两种材料的优点,制备了一种复合海藻酸钙/骨粉微胶珠,并系统研究了人源脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)在其中的最佳包埋密度。通过正交实验综合考虑海藻酸钠溶液浓度、氯化钙溶液浓度和骨粉密度对海藻酸钙/骨粉微胶珠机械强度及传质性能的影响,并采用液滴法制备了最优化的用于ADSCs体外增殖分化的微胶珠。结果表明,海藻酸钠溶液的浓度对微胶珠传质能力和机械强度的影响最大,CaCl2溶液浓度其次,骨粉密度的影响最小。当海藻酸钠溶液浓度、CaCl2溶液浓度和骨粉密度分别为2.5%,4.5%和5.0mg/mL时,微胶珠的性能最好。对细胞扩增倍数的比较和死活染色等检测表明,当ADSCs的初始包埋密度为5×106 cells/mL时,更适于ADSCs的扩增与分化。
- 宋克东闫新宇宋飞杨延飞李士晓朱艳霞刘天庆
- 关键词：骨粉骨组织工程细胞载体
