宋新建
- 作品数:7 被引量:10H指数:1
- 供职机构:中国水产科学研究院珠江水产研究所更多>>
- 发文基金:江西省科技计划项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 草鱼呼肠孤病毒三重RT-PCR检测方法
- 本标准规定了3种不同基因型草鱼呼肠孤病毒的三重RT-PCR检测技术。本标准适用于对草鱼的3种基因型呼肠孤病毒的核酸进行检测与分离株的鉴定。
- 曾伟伟王庆吴淑勤王英英石存斌宋新建李莹莹赵长臣
- Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒的NASBA-ELISA检测引物、探针及试剂盒
- 本发明公开了一种Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒NASBA‑ELISA检测引物、探针及试剂盒。所述引物及探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.1~4所示。所述试剂盒中含有引物、探针、NASBA扩增缓冲液,酶混合液,扩增产物检测试剂,阴...
- 曾伟伟王庆王英英石存斌李莹莹任燕宋新建
- 文献传递
- 一种基于免疫过氧化物酶细胞单层试验的GCRV病毒Ⅱ型抗体检测试剂盒及其方法
- 本发明公开了一种基于免疫过氧化物酶细胞单层试验的GCRV病毒Ⅱ型抗体检测试剂盒及其方法,所述试剂盒含有固定在细胞培养板上的细胞内阳性抗原,其制备方法为将草鱼呼肠孤病毒株接种到GSB细胞悬液中,加入到细胞板中,培养成单层细...
- 曾伟伟王庆王英英李莹莹石存斌宋新建黄琦雯吴淑勤
- 文献传递
- Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒的NASBA-ELISA检测引物、探针及试剂盒
- 本发明公开了一种Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒NASBA-ELISA检测引物、探针及试剂盒。所述引物及探针的核苷酸序列如SEQIDNO.1~4所示。所述试剂盒中含有引物、探针、NASBA扩增缓冲液,酶混合液,扩增产物检测试剂,阴性对...
- 曾伟伟王庆王英英梁虹茹吴淑勤宋新建李莹莹石存斌
- 一种抗锦鲤免疫球蛋白IgM的单克隆抗体及其应用
- 本发明公开了抗锦鲤IgM的单克隆抗体、杂交瘤细胞株及其应用。所述抗锦鲤IgM的单克隆抗体是由保藏编号为CCTCC NO:C2015218的杂交瘤细胞株A5‑E10分泌产生的。利用所述的单克隆抗体可以用于锦鲤或普通鲤鱼某病...
- 李莹莹王庆曾伟伟王英英刘春郑树城石存斌宋新建黄琦雯
- 文献传递
- 一种抗锦鲤免疫球蛋白IgM的单克隆抗体及其应用
- 本发明公开了抗锦鲤IgM的单克隆抗体、杂交瘤细胞株及其应用。所述抗锦鲤IgM的单克隆抗体是由保藏编号为?CCTCC?NO:C2015218?的杂交瘤细胞株A5-E10分泌产生的。利用所述的单克隆抗体可以用于锦鲤或普通鲤鱼...
- 李莹莹王庆曾伟伟王英英刘春郑树城石存斌宋新建黄琦雯
- 草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型在不同鱼类细胞中的增殖情况被引量:10
- 2016年
- 草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型(GCRVⅡ)是当前导致草鱼出血病流行和暴发的主要基因型,本研究拟通过分析GCRVⅡ代表株HZ08在不同鱼类细胞中的增殖情况来筛选GCRVⅡ的敏感细胞系。首先以不同浓度的HZ08株接种草鱼吻端成纤维细胞(PSF)和草鱼鳔细胞(GSB),以确定病毒接种的最佳浓度;然后以最佳接种浓度同时感染PSF、GSB、草鱼肝细胞(L8824)、草鱼卵巢细胞(CO)等10种鱼类细胞,接毒后每天观察细胞状态,用荧光定量PCR(q PCR)方法定量分析HZ08在各种细胞系中的增殖量,并在感染5 d后用间接免疫荧光定性分析病毒在各种细胞中的增殖情况。结果显示,HZ08感染细胞的最佳接种浓度为1.0×10^4拷贝/μL,该毒株接种的10种鱼类细胞均无明显的细胞病变效应(CPE);q PCR分析病毒感染5~8 d后的结果显示,HZ08在GSB、L8824、PSF、草鱼鳍条细胞(CF)、CO、草鱼脑细胞(CIB)、锦鲤吻端细胞(KS)7种细胞中均能增殖,其中在GSB、L8824和PSF细胞中的增殖量较大,最大分别为1.14×10^7、5.90×10^6和6.30×10^4拷贝/μL。而在鲤上皮细胞(EPC)、锦鲤脑细胞(KB)、鲫脑细胞(Cc B)中不增殖,免疫荧光定性检测结果与荧光定量检测结果相吻合,在GSB、L8824和PSF中的荧光信号较多、较强,其他细胞中则较弱或没有荧光信号。研究表明,GSB、L8824和PSF是GCRVⅡ较为敏感的细胞系,该研究结果对今后Ⅱ型GCRV的研究和防控产品开发具有重要意义。
- 李贤曾伟伟王庆王英英李莹莹宋新建黄琦雯石存斌吴淑勤
- 关键词:草鱼呼肠孤病毒细胞系