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李媛媛: 作品数：12 被引量：9H指数：2; 供职机构：北京生物制品研究所有限责任公司更多>>; 发文基金：艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项“重大新药创制”科技重大专项国家科技重大专项更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位的原核表达、纯化及其黏膜免疫佐剂作用被引量：1: 2011年; 目的原核表达、纯化大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(Heat-labile enterotoxin B subunit,LTB),并评价其黏膜免疫的佐剂作用。方法从产毒素大肠杆菌44815菌株中扩增出LTB基因,克隆至质粒pET-32a(+)中,构建重组原核表达质粒pET-32a(+)-LTB,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,IPTG诱导表达,表达的LTB经纯化后进行神经节苷脂GM1结合活性及黏膜免疫佐剂活性鉴定。结果重组表达质粒经双酶切及测序鉴定证明构建正确;重组LTB主要为可溶性表达,表达量约占菌体总蛋白的15%;纯化的LTB纯度可达95%以上,可与兔抗CTB血清发生特异性反应,且具有GM1结合活性及良好的黏膜免疫佐剂活性。结论在大肠杆菌中成功表达了重组LTB蛋白,纯化的LTB具有良好的黏膜免疫佐剂活性。; 崔文禹李媛媛单璞凌媛李计来徐静

复制型重组痘苗活载体疫苗生产工艺研究被引量：1: 2008年; 目的研究复制型重组痘苗活载体疫苗的生产工艺。方法通过在病毒-细胞比(MOI)、不同培养时间、培养温度、碳酸氢钠含量的条件下培养复制型重组痘苗病毒,确定适用于重组痘苗活载体疫苗的生产工艺。以确定的生产工艺制备3批疫苗,并进行各项检定。结果以MOI为1∶750,培养液中加入7.5%碳酸氢钠的比例为1.0%,培养温度为37℃,培养时间为72 h左右,获得疫苗的病毒滴度最高。按此生产工艺生产的3批疫苗,病毒滴度均在107PFU/ml以上,经检定各项指标均合格。结论确定了复制型重组痘苗活载体疫苗的生产工艺。; 王宁刘颖李媛媛罗兰侯秀霞刘建源; 关键词：痘苗病毒疫苗生产工艺

基于碳水化合物的抗肿瘤疫苗研发进展: 2011年; 糖生物学研究新技术的发展为碳水化合物疫苗的研究提供了新思路。从理论上讲，各种类型细胞的表面抗原决定簇都可用于疫苗的开发。近年来已经研制成多种碳水化合物疫苗，此文主要介绍抗肿瘤碳水化合物疫苗的研究新进展。; 李媛媛孙晓雨徐静; 关键词：碳水化合物癌症疫苗表位

昆虫细胞分类技术的应用与发展: 2016年; 昆虫细胞杆状病毒表达系统作为四大表达系统之一，已经被广泛应用于生物制药领域，作为该表达系统的支撑基础，昆虫细胞开始成为继哺乳动物细胞之后的另一种新型细胞基质，在疫苗及生物技术产品领域得到开发应用。然而，昆虫细胞与哺乳动物细胞在细胞特性等方面存在显著差异，建立适合昆虫细胞特性的质量控制方法已经成为生物制药领域必须要解决的问题。此文仅就昆虫细胞鉴定方法研究进展做一综述，为开发及建立昆虫细胞个性化鉴别方法提供参考。; 孙立影张占东李媛媛孟淑芳; 关键词：昆虫细胞基质

重组痘苗病毒艾滋病疫苗细胞免疫检测方法的优化: 目的:对评价重组痘苗病毒艾滋病疫苗细胞免疫水平的方法进行优化,确定稳定的疫苗细胞免疫ELISPOT检测方法。方法:重组痘苗病毒艾滋病疫苗经皮内途径接种BALB/c小鼠,6周采集小鼠的脾细胞分别用ICS和ELISPOT方法...; 李媛媛凌媛马志新徐静; 关键词：痘苗病毒艾滋病疫苗细胞免疫 ELISPOT; 文献传递

戊型肝炎疫苗评价用小鼠品系的比较被引量：1: 2017年; 目的比较不同品系及相同品系不同来源BALB/c小鼠对戊型肝炎疫苗(HE疫苗)的免疫应答,探讨适用于HE疫苗评价的小鼠品系,规范疫苗效力评价用动物。方法分别用2家企业制备的HE疫苗免疫BALB/c、C57BL/6、KM和NIH 4种品系小鼠及3种不同公司来源的BALB/c小鼠,均免疫1针,28 d后采血,分离血清,检测抗体应答,计算效力ED_(50)。结果 2家疫苗免疫C57BL/6、KM和NIH小鼠时,各剂量组均表现出敏感应答,提示C57BL/6、KM和NIH小鼠对本研究中的2家疫苗不能灵敏地反映出剂量变化趋势,不适用于HE疫苗效力评价;BALB/c小鼠对2家企业各剂量组HE疫苗均呈现良好的免疫应答,且呈明显的剂量效应关系。3种不同来源的BALB/c小鼠免疫HE疫苗后,抗体应答存在差异。结论 BALB/c小鼠可作为评价HE疫苗免疫原性和效力ED_(50)的模型动物;应用BALB/c小鼠进行疫苗评价时需固定小鼠来源。; 苏瑶林惠娟孙光李媛媛姜崴吴星梁争论; 关键词：戊型肝炎疫苗效力试验小鼠品系

重组痘苗病毒艾滋病疫苗细胞免疫水平ELISPOT检测方法的建立被引量：4: 2011年; 目的建立检测重组痘苗病毒(Recombinant Tiantan vaccinia,rTV)艾滋病疫苗细胞免疫水平的ELISPOT方法。方法 rTV艾滋病疫苗经皮内注射BALB/c小鼠,免疫后1～6周,采集小鼠脾细胞,ELISPOT法检测小鼠细胞免疫水平,确定最佳检测时间,并对免疫剂量、肽库刺激浓度进行优化。应用ELISPOT方法对3批rTV疫苗成品进行检测,验证该方法的适用性;按现行检定标准对同批疫苗进行重复检测,验证该方法的重复性;应用ELISPOT和ICS方法同时对rTV疫苗进行检测,验证该方法与ICS法的相关性。结果 rTV艾滋病疫苗最佳免疫剂量为50μl/只,免疫后4周,混合多肽库刺激终浓度为4μg/ml,淋巴细胞分泌IFNγ的水平较高;ELISPOT法适用性和重复性较好,且与ICS法具有较好的相关性(r=0.767,P<0.05)。结论已成功建立了检测重组痘苗病毒艾滋病疫苗细胞免疫水平的ELISPOT方法。; 李媛媛凌媛马志新徐静; 关键词：痘苗病毒艾滋病疫苗细胞免疫 ELISPOT

不同佐剂流感疫苗的小鼠免疫效果: 2012年; 目的评价不同佐剂流感疫苗的小鼠免疫效果。方法培养并纯化流感病毒鼠肺适应株PR/8/34,制备流感病毒裂解液。将BALB/c小鼠随机分为5组:流感病毒PR/8/34裂解液(HA)组、HA+大肠杆菌不耐热肠毒素b亚单位(Heat-labile exterotoxin B subunit,LTB)组、HA+弗氏不完全佐剂(FIA)组、HA+A(lOH)3组和生理盐水对照组,HA+LTB组采用滴鼻黏膜免疫,免疫剂量为50μl/只,其余各组均采用肌肉注射,免疫剂量为100μl/只,共免疫2次,间隔2周。于初次免疫后28 d,经小鼠眼内眦采血,分离血清,检测各组小鼠血清IgG抗体效价、血凝抑制效价及攻毒后保护力及鼠肺病毒RNA载量,评价不同佐剂对流感疫苗的免疫增强作用。结果各佐剂组小鼠血清IgG抗体水平及血凝抑制效价均显著高于HA组,且差异均有统计学意义(P均<0.01);HA+FIA组小鼠血清IgG抗体水平及血凝抑制效价均显著高于HA+LTB组和HA+A(lOH)3组(P均<0.01);HA+LTB组与HA+A(l OH)3组抗体效价差异无统计学意义(P>0.05)。各佐剂组和HA组小鼠攻毒后均存活,HA+FIA组鼠肺病毒RNA载量最低,HA+LTB组与HA+A(lOH)3组相当。结论不同佐剂对流感疫苗均有一定的免疫增强作用,其中LTB滴鼻免疫和A(lOH)3肌肉注射对流感疫苗的免疫增强作用相当。; 单璞徐立猛李计来李媛媛凌媛马志新徐静; 关键词：流感疫苗佐剂小鼠免疫效果

结晶紫蚀斑法检测重组痘苗病毒艾滋病疫苗病毒滴度方法的建立被引量：2: 2011年; 目的建立重组天坛株痘苗病毒（rTV）艾滋病疫苗的结晶紫蚀斑病毒滴度检测方法，为rTV艾滋病疫苗病毒滴度测定提供更稳定的方法。方法通过对Vero细胞浓度、病毒吸附时间及温度、病变判定时间等方面进行优化，建立rTV艾滋病疫苗病毒滴度的结晶紫蚀斑检测方法，并应用BioSpotReader进行蚀斑计数及分析，比对仪器蚀斑计数和人工蚀斑计数的相关性；应用血球吸附法、中性红蚀斑、结晶紫蚀斑3种方法，对多批rTV艾滋病疫苗及天坛株痘病毒滴度进行检定，进行3种方法的相关性分析；采用结晶紫蚀斑法重复测定样品，计算变异系数（CV），对方法的精密性进行验证；采用SPSSl7．0软件对实验数据进行统计分析。结果确定Vero细胞浓度为5．O×10^5～9．O×10^5个／ml时，病毒37℃吸附2h后加入含甲基纤维素的维持液，培养72h，应用BioSpotReader进行蚀斑计数，与人工计数的相关系数r=0．985，能客观反映不同大小的病毒蚀斑，降低了人工计数引起的非客观因素误差；经过3种方法对不同批次的rTV艾滋病疫苗及天坛株痘病毒进行病毒滴度检定，结晶紫蚀斑与血吸附法的相关系数r=0．997，结晶紫蚀斑法与中性红蚀斑法相关系数r=0．980（P〈0．01），具有高度相关性。结论建立了可用于rTV艾滋病疫苗病毒滴度检测的结晶紫蚀斑方法。; 李媛媛凌媛马志新王锡岩徐静; 关键词：痘苗病毒艾滋病疫苗病毒滴度

实时定量PCR方法监测重组痘苗外源基因传代稳定性: 2008年; 目的建立实时定量PCR方法以监测外源基因在不同重组痘苗代次中的稳定性。方法裂解法提取8个代次插入有HIV基因的重组痘苗DNA，用实时定量PCR的绝对和相对定量方法，研究不同代次基因组中插入的外源基因与痘苗基因组的数量关系。结果绝对和相对定量方法均证明，在传代过程中，重组痘苗中的外源基因有缺失现象。结论建立的实时定量PCR方法可以特异、定量地分析外源基因在重组痘苗中的稳定性。; 王宁李媛媛徐静王芙戴凯凡刘颖罗兰邵一鸣刘建源; 关键词：实时定量PCR 重组痘苗病毒传代稳定性

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