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毛琦琦: 作品数：17 被引量：26H指数：3; 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>; 相关领域：医药卫生理学更多>>

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09CS中11个血清型肺炎球菌荚膜多糖抗体IgG含量质控检测范围的建立被引量：1: 2019年; 目的建立09CS中11个血清型(2、8、9N、10A、11A、12F、15B、17F、20、22F、33F)肺炎球菌(pneumococcus,Pn)荚膜多糖抗体IgG含量的质控检测范围。方法将细胞壁C多糖(CPS)分别与Pn22F、Pn25两个型别多糖混合,制备CPS+Pn22F和CPS+Pn25两种样品吸收液,稀释09CS后,ELISA法检测13价肺炎链球菌结合疫苗(pneumococcal conjugate vaccine,13PCV)的13个血清型IgG抗体水平,验证两种吸收液检测结果的一致性。将09CS作为待测血清(用CPS+Pn25稀释),第二代国际肺炎参考血清007sp为标准血清(用CPS+Pn25稀释),第一代国际参考血清89SF为质控血清(用仅含CPS的吸收液稀释),采用ELISA法连续检测待测血清52次,计算11个血清型抗体浓度平均值(GMC)、标准偏差(SD)和变异系数(CV)、U检验中99%置信区间下的正态分布范围。结果 09CS经两种吸收液吸收后,13个型别的检测结果一致性较好,r2=0. 983 5,且差异无统计学意义(P> 0. 05)。11个血清型有效定值异常率均低于20%,异常率最大的型别为Pn20,异常率为17. 3%;各型的CV为7. 55%~12. 86%,均低于15%;Pn2、Pn8、Pn9N、Pn10A、Pn11A、Pn12F、Pn15B、Pn17F、Pn20、Pn22F、Pn33F血清型荚膜多糖抗体IgG含量的质控检测范围分别为18. 56~31. 45、13. 35~26. 61、11. 90~23. 63、14. 23~25. 74、5. 96~8. 84、3. 70~6. 47、23. 89~37. 50、10. 68~16. 90、15. 97~24. 31、10. 63~17. 61、24. 24~47. 55μg/mL。结论建立了09CS中11个血清型Pn荚膜多糖抗体IgG含量的质控检测范围,可应用于Pn疫苗临床血清荚膜多糖抗体IgG含量的ELISA法检测。; 石刚李红郭丽娜卢旭毛琦琦陈晓航王欣茹陈翠萍叶强; 关键词：肺炎球菌酶联免疫吸附试验

HPSEC-MALS法检测多糖并与Sepharose CL-4B法关联的方法: HPSEC‑MALS法检测多糖并与Sepharose CL‑4B法关联的方法，利用高效分子排阻色谱柱，采用高效分子排阻色谱‑多角度激光散射仪(HPSEC‑MALS)方法，测定多糖分子大小及其分布，并将其转化为琼脂糖凝胶(...; 李茂光李亚南毛琦琦陈苏京王春娥赵丹许美凤叶强; 文献传递

毛细管电泳法检测Y群和W135群脑膜炎球菌多糖结合物原液中游离载体蛋白含量被引量：1: 2016年; 目的建立毛细管电泳法检测Y群和W135群脑膜炎球菌多糖结合物原液中游离载体蛋白破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)含量,并对方法进行验证及初步应用。方法采用胶束电动毛细管电泳法测定TT含量,使用内径50μm未涂层熔融石英毛细管柱(有效柱长为104 cm),以40 mmol/L硼酸盐-SDS缓冲液(p H 9.30)为电泳介质,电压为30 k V,在200 nm紫外波长条件下进行检测。对方法的专属性、线性、精密度、重复性、稳定性、准确性、定量限进行验证,并用建立的方法检测Y群和W135群脑膜炎球菌结合物原液各3批样品中的游离蛋白TT含量。结果该方法专属性、精密度、重复性、稳定性、准确性良好,TT在10~35μg/ml范围内与色谱峰相对内标峰面积比值呈良好的线性关系,r^2=0.995,游离蛋白的定量限为7μg/ml。用建立的方法检测Y群和W135群脑膜炎球菌结合物原液各3批样品中的游离蛋白TT含量均小于10μg/ml。结论建立的毛细管电泳法操作简便、准确,可用于检测Y群和W135群脑膜炎球菌多糖结合物原液中的游离蛋白含量。; 李茂光武琳琳米健秋毛琦琦李亚南杨英李健峰叶强

我国A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗有效组分质量趋势分析研究被引量：1: 2021年; 目的对我国2014—2016年A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗有效组分进行质量趋势分析研究。方法收集2014—2016年国内两家企业的送检A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗批签发资料,对疫苗有效组分A群和C群多糖含量检测结果进行趋势分析,同时按规定随机抽取一定批次疫苗进行多糖含量测定,并与企业自检结果进行统计学比较分析。结果2014—2016年所有送检疫苗批次的生产及检验记录摘要审查符合标准要求;趋势分析结果显示,各企业的A群和C群多糖含量测定结果均在警戒限(平均值±2SD)以内,环比年度统计学比较分析也未发现显著性差异,趋势平稳,一致性较好;中国食品药品检定研究院对不同批次疫苗多糖含量检测结果与企业自检结果无显著性差异。结论我国的A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗产品中多糖含量稳定,批间一致性较好,检验方法可靠,从而确保了上市产品的质量。; 王珊珊李亚南赵丹毛琦琦陈苏京李茂光徐颖华叶强; 关键词：多糖含量批签发

高效阴离子交换色谱-脉冲安培法检测A、C、Y和W135群脑膜炎球菌多糖含量: 2018年; 目的用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法(HPAEC-PAD)测定A、C、Y和W135群脑膜炎球菌多糖含量,并对该方法进行验证及初步应用。方法采用Carbo Pac~?PA-1 4×250 mm分析柱与Aminotrap 4×50 mm保护柱;使用氢氧化钠/醋酸钠梯度洗脱,以多糖抗原标准溶液质量浓度为横坐标,其相应的峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,并对建立的方法进行专属性、精密度和准确性验证;同时与传统方法的检测结果进行比较分析。结果 A、C、Y和W135群脑膜炎球菌多糖质量浓度在0.5～27.0μg/m L范围内与峰面积均具有良好线性关系,r=0.999。该方法专属性高,分析结果重复性良好,RSD均<5%;回收率均在95%～105%范围内;与传统的火箭免疫电泳法相比,检测结果差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 HPAEC-PAD准确、可靠,重复性好,可用于检测脑膜炎球菌多糖原液及疫苗成品中的多糖含量。; 李亚南赵丹徐颖华毛琦琦陈苏京李茂光叶强; 关键词：脉冲安培检测器

HPSEC-RI法检测多糖并与Sepharose CL-4B法关联的方法: HPSEC‑RI法检测多糖并与Sepharose CL‑4B法关联的方法，通过HPSEC‑RI方法，利用三根高效分子排阻色谱柱测定多糖分子大小及其分布，并将其转化为琼脂糖凝胶(Sepharose)CL‑4B法K<Sub>...; 李茂光毛琦琦陈苏京赵丹许美凤李亚南叶强; 文献传递

HPSEC-RI法检测多糖并与Sepharose CL-4B法关联的方法: HPSEC‑RI法检测多糖并与Sepharose CL‑4B法关联的方法，通过HPSEC‑RI方法，利用三根高效分子排阻色谱柱测定多糖分子大小及其分布，并将其转化为琼脂糖凝胶(Sepharose)CL‑4B法K<Sub>...; 李茂光毛琦琦陈苏京赵丹许美凤李亚南叶强

多糖蛋白结合疫苗中残留ADH和EDAC同时定量检测的液相色谱串联质谱法的建立被引量：1: 2020年; 目的建立同时定量检测己二酰肼(adipic acid dihydrazide,ADH)和N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺[N-(3-dimethylaminopropyl)-N′-ethylcarbodimide,EDAC]的液相色谱串联质谱(liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)法,实现多糖蛋白结合物(肺炎球菌结合物、脑膜炎球菌结合物和b型流感嗜血杆菌结合物)中残留ADH和EDAC的定量研究。方法通过检测EDAC在纯水、中性水溶液[(50 mmol/L磷酸缓冲溶液(pH 6.8)、200 mmol/L氯化钠水溶液和疫苗培养基)]及0.1%甲酸(formic acid,FA)水溶液中的稳定性,确定实现EDAC完全转换为EDU的前处理条件。优化了色谱柱种类对ADH、EDU和EDAC的保留,以及质谱条件如产物离子、碰撞电压、Q1和Q3电压等对ADH和EDU定量灵敏度的影响,建立以C18WCX(2.1 mm×150 mm,5μm)为固定相,pH 2~3的0.1%FA-水和0.1%FA-乙腈为流动相的LC-MS/MS方法,实现ADH和EDAC(实际检测对象为EDAC的转换产物EDU)的高灵敏度定量分析。对建立方法的精密度、准确度、线性范围、检出限(LOD)和定量限(LOQ)进行验证。结果ADH在水溶液中较稳定,EDAC自溶解开始即水解为EDU,且难以完全转换,导致EDAC测定困难;在样品和标准品溶液中加入FA,可实现EDAC完全且快速的转换为EDU。ADH、EDU和EDAC在C18色谱柱上保留弱,在色谱柱的死时间附近出峰,无法实现这些化合物与样品基质的分离,而本文所选C18WCX固定相可实现目标化合物的保留且峰形较好。通过前体离子扫描、产物离子扫描,选择目标化合物的前体离子和响应强度较好的产物离子作为MRM的离子对,并用MRM自动优化程序获得目标化合物的最佳Q1、CE和Q3电压值。建立的方法检测的ADH和EDAC含量与峰面积线性关系良好,R2均大于0.999;ADH的LOD为3.96μg/L、LOQ为15.63μg/L,EDAC的LOD为0.58μg/L、LOQ为1.17μg/L,灵敏度较高;精密度(峰面积RSD<2%)及准确度(回收率为90%~105%)较高。结论建立的LC-MS/MS方法实�; 李茂光龙珍李亚南王春娥李月琪毛琦琦叶强; 关键词：ADH 肺炎球菌结合疫苗脑膜炎球菌结合疫苗 B型流感嗜血杆菌结合疫苗

AC群脑膜炎球菌与b型流感嗜血杆菌联合疫苗多糖含量免疫速率比浊检测方法的建立及验证被引量：3: 2017年; 目的建立AC群脑膜炎球菌与b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)联合疫苗(Men AC-Hib)多糖含量免疫速率比浊检测方法,并进行验证。方法采用免疫速率比浊法测定联合疫苗中A群、C群脑膜炎球菌及Hib多糖含量,绘制不同多糖抗原含量的标准曲线,并对方法的检测低限、精密度、准确度和特异性进行验证。结果 3种不同多糖抗原浓度在2~8μg/ml之间具有良好的线性关系,相关系数均大于0.98;建立的方法检测A群、C群脑膜炎球菌和Hib多糖的检测低限分别为0.847、0.043和0.507μg/ml;检测各组分多糖抗原含量的批内和批间变异系数均小于5%,平均回收率在88.30~104.40%之间;各组分特异性多糖抗体仅与各自多糖抗原反应,且各组分多糖抗原共同存在时无相互干扰。结论成功建立了准确、特异的AC群脑膜炎球菌与Hib联合疫苗的多糖含量检测方法。; 李亚南朱向国毛琦琦陈苏京赵丹王珊珊徐颖华叶强李茂光; 关键词：A群脑膜炎球菌 C群脑膜炎球菌 B型流感嗜血杆菌多糖含量

b型流感嗜血杆菌荚膜多糖定量~1H-NMR法的建立及验证被引量：2: 2019年; 目的建立测定b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)荚膜多糖绝对含量的定量1H核磁共振法(nuclear magnetic resonance,NMR,即1H-NMR法),并进行验证。方法精密称取Hib荚膜多糖粉末,重水溶解,配制一定浓度的供试品多糖溶液;采用Bruker Avance-600型超导核磁共振波谱仪,设置NMR实验参数条件,以重水为溶剂,二甲基砜为内标物建立定量1H-NMR法进行多糖含量测定;对该方法进行专属性、准确度、线性、精密度及耐用性验证;应用建立的定量1H-NMR法及化学法测定5批Hib荚膜多糖含量。结果经1H-NMR谱、13C-NMR谱、1H-1H COSY谱及1H-13C HSQC谱归属显示,Hib荚膜多糖的定量峰(δH5. 06)及内标物二甲基砜的定量峰(δH3. 14)分离良好,互不干扰,且不受样品内其他谱峰的干扰,方法专属性良好;供试品溶液加入100、150及200μL国际标准品,加标回收率在101%~102%;Hib多糖质量浓度在1~20 mg/mL范围,线性方程为y=0. 234 3 x-0. 002 6(R2=1. 000 0);供试品溶液6次重复性及中间精密度测定的定量峰积分面积比值的RSD分别为0. 78%及0. 60%,精密度良好;5 mg/mL的供试品溶液在不同脉冲角度及不同延迟时间定量峰积分面积比的RSD分别为0. 07%及0. 13%,耐用性良好。5批荚膜多糖经定量1H-NMR法及化学法检测,核糖含量均在《中国药典》三部(2015版)规定合格范围内(320~410 mg/g)。结论成功建立了测定Hib荚膜多糖含量的定量1H-NMR法,该方法具有良好的专属性、准确度、线性、精密度及耐用性,为Hib疫苗的质量控制研究奠定了基础。; 许美凤毛琦琦赵丹陈苏京李亚南李茂光叶强; 关键词：B型流感嗜血杆菌荚膜多糖

毛琦琦

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