李强
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
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- Western印迹分析嗜人按蚊中肠膜蛋白免疫原性
- 2005年
- 采用Western-blot免疫学方法对嗜人按蚊中肠粗蛋白和膜蛋白(即纯化后的粗蛋白)分子量及免疫原性进行分析.结果,经SDS-PAGE电泳,嗜人按蚊中肠粗蛋白显示8条主带,分子量范围在(66 200～15 850Da);而膜蛋白显示4条主带,分子量范围在(66 200～35 480Da).利用中肠粗蛋白免疫小鼠所获得的抗血清,可特异性识别粗蛋白中的3个条带;而特异性识别膜蛋白的仅1条,分子量为38.9 kDa.可见,利用蔗糖不连续梯度离心可获得膜蛋白,该蛋白含有与抗蚊中肠粗蛋白抗体相结合的膜蛋白表面抗原,这对今后制备嗜人按蚊中肠单克隆抗体具有参考价值.
- 秦茜梁韶晖潘长旺谭峰李强
- 关键词：嗜人按蚊中肠免疫原性WESTERN-BLOT嗜人按蚊免疫原性膜蛋白中肠WESTERN-BLOTSDS-PAGE电泳
- 嗜人按蚊中肠单克隆抗体的制备及初步鉴定
- 2006年
- 目的制备并鉴定抗嗜人按蚊中肠单克隆抗体杂交瘤细胞株。方法用嗜人按蚊中肠做抗原,用细胞融合技术制备单克隆抗体,并采用ELISA法对单克隆抗体进行筛选和鉴定。结果建立了1株持续分泌抗嗜人按蚊中肠单克隆抗体的杂交瘤细胞株。BALB/c小鼠腹水单克隆抗体的最高稀释度达1∶12 800;单克隆抗体的重链属IgG1亚类;Western blot证实单抗能与嗜人按蚊中肠抗原特异性结合。结论成功制备了抗嗜人按蚊中肠单克隆抗体。
- 李强俞石芳梁韶辉谭峰秦倩潘长旺
- 关键词：嗜人按蚊杂交瘤单克隆抗体
- SDS-PAGE分析嗜人按蚊中肠膜蛋白
- 2005年
- 目的:初步分析嗜人按蚊中肠膜蛋白组分。方法:采用SDS-PAGE以及银氨染色法检测嗜人按蚊中肠膜蛋白分子量,并对分子量标准(Mr116000～14400)进行直线回归分析。结果:嗜人按蚊中肠粗蛋白(C带)上有8条主带,而膜蛋白(B带)上有4条主带。Marker标准直线回归系数为-0.9814。通过电泳迁移率计算,得出膜蛋白分子量在66.2～35.48kD范围。结论:膜蛋白提取后,嗜人按蚊中肠蛋白组分进一步得到纯化。
- 秦茜梁韶晖黄慧聪谭峰李强潘长旺
- 关键词：嗜人按蚊中肠膜蛋白质类
- 重组阴道毛滴虫黏附蛋白33单克隆抗体的制备及鉴定被引量：2
- 2007年
- 目的制备重组阴道毛滴虫(T.υ)黏附蛋白33(AP33)单克隆抗体(McAb)并进行初步鉴定。方法将pET32(a)-AP33重组质粒转化大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3),用0.5 mmol/L IPTG诱导表达,超声破菌后获得可溶性表达产物,通过Ni-NTA法纯化,以纯化的融合蛋白33为抗原,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备McAb,用ELISA和有限稀释法筛选出分泌高滴度McAb杂交瘤细胞株,测定其免疫球蛋白亚类及其效价,免疫印迹分析其特异性。结果共筛选出能稳定分泌抗AP33单克隆抗体的5株(4A2,4F11,4F8,4E7,4H11)杂交瘤细胞株,抗体重链均为IgG1;腹水的上清效价为1∶40 000-1∶80 000。免疫印迹分析显示,5株单抗均能与重组阴道毛滴虫AP33发生特异性结合;与阴道毛滴虫抗原分子量为33kDa抗原分子结合。结论制备的抗重组AP33杂交瘤细胞株能分泌识别重组AP33的高特异性单抗,为进一步研究其在阴道毛滴虫病免疫诊断中的应用奠定了基础。
- 俞石芳黄慧聪谭峰梁韶辉郑晓云李强潘长旺
- 关键词：阴道毛滴虫单克隆抗体免疫印迹
