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单核细胞增生性李斯特菌prfA缺失株及其亲本株胞外蛋白的比较蛋白质组学: PrfA蛋白对单核细胞增生性李斯特菌致病过程中毒力基因的表达起着重要调控作用，本文从蛋白质水平上初步探讨PrfA的调控功能。本文以同源重组法构建单核细胞增生性李斯特菌LM4株prfA基因缺失株LM4 4 prfA。对LM...; 殷月兰白春光王国梁贾艳艳渠瑾付红高云飞焦新安; 关键词：李斯特菌细胞外基质蛋白质组学飞行时间质谱; 文献传递

单核细胞增生性李斯特菌prfA缺失株及其亲本株胞外蛋白的比较蛋白质组学被引量：1: 2013年; 【目的】PrfA蛋白对单核细胞增生性李斯特菌致病过程中毒力基因的表达起着重要调控作用,本文从蛋白质水平上初步探讨了PrfA的调控功能。【方法】对LM4及LM4ΔprfA的胞外蛋白采用双向凝胶电泳结合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定技术,进行比较蛋白质组学研究。【结果】发现差异表达的有31个蛋白点,质谱鉴定成功19个点,对应12种蛋白,其中已知的毒力相关蛋白有:InlC、ActA、LLO,此外还发现丙氨酸丙氨酰羧肽酶、GW重复表面蛋白、假定转录调节因子、天冬氨酸半醛脱氢酶和一些假定蛋白。采用实时荧光定量PCR方法对蛋白质组学方法获得的结果进行了验证,结果显示hly、actA、inlC的基因表达量显著下降,丙氨酰氨羧肽酶、GW重复表面蛋白的mRNA转录水平降低。【结论】PrfA蛋白对毒力岛LIPI-I和毒力岛LIPI-II中毒力基因的表达具有重要的调控作用,新发现的转录调控因子和假定蛋白的功能有待于进一步深入研究。; 殷月兰白春光王国梁贾艳艳渠瑾付红高云飞焦新安; 关键词：单核细胞增生性李斯特菌分泌蛋白

绵羊李斯特菌病病原诊断及其生物学特性研究被引量：3: 2013年; 目的单核细胞增生性李斯特菌(Lm)是引起人兽共患李斯特菌病的病原菌,该菌感染宿主中枢神经系统是导致高死亡率的主要原因。本研究对农场暴发的呈现神经症状的绵羊李斯特菌病病例进行病原诊断,进而对其病原学特性开展相关研究。方法利用选择培养基和鉴别培养基进行细菌的分离和鉴定,借助多重PCR方法和Lm诊断血清对分离株的血清型进行研究,并测定了该菌株的溶血活性和药物敏感性,基于毒力基因actA的遗传谱系进行分型,最后对其LD50进行了测定。结果从绵羊脑实质组织中成功地分离到一株血清型为4b的Lm菌株NTSN,其溶血效价为24,LD50为104.30 CFU,是具脑侵袭性的强毒菌株,可用青霉素类药物治疗。遗传谱系分析表明Lm NTSN可能属于高侵袭性的流行克隆。结论 LmNTSN的分离鉴定及其生物学特性的研究,为深入探讨Lm的致病机理和预防控制奠定了基础。; 王国梁殷月兰焦库华张小荣付红高云飞贾艳艳焦新安; 关键词：单核细胞增生性李斯特菌毒力

单核细胞增生性李斯特菌prfA基因缺失株的构建及其生物学特性被引量：3: 2011年; 【目的】单核细胞增生性李斯特菌(Lm)是人兽共患李斯特菌病的病原菌,其致病性与调控因子PrfA蛋白作用下毒力基因的表达有着密切关系,本文初步探讨了PrfA蛋白对细菌毒力因子的调控作用。【方法】利用同源重组技术对血清型分别为1/2a和4b的LM4、F4636进行prfA基因的敲除,并构建其回复突变株,对获得的突变株LM4ΔprfA、F4636ΔprfA进行生物学特性研究。【结果】实验结果表明:两株缺失株的溶血活性丧失、回复突变株的溶血活性得到恢复,突变株还丧失磷脂酶活性,黏附和侵袭特性显著下降(P<0.05),对BALB/c小鼠的半数致死剂量提高了105个数量级。【结论】由此表明,PrfA蛋白对hly、plcB、inl家族基因的表达及细菌毒力具有重要的调控作用。prfA基因缺失株的构建为进一步研究PrfA蛋白的调控功能提供了材料,为研究其在Lm致病性中的作用奠定了基础。; 白春光殷月兰贾艳艳付红高云飞焦新安; 关键词：单核细胞增生性李斯特菌突变株同源重组生物学特性

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付红