许书珍
- 作品数：7 被引量：24H指数：3
- 供职机构：山东农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金NSFC-广东联合基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- H9N2亚型禽流感病毒HA基因的表达及其单因子血清的制备被引量：2
- 2015年
- 为了制备特异性识别H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的单因子血清,本试验提取H9N2亚型AIV RNA,RT-PCR后,分别扩增上段HA1、中段HA2和下段HA3 3段基因。将他们插入原核表达载体pET-32a(+)中,转化BL21(Rosetta)菌株中表达。将表达的蛋白常规免疫昆明白小鼠,以制备抗血清。结果显示,成功获得3段重组融合蛋白,且均具有良好的免疫原性。间接免疫荧光试验(IFA)结果显示,上段HA1、中段HA2制备的单因子血清均可与H9N2亚型AIV反应,而下段HA3则不能。重组马立克氏病病毒(MDV)MZC12 HA/NA同样证明HA1、HA2两段制备的单因子血清能识别HA基因的表达。本试验成功制备了识别H9N2亚型AIV HA的单因子血清,为H9N2亚型AIV的鉴别诊断及研究奠定了基础。
- 陈俊霞孙鹏许书珍李思菲苏帅赵鹏崔治中
- 关键词：H9N2亚型禽流感HA基因
- 禽网状内皮组织增生症病毒LN1201株的全基因组序列分析及其U3区的独特性被引量：2
- 2016年
- 为比较分析近年来禽网状内皮组织增生症病毒(REV)的基因组变异情况,本研究对分离自某父母代肉种鸡场患病鸡的REV LN1201株进行PCR扩增和克隆测序,获得了LN1201株的前病毒全基因组序列,并将其与不同参考株基因组进行了比较分析。结果显示,LN1201株前病毒基因组全长8 438 bp,具有典型复制完整型逆转录病毒的基因组结构。与参考株相比,LN1201与国内分离株HLJR0901和疫苗污染病毒株MD-2同源性较高,但其U3区与不同病毒株的同源性相对较低,并且在U3区出现了罕见的14 bp碱基插入,显示该病毒株可能为LTR发生重组的病毒。本研究有助于了解我国鸡群中REV的基因组特性,提示有必要继续关注REV诱发的肿瘤及其基因变异。
- 王一新栾怀彪许书珍李阳常爽崔治中赵鹏
- 关键词：禽网状内皮组织增生症病毒全基因组
- 龙胜凤鸡中一株A亚群禽白血病病毒的基因组分析及其对SPF鸡的致病性
- 禽白血病病毒（ALV）被发现已有一百多年，是最早发现并深入研究的病毒之一。它也是第一个被证实可诱发肿瘤的病毒，该发现获得1996年诺贝尔生理或医学奖。根据ALV细胞受体的特异性和病毒基因组中囊膜蛋白基因将其划分为A-J等...
- 许书珍
- 关键词：白血病病毒基因组分析
- 表达NDV-F基因重组马立克病病毒的构建及其在鸡体内外的复制被引量：3
- 2015年
- 以敲除meq基因的MDV-Ⅰ型弱毒GX0101△meq为载体构建一株表达外源基因NDV-F的重组病毒。将外源基因NDV-F的ORF插入到真核表达载体pcDNA3.1(-)中,扩增含有CMV启动子的NDV-F表达盒,同时扩增筛选基因Kan+表达盒,将他们插入到载体PMD18-T中。用含有MDV-US2区50bp同源臂的引物扩增串联表达盒,将产物电转进含有GX0101△meq的EL250宿主菌中,1%阿拉伯糖诱导掉阳性重组病毒基因组中的Kan+表达盒。挑选敲除Kan+表达盒的阳性克隆提取质粒,转染CEF细胞拯救重组病毒。将重组病毒腹腔注射鸡体,观察其在鸡体内的生长复制。成功拯救插入外源基因NDV-F的重组马立克病病毒rMDV-F,重组病毒在CEF细胞内能很好的复制表达且其在鸡体内也能很好的生长复制。以GX0101△meq为载体,结合Red E/T和FLP/FRT重组系统成功构建了表达外源基因NDV-F的重组病毒,为我们重组病毒的研究奠定了基础。
- 孙鹏李思菲张芙寿苏帅董宣赵鹏陈俊霞许书珍崔治中
- 关键词：马立克病病毒重组病毒
- 中国三种不同地方品系鸡对J亚群禽白血病病毒NX0101株易感性的比较被引量：6
- 2017年
- 为了研究不同中国地方品系鸡对J亚群禽白血病病毒(subgroup J Avian leukosis virus,ALV-J)的易感性和抵抗力,将ALV-J中国分离株NX0101分别通过鸡胚静脉和卵黄囊两种接种方式接种莱芜黑鸡、汶上芦花鸡、济宁百日鸡3种不同地方品系鸡,分析比较NX0101株对3种品系鸡的致病性。结果表明,NX0101株均可诱发3种品系鸡的髓样细胞瘤,并引起生长迟缓和免疫抑制等亚临床症状,但致病性的强度差异具有显著统计学意义。在两种不同接种方式下,莱芜黑鸡的死亡率和肿瘤发生率均明显低于另外两个品系,并且感染莱芜黑鸡的体重受抑制程度最低。济宁百日鸡对NX0101株的抵抗力在这3种品系鸡中最弱。因此,莱芜黑鸡可以作为ALV-J遗传抗性基因筛选和抗病育种的候选品系。
- 栾怀彪王一新许书珍房立春崔治中常爽赵鹏
- 关键词：易感性遗传抗性
- 不同类型鸡泄殖腔棉拭子禽白血病病毒p27抗原检测与病毒分离的相关性分析被引量：9
- 2017年
- 为探讨泄殖腔棉拭子或种蛋中禽白血病病毒(ALV)-p27抗原检测与病毒分离检测之间的相关性,对不同类型鸡编号后分别对应采集泄殖腔棉拭子或蛋清后以ALV-p27抗原检测试剂盒检测,同时无菌采集抗凝血接种DF-1细胞进行ALV的分离鉴定。结果显示,人工感染A亚群ALV的SPF鸡群泄殖腔棉拭子ALV-p27抗原检测与病毒分离有很高的吻合率,相对于病毒分离法,119次泄殖腔棉拭子ALV-p27抗原检测中出现有1例假阳性和3例假阴性;从美国进口的200只祖代肉鸡3次采血DF1细胞分离病毒结果均为阴性,而泄殖腔棉拭子ALV-p27抗原阳性率依次为4.00%(8/200),2.97%(5/168)和2.61%(4/153),假阳性率为3.30%。相对于病毒分离法,正在实施ALV净化的不同遗传背景地方品系鸡泄殖腔棉拭子ALV-p27抗原检测的假阳性率高达93.20%~100.00%,还有一定比例假阴性(1/9,1/4,1/3)。本研究大量对应比较的数据表明,相对于血浆病毒分离法,不同类型鸡的泄殖腔棉拭子ALVp27抗原检测法不仅有很高的假阳性率,还有一定比例的漏检率。在种鸡场的ALV净化过程中考虑到成本,不建议以泄殖腔棉拭子作为检测材料。本试验为我国鸡群禽白血病净化检测和临床鉴别诊断提供参考依据。
- 陈俊霞范建华许书珍孙鹏王一新李思菲韩妮张言坤徐步赵鹏崔治中
- 关键词：禽白血病病毒病毒分离P27抗原
- 龙胜凤鸡中一株A亚群禽白血病病毒的基因组分析及其对SPF鸡的致病性研究被引量：2
- 2016年
- 为了解中国地方品系鸡中禽白血病病毒(ALV)的基因组序列特征及其致病性,本研究通过DF-1细胞接种、间接免疫荧光和PCR等方法,从某龙胜凤鸡保种鸡群的种蛋中分离到一株A亚群ALV(ALV-A),命名为SDAU14A1株,并对其全基因组进行测序。将该序列与不同参考病毒株进行序列对比,结果显示SDAU14A1分离株与日本矮脚鸡分离株Tym S_90全基因组同源性最高,其U3区同源性达到100%,而与其它中国地方品系鸡分离株同源性较低。人工感染试验显示该病毒分离株感染SPF鸡后不仅引起感染鸡的生长迟缓和免疫抑制,还能够诱发淋巴细胞肿瘤,特别是具有较强的水平传播能力。本研究有助于了解我国地方品系鸡群中ALV-A的分子演变及其致病性,为我国地方品系中ALV净化提供参考依据。
- 许书珍王一新李阳栾怀彪崔治中常爽赵鹏
- 关键词：全基因组分析
