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魏琳娜: 作品数：16 被引量：17H指数：3; 供职机构：青海大学农牧学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金青海省自然科学基金更多>>; 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>

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一种大分子量透明质酸的提取纯化方法: 本发明提供了一种大分子量透明质酸的提取纯化方法，它是从高原鼢鼠中提取纯化得到，该透明质酸的平均分子量为2.6×10<Sup>6</Sup>‑3.1×10<Sup>6</Sup>Da。本方法提取的透明质酸属于高分子透明质酸...; 魏莲魏琳娜汪洋魏登邦王宁索有瑞; 文献传递

高原鼠兔脑组织中精子特异性乳酸脱氢酶的作用被引量：3: 2015年; 高原鼠兔对高原低氧环境有很强的适应性。研究发现,精子特异性乳酸脱氢酶(LDH-C4)基因在高原鼠兔脑组织中表达,为阐明LDH-C4在高原鼠兔脑组织中的作用,应用荧光定量PCR和Western blot方法,测定了Ldh-c基因在高原鼠兔脑组织中的表达水平;应用对精子特异性乳酸脱氢酶(LDH-C4)特异性的抑制剂(N-isopropyl oxamate),通过肌肉注射后,研究抑制剂对高原鼠兔脑组织中LDH比活力、乳酸和ATP含量的影响。结果表明,在mRNA和蛋白水平,Ldh-c基因在高原鼠兔脑组织中均有表达,相对表达水平分别为0.38±0.05和0.74±0.13;当肌肉注射1 m L 1 mol/L的抑制剂30 min后,血液中抑制剂浓度为0.08 mmol/L;与对照组相比,抑制剂组脑组织中LDH比活力、乳酸和ATP含量显著下降,抑制剂对LDH、乳酸和ATP的抑制率分别为30.78%、46.47%和21.04%。结果表明,精子特异性乳酸脱氢酶基因在高原鼠兔脑组织中表达。LDH-C4通过催化无氧糖酵解过程,为其脑组织生命活动提供至少20%的ATP,可能使高原鼠兔减小在低氧环境中对氧气的依赖,增强对低氧环境的适应能力。; 许利娜魏莲汪洋李筱魏琳娜魏登邦; 关键词：高原鼠兔脑组织

高原鼢鼠p53基因的克隆及其对不同低氧环境的应答: p53基因是一种肿瘤抑制基因，野生型p53基因编码蛋白通过上调或下调其下游靶基因，从而调控细胞周期，进行DNA损伤修复，调节细胞的衰老或凋亡以及血管生长等，但突变型p53基因不仅失去抑制肿瘤的功能，而且表现出促进肿瘤发生...; 安志芳魏琳娜魏莲魏登邦; 关键词：高原鼢鼠 P53基因低氧

高原鼢鼠p53基因的克隆及其对不同低氧环境的应答: 目的为了明确高原鼢鼠p53基因序列的特异性以及p53对不同低氧环境的应答,研究了高原鼢鼠和大鼠p53基因在不同海拔条件下的表达水平。方法通过基因克隆的方法得到了高原鼢鼠p53基因的CDS区,同时利用生物信息学软件分析突变...; 安志芳魏琳娜王志洁魏莲魏登邦; 关键词：高原鼢鼠 P53基因低氧; 文献传递

高原鼠兔体细胞中精子特异性乳酸脱氢酶的功能研究: 魏登邦魏莲秦桂香汪洋王辰龙魏琳娜安志芳王志洁; 通过项目研究，在国际学术刊物上首次报道了高原土著高山动物高原鼠兔适应低氧环境的特异性分子机制。研究结果表明，高原鼠兔通过长期在高原缺氧环境中的适应和进化，形成了一系列适应缺氧环境的分子机制，其精子特异性乳酸脱氢酶基因不仅...; 关键词：; 关键词：精子乳酸脱氢酶肿瘤治疗

高原鼠兔心脏中Ldh-c基因的表达及其对无氧糖酵解水平的影响被引量：3: 2015年; 高原鼠兔(Ochotona curzoniae)对高原低氧环境有很强的适应性。本研究组前期研究显示,精子特异性乳酸脱氢酶(sperm-specific lactate dehydrogenase,LDH-C4)基因Ldh-c在高原鼠兔心、肝、脑、肌肉等组织中都有表达。本研究为了阐明LDH-C4对高原鼠兔心肌组织无氧糖酵解水平的影响,将20只高原鼠兔随机分为抑制剂组和空白对照组,每组10只。抑制剂组注射1 m L 1 mol/L LDH-C4特异性抑制剂N-isopropyl oxamate于高原鼠兔股二头肌,双侧各注射500μL;空白对照组注射等量的生理盐水。应用荧光定量PCR和Western blot方法,测定LDH-C4基因Ldh-c在高原鼠兔心肌组织中的m RNA和蛋白表达水平;比较抑制剂组和空白对照组高原鼠兔心肌组织中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活力;以及乳酸(lactate,LD)和ATP含量。结果显示,在m RNA和蛋白水平,Ldh-c基因在高原鼠兔心肌组织中均有表达,相对表达量分别为0.47±0.06和0.68±0.08;当肌肉注射1 m L 1 mol/L的N-isopropyl oxamate时,30 min后血液中抑制剂浓度为0.08 mmol/L,与空白对照组相比,抑制剂组心肌组织中LDH活力[(6.18±0.48)U/mg vs(9.08±0.58)U/mg]、LD[(0.21±0.03)mmol/g vs(0.26±0.04)mmol/g]和ATP含量[(4.40±0.69)nmol/mg vs(6.18±0.73)nmol/mg]显著下降(P<0.01)。N-isopropyl oxamate对LDH活力、LD和ATP含量的抑制率分别为31.98%、20.90%和28.70%。以上结果说明:Ldh-c基因在高原鼠兔心肌组织中表达;LDH-C4通过催化无氧糖酵解过程,为心肌组织的活动提供至少28%的ATP,这可能降低高原鼠兔在低氧环境中对氧气的依赖,增强其对低氧环境的适应。; 李筱魏莲汪洋许利娜魏琳娜魏登邦; 关键词：高原鼠兔心肌组织

高原鼢鼠肺组织细胞凋亡相关基因的进化分析及其在不同海拔条件下的表达模式被引量：1: 2019年; 高原鼢鼠(Myospalax baileyi)是青藏高原特有的地下鼠,其地下洞道严重缺氧。一般来说,低氧会促进细胞凋亡。为了探讨高原鼢鼠适应低氧环境的分子机制,本文应用生物信息学方法对p53下游凋亡促进基因Pidd、Fas、Bax、Puma、Apaf-1、Scotin、Perp、Igfbp3和凋亡抑制基因Bcl-2的序列和编码的氨基酸序列进行了进化分析,并以SD大鼠(Rattus norvegicus)为对照,研究了这些基因在不同海拔环境条件下(3 300 m和2 260 m)的表达模式。结果表明:(1)高原鼢鼠细胞凋亡基因的序列与以色列鼹鼠(Nannospalax galili)同源性最高;预测的PIDD、PUMA、Apaf-1、IGFBP3和BCL-2编码蛋白结构域与以色列鼹鼠的存在明显的趋同进化位点;SIFT评估发现,高原鼢鼠和以色列鼹鼠与其他物种相比,p53、PIDD、PUMA、Apaf-1和IGFBP3氨基酸序列分别在78、853、157、320和285号位点的变异对其功能有显著影响;(2)在高海拔条件下(3 300 m),高原鼢鼠肺组织中凋亡促进基因Pidd、Bax、Puma和Apaf-1表达水平显著下降,凋亡抑制基因Bcl-2表达水平显著升高,而在SD大鼠中凋亡促进基因和凋亡抑制基因的表达水平均没有变化;高原鼢鼠中Bcl-2/Bax比值随海拔的升高显著上升,而在SD大鼠中没有变化。以上结果提示,高原鼢鼠p53结构变异可能导致其下游基因表达模式与SD大鼠不同,其中凋亡促进基因Pidd、Bax、Puma和Apaf-1表达水平下降,凋亡抑制基因Bcl-2表达水平上升,从而抑制了细胞在低氧条件下的凋亡;在长期低氧的作用下,高原鼢鼠p53下游基因产物PIDD、PUMA、Apaf-1和IGFBP3产生了影响其功能的变异位点,这可能改变了它们与发挥功能的复合物的结合力,从而抑制了细胞凋亡。因此,通过长期的低氧适应,高原鼢鼠肺组织中与细胞凋亡相关的基因产物结构发生变异,导致其基因表达水平发生变化,从而抑制细胞凋亡,这是高原鼢鼠适应地下低氧洞道生境的分子机制�; 安志芳魏琳娜王志洁李苏华徐波魏莲魏登邦; 关键词：高原鼢鼠细胞凋亡基因进化分析低氧

高原鼢鼠组织中透明质酸提取工艺及分子表征被引量：1: 2017年; 旨在建立高原鼢鼠组织中透明质酸(Hyaluronic acid,HA)提取工艺。采用单因素试验确定粗提、酶解和除杂等工艺的最佳条件,通过响应面法进一步优化粗提和酶解工艺条件。通过红外分光光度法确定HA的分子结构,Bitter-Muir法确定其葡萄糖醛酸的含量,黏度法和体积排阻色谱法确定透明质酸的分子量。高原鼢鼠最佳粗取工艺∶液料比4 m L/g(水/动物组织,V/W),提取温度26℃,提取时间1.6 h;最佳酶解工艺:酶解温度37℃,p H8.7,加酶量0.7%(1∶250胰蛋白酶/动物组织,W/W);最佳除杂工艺为:氯苯体积20%(氯苯/HA水溶液,V/V),以3倍体积95%乙醇沉淀,以7%活性碳(活性碳/HA水溶液,W/V)除杂,透析时间3 h。在此工艺条件下,每500 g高原鼢鼠组织可得到(144±3.61)mg HA粉末。平均回收率为72.73%。红外图谱显示提取物具有与Sigma公司的HA标准品一致的吸收峰,葡萄糖醛酸的质量分数为45.60%,蛋白质含量为0.11%,其分子量达到3×106 Da。本工艺提取的高原鼢鼠组织来源的HA回收率好,纯度高;高原鼢鼠组织中HA分子量大,含量高。; 魏琳娜汪洋魏登邦魏莲王宁索有瑞; 关键词：高原鼢鼠

高原鼢鼠组织中透明质酸提取工艺及分子表征: 透明质酸(Hyaluronic acid,HA),又名玻璃酸,是一种线性大分子酸性粘多糖,由(1-β-4)-D-2葡萄糖醛酸(1-β-3)-N-乙酰基-D-氨基葡萄糖的双糖单位重复连接组成.我们为了建立高原鼢鼠组织中透明...; 魏琳娜汪洋魏登邦魏莲; 关键词：高原鼢鼠

高原鼠兔肝中Ldh-c基因的表达及其对无氧糖酵解水平的影响被引量：4: 2015年; 高原鼠兔(Ochotona curzoniac)对高原低氧环境有很强的适应性。我们研究发现,精子特异性乳酸脱氢酶(LDH-C4)在高原鼠兔肝组织中表达。为了阐明LDH-C4对高原鼠兔肝组织无氧糖酵解水平的影响,将20只高原鼠兔随机分为抑制剂组和空白对照组,每组10只。抑制剂组注射1 mol/L LDH-C4特异性抑制剂N-异丙基草氨酸盐(N-isopropyl oxamate)于高原鼠兔股二头肌,双侧各注射500μl,空白对照组注射等剂量的0.9%生理盐水。应用荧光定量PCR和western blot方法,测定了精子特异性乳酸脱氢酶基因(Ldh-c)在高原鼠兔肝组织中的表达水平,应用高压液相色谱法测定了血液中抑制剂的浓度,用生物化学方法测定了抑制剂组和空白对照组高原鼠兔肝组织中乳酸脱氢酶(LDH)比活力以及乳酸(LD)和ATP含量。结果表明,在m RNA和蛋白水平,Ldh-c基因在高原鼠兔肝组织中均有表达,m RNA相对表达水平为0.22±0.04,蛋白相对表达水平为0.97±0.20;当肌肉注射1 mol/L的抑制剂30 min后,血液中抑制剂浓度为0.08 mmol/L,肝组织中乳酸脱氢酶比活力抑制剂组和空白对照组分别为(4 990±290)U/g和(7 360±420)U/g,抑制剂组和空白对照组乳酸含量分别为(0.38±0.05)mmol/g和(0.53±0.03)mmol/g,抑制剂组和空白对照组ATP含量分别为(5.84±0.83)μmol/g和(7.78±1.06)μmol/g,经单因素方差分析,抑制剂组的乳酸脱氢酶比活力和乳酸及ATP含量均显著下降(P<0.01);抑制剂对乳酸脱氢酶比活力和乳酸及ATP含量的抑制率分别为30.19%±3.90%、32.22%±8.70%和24.94%±7.80%。以上结果说明,Ldh-c在高原鼠兔肝组织中表达,LDH-C4通过催化无氧糖酵解过程,为其肝组织生命活动提供至少24%的ATP,这可能使高原鼠兔减小了在低氧环境中对氧气的依赖,增强了对低氧环境的适应力。; 魏琳娜魏莲汪洋李筱许利娜魏登邦; 关键词：高原鼠兔肝组织

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