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吕贝

作品数：5 被引量：7H指数：1
供职机构：扬州大学医学院更多>>
发文基金：国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

合作作者

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 2篇生物学
  • 2篇医药卫生
  • 1篇农业科学

主题

  • 2篇基因
  • 2篇反义
  • 2篇反义RNA
  • 2篇肝癌
  • 1篇蛋白
  • 1篇低氧
  • 1篇电穿孔
  • 1篇电穿孔法
  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
  • 1篇真核表达载体
  • 1篇脂质体
  • 1篇脂质体法
  • 1篇人源
  • 1篇肿瘤
  • 1篇转染
  • 1篇转染效率
  • 1篇脱氧
  • 1篇脱氧胞苷
  • 1篇细胞

机构

  • 5篇扬州大学

作者

  • 5篇吕贝
  • 3篇李华玲
  • 2篇崔恒宓
  • 2篇韩笑
  • 1篇耿拓宇
  • 1篇朱敏
  • 1篇陈欣虹
  • 1篇胡序明
  • 1篇孔玲

传媒

  • 1篇安徽医科大学...
  • 1篇安徽大学学报...
  • 1篇畜牧与兽医
  • 1篇肿瘤
  • 1篇生物工程学报

年份

  • 4篇2017
  • 1篇2016
共 5 条 记 录，以下是 1-5
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排序方式：
鸡巨噬细胞HD11不同转染方法的比较分析被引量：1
2017年
以鸡巨噬细胞HD11作为研究对象,分别采用5种不同的脂质体试剂转染和电转方法将含有绿色荧光蛋白(GFP)的质粒转入HD11细胞中,然后通过比较并筛选出适合鸡巨噬细胞HD11的最佳转染方法。结果显示:Lipofectamine 2000 Reagent、Attractene Transfection Reagent和Trans IT-2020 Transfection Reagent几种常见的脂质体转染试剂并不适用于HD11细胞转染。而Coming Transfection Reagent、Lip2000 Transfection Reagent脂质体转染试剂和电转可用于HD11细胞转染;其中,Lip2000 Transfection Reagent转染试剂效果最好。在此基础上,通过进一步优化得出:当DNA(μg)和Lip2000(μL)的比例为1∶1.5时转染效率最高。本研究成功筛选出一种有效的鸡巨噬细胞HD11转染方法,为鸡巨噬细胞的转染及其相关研究提供了实验依据。
韩笑胡序明袁君婷吕贝孙振陈世豪耿拓宇崔恒宓
关键词：转染效率电穿孔法脂质体法
人源NOVA1蛋白的真核表达及其抗低氧活性鉴定
2016年
构建人NOVA1基因的真核表达载体pCMV-Myc-NOVA1,转染PC12细胞后筛选最佳转染条件,进而结合细胞免疫组织化学研究NOVA1蛋白在PC12细胞中的表达分布,并探究其抗低氧活性。根据NCBI数据库NOVA1基因序列设计上下游引物,以pCR4-TOPO-NOVA1载体为模板采用聚合酶链式反应扩增获得NOVA1基因的全长c DNA编码序列,限制性内切酶SalⅠ和XhoⅠ双酶切后插入pCMV-Myc真核表达载体,酶切及直接测序验证后采用脂质体转染法转染入PC12细胞,针对转染比例和转染时间进行优化,进而采用实时定量PCR和Western blotting检测NOVA1蛋白的表达,最后采用细胞免疫组织化学检测NOVA1蛋白在PC12细胞中的表达定位及其抗低氧活性。通过酶切和直接测序验证,成功构建了真核表达载体pCMV-Myc-NOVA1;质粒和Lipo2000最佳转染比例为1:2.5,最佳转染时间为72 h;最佳转染条件下NOVA1基因和蛋白的表达水平显著增加,转染pCMV-Myc-NOVA1质粒后,NOVA1蛋白主要分布于细胞核和细胞质;过表达NOVA1的PC12细胞增殖活性明显增加。本文采用分子克隆的方法成功构建了NOVA1基因的真核表达载体,通过条件优化实现了高效表达并测定过表达NOVA1蛋白具有明显的抗低氧活性,不仅为深入揭示NOVA1蛋白的作用机理提供了重要参考,而且为NOVA1蛋白潜在的药物开发提供了重要技术支撑。
李华玲吕贝孔玲陈欣虹朱素娟
关键词：真核表达载体
反义RNA与肝癌的研究进展被引量：1
2017年
反义RNA是一类能与特异性mRNA互补并从翻译、转录或转录后水平上高度特异地抑制靶基因表达的RNA分子。肝癌是全球最常见且致命的恶性肿瘤。肝癌组织的无限增殖、侵袭转移、放化疗耐受等能力成为其无法治愈并不断恶化的重要原因。反义RNA在肝癌肿瘤中异常表达,肿瘤的恶性表型维持需要众多反义RNA的参与。近年来,利用反义RNA技术治疗恶性肿瘤已经成为了一个新的研究方向,本文对这一技术治疗肝癌进行了综述。
吕贝李华玲崔恒宓
关键词：肝癌反义RNA
DNA甲基化抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷抗癌新机制初探被引量：5
2017年
目的:探讨5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine,AZA)抗癌作用的新机制,即AZA是否通过激活反义RNA来抑制癌相关基因的表达。方法:从已建双链RNA文库中挑选出6个基因,即第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)、信号转导及转录激活因子1(signal transducers and activators of transcription 1,STAT1)基因、Ras样原癌基因B(Ras-like proto-oncogene B,RALB)、MET、CD44和热休克蛋白A4(heat-shock protein A4,HSPA4)基因。用DMSO(作为对照组)或溶于DMSO的AZA分别处理人肝癌细胞Hep G2,采用链特异性RT-PCR及实时荧光定量PCR法检测上述6个基因的正反义RNA的表达。AZA促进抑癌基因PTEN和先天免疫相关基因STAT 1的正义RNA表达(P<0.01,P<0.001),而癌相关基因CD 44和HSPA 4的正义RNA表达均受到明显抑制(P值均<0.01)。结论:AZA通过激活反义RNA的表达,诱导抑癌基因和先天免疫基因的表达,并抑制癌相关基因的表达,从而发挥其抗癌作用。
袁君婷韩笑吕贝胡序明耿拓宇崔恒宓
关键词：肝肿瘤脱氧胞苷
肝癌相关基因MEF2D反义RNA的鉴定及分析
2017年
鉴定和分析肝癌细胞中新的天然反义RNA MEF2D-AS根据已建立的双链RNA文库筛选与肝癌相关的反义RNA.通过RT-qPCR验证其反义RNA的存在,采用cDNA末端快速扩增技术获得其全长序列,并检测HepG2细胞经5-Aza-dC处理前后MEF2D基因正反义链表达量的变化.结果显示,成功鉴定出1条全长为1 265bp的新的天然反义RNA,并预测其属于长链非编码RNA(long non-coding RNA,简称为lncRNA),命名为MEF2D-AS.经5-Aza-dC处理后,MEF2D-AS的表达量升高,而MEF2DmRNA的表达量降低.证实了MEF2D-AS的存在并预测其属于长链非编码RNA,且与MEF2D正反义RNA是反相关关系.此研究结果可为进一步探讨肝癌发生机制提供参考.
李华玲李华玲袁君婷吕贝朱敏郑丹阳韩笑
关键词：长链非编码RNA肝癌
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