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黄震: 作品数：72 被引量：193H指数：7; 供职机构：深圳市龙岗中心医院更多>>; 发文基金：深圳市科技计划项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学自动化与计算机技术更多>>

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结核杆菌表面ManLAM诱导人Ⅱ型肺泡上皮细胞中IL-37表达的研究被引量：2: 2019年; 目的:使用A549细胞系来探究ManLAM对人Ⅱ型肺泡上皮细胞中IL-37产生的可能作用以及相关分子机制。方法:通过从H37RV结核杆菌中提取并纯化ManLAM,将纯化的ManLAM用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染分析。使用TRIzol法提取人Ⅱ型肺泡上皮细胞系A549细胞中的总RNA。用逆转录试剂盒将总RNA反转录为cDNA。使用单克隆抗体和辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠二抗(Santa Cruz Biotechnology)对A549细胞中表达出来的IL-37进行检测。使用MAPK抗体试剂盒(Cell Signaling Technology)通过蛋白质免疫印迹法(Western Blot)对磷酸化的和总的p38和ERK1/2 MAPKs进行检测。针对TLR2或TLR4的siRNA或者抑制性siRNA,每5×10 5个A549细胞转染60pmol siRNA;ELISA法和流式细胞术检测A549细胞中表达出来的IL-37水平,用以评估ManLAM诱导A549细胞中IL-37表达的能力以及观察p38和ERK1/2等抑制剂对ManLAM诱导产生的IL-37表达的影响。结果:由于ManLAM是水相的主要成分,笔者发现ManLAM诱导IL-37 mRNA及蛋白表达具有时间和剂量依赖性,然而这种活性几乎可以全部被ERK1/2(U0126)和p38(SB203580)抑制剂所消除。在A549细胞中,ManLAM刺激主要是诱导ERK1/2和p38磷酸化以及细胞表面TLR2的表达。TLR2表达受到干扰后,ERK1/2和p38磷酸化水平也显著下降,同时IL-37的产物也大大减少。虽然ManLAM也能促进A549细胞中TLR4的表达,但是干扰TLR4对ManLAM诱导IL-37的表达没有影响。结论:ManLAM通过上调TLR2/p38或ERK1/2信号通路来诱导人Ⅱ型肺泡上皮细胞中IL-37的产生,而且,这为解释ManLAM促进结核杆菌持久性的病理学作用提供了一个重要的依据。; 黄震武红梅吴雨梅李娜谢振东陈思达方宏才; 关键词：结核杆菌

血清MMP-9,25羟维生素D_3表达与2型糖尿病周围神经病变相关性被引量：5: 2017年; 目的探讨2型糖尿病患者血清中基质金属蛋白酶9(MMP-9)、25羟维生素D_3(25OHD_3)水平与2型糖尿病周围神经病变相关性。方法收集60例患者,均来自深圳市龙岗中心医院,将其分为2组,A组(糖尿病非神经病变组)30例,B组(糖尿病神经病变组)30例。所有受试者抽取空腹血糖,检测血清MMP-9、25OHD_3水平。比较2组血清MMP-9、25OHD_3水平。分析他们与2型糖尿病神经病变之间相关性。结果各组间年龄、性别、体重指数,空腹血糖比较,均无显著性差异(P>0.05)。神经病变组较非并发神经病变组MMP-9表达水平显著性增高(P<0.05)。25OHD_3水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。MMP-9与25OHD_3呈负相关(P<0.05)。结论 2型糖尿病神经病变与MMP-9高表达,25OHD_3低表达呈现相关性,对临床预防神经病变有指导意义。; 武红梅黄莹胡园园黄震翟芳龙; 关键词：2型糖尿病 MMP-9 25羟维生素D3 神经病变

系统性红斑狼疮伴肾损害血清SOD及APN检测被引量：2: 2012年; 目的:探讨超过氧化物歧化酶(SOD)与血清脂联素(APN)对系统性红斑狼疮(SLE)肾损害发生发展中的临床意义。方法:应用化学发光法检测42例SLE患者血清SOD,ELISA法检测APN。同时取40例正常人作为对照,并与SLE常用实验室指标ANA、抗ds-DNA作比较。结果:SLE肾损害组SOD与APN浓度水平明显低于ANA及抗ds-DNA阴性和对照组,且治疗后SOD与APN浓度均升高。结论:APN在SLE肾损害发生发展中发挥重要的负调控作用,而SOD含量降低是损伤活动性的标志。; 张韶斌黄震陈斯亮罗莞超高映萍李虹; 关键词：系统性红斑狼疮血清脂联素

深圳市龙岗区女性支原体感染状况调查及药敏分析被引量：5: 2012年; 目的了解深圳市龙岗地区女性生殖道支原体感染状况及对不同药物的体外敏感性,以指导临床合理治疗。方法收集我院妇科门诊650例宫颈分泌物标本进行支原体培养及药敏分析。结果 650例女性患者支原体阳性者229例,检出率35.23%。其中UU 197例(31.31%),MH32例(4.92%),UU和MH混合感染33例(5.08%)。支原体对12种抗生素的敏感性依次为:CLA>AZI>JOS>MIN>SPA>OFL>LML。结论宫颈分泌物支原体阳性标本的药敏试验有助于指导妇科门诊合理用药,以提高治愈率,减少耐药菌株产生;如采用临床经验性治疗者,建议首选CLA、AZI和JOS。; 罗莞超蓝宇萍黄震; 关键词：宫颈分泌物支原体药敏试验

痰液miR-155检测作为诊断结核分枝杆菌感染标志物的研究被引量：1: 2020年; 目的分析结核分枝杆菌H37Rv感染诱导宿主巨噬细胞表达miRNA的变化,进而验证差异miRNA对结核分枝杆菌感染的临床诊断意义。方法使用H37Rv菌株感染人巨噬细胞系THP-1细胞后,收集12 h、24 h和48 h细胞并提取总RNA,进行miRNA微阵列芯片分析;再将临床分离的120株不同个体来源的结核分枝杆菌菌株与THP-1细胞共培养,使用实时定量PCR(real time-PCR,rt-PCR)验证差异miRNA的表达水平;随后收集结核患者的痰液标本处理后,提取总RNA,进行实时荧光定量PCR检测痰液中的差异表达的miRNA水平。结果H37Rv体外刺激THP-1细胞,使用miRNA微阵列芯片分析,结果显示:miR-155、miR-29b-1*、miR-150、miR-146a、miR-212和miR-483-5p共计6个miRNAs水平在3个时间点升高均较为明显;将来自不同区域的120株结核菌株分别与THP-1细胞的共培养24 h,检测发现miR-155表达水平最高;以miRNA-155为检测靶标,对68例结核患者的痰液进行检测,灵敏度和特异度分别为94.1%和93.8%。其灵敏度高于痰涂片的22.1%和结核抗体的83.8%,差异具有统计学意义(P<0.05)。但与ELISpot法的97.1%,差异无统计学意义(P>0.05)。在对痰涂片阳性结果与miRNA检测结果相关性分析中,发现miR-155其表达水平与痰涂片阳性等级呈正相关(R2=0.743,P<0.05)。结论此研究提示miR-155能够作为活动性结核诊断的有效靶标,且对间接评估患者肺部荷菌量有重要意义。; 陈思达卓宋明李娜黄震季乐财唐晓磊; 关键词：结核分枝杆菌微小核糖核酸痰液

ManLAM调节ERK1/2和p38诱导结核性关节炎FLS细胞中IL-37的表达: 2019年; 目的使用人成纤维样滑膜细胞(FLS细胞)系探究甘露糖修饰的脂阿拉伯甘露聚糖(ManLAM)对人结核性关节炎中IL-37产生的作用及相关分子机制。方法通过从H37Rv结核杆菌中提取并纯化ManLAM,使用TRIzol法提取人FLS细胞中的总RNA。用逆转录试剂盒将总RNA反转录为cDNA。使用单克隆抗体和辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠二抗(Santa Cruz Biotechnology)对FLS细胞中表达出来的IL-37进行检测。使用MAPK抗体试剂盒(Cell Signaling Technology),通过蛋白质免疫印迹法(Western Blot)对磷酸化的、总的p38和ERK1/2 MAPKs进行检测。针对TLR2或TLR4的siRNA或者抑制性siRNA,每5×10 5个FLS细胞转染60pmol siRNA;ELISA法和流式细胞术检测FLS细胞中表达出来的IL-37水平,用以评估ManLAM诱导FLS细胞中IL-37表达的能力以及观察p38和ERK1/2等抑制剂对ManLAM诱导产生的IL-37表达的影响。结果由于ManLAM是水相的主要成分,我们发现ManLAM诱导IL-37 mRNA及蛋白表达具有时间和剂量依赖性,然而这种活性几乎可以全部被ERK1/2 (U0126)和 p38 (SB203580)抑制剂所消除。在FLS细胞中,ManLAM刺激主要是诱导ERK1/2和 p38磷酸化,以及细胞表面TLR2的表达。TLR2表达受到干扰后,ERK1/2和 p38磷酸化水平也显著下降,同时IL-37的产物也大大减少。虽然ManLAM也能促进FLS细胞中TLR4的表达,但是干扰TLR4对ManLAM诱导IL-37的表达没有影响。结论 ManLAM通过上调TLR2/p38或ERK1/2 信号通路来诱导人FLS细胞中IL-37的产生,而且,这为解释ManLAM促进结核杆菌持久性的病理学作用提供了一个重要的依据。; 黄震武红梅谢振东方宏才; 关键词：成纤维样滑膜细胞

香港海鸥型菌耐喹诺酮类抗菌药物机制的研究被引量：1: 2017年; 目的建立香港海鸥型菌生物被膜体外模型,对香港海鸥型菌携带的Ⅰ类整合子相关基因进行分析,探讨香港海鸥型菌耐喹诺酮类抗菌药物的机制。方法吉姆萨染色法形态学角度分析及生结晶紫染色法半定量检测香港海鸥型菌临床分离株生物被膜的形成能力;微量肉汤稀释法测定香港海鸥型菌临床分离株在浮游生长状态与生物被膜状态下对诺氟沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、环丙沙星、洛美沙星的敏感性;PCR法检测耐喹诺酮类香港海鸥型菌菌株携带的Ⅰ类整合子相关基因。结果吉姆萨染色法定性结果显示,在55株香港海鸥型菌临床分离株中,有36株形成生物被膜,生物被膜形成率为65.4%(36/55);结晶紫染色法半定量检测香港海鸥型菌生物被膜的形成能力,其中8株香港海鸥型菌的吸光度OD560≤0.15,16株香港海鸥型菌的吸光值0.150.20;诺氟沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、环丙沙星、洛美沙星对香港海鸥型菌的最小生物被膜抑菌浓度均高于相应浮游菌的最小抑菌浓度(P<0.05);55株香港海鸥菌中共有18株耐喹诺酮类药物,耐药率32.7%,且18株香港海鸥型菌菌Ⅰ类整合子均含有耐药基因,该耐药基因在相应菌株中发挥耐药作用。结论香港海鸥型菌耐喹诺酮类基因的形成和耐药基因的播散可能与Ⅰ类整合子有关。; 赵亚梅黄震陈定强崔海燕孙俊生; 关键词：生物被膜耐药基因

重症监护病房患者铜绿假单胞菌IMP-1耐药基因检测及其耐药性分析被引量：1: 2011年; 目的:探讨重症监护病房(intensive care unit,ICU)患者铜绿假单胞菌IMP-1耐药基因检测及耐药性,为临床合理使用抗生素提供依据。方法:采用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因IMP-1,ATB Expression自动鉴定病原菌及药敏分析。结果:2007～2009年共分离出106株铜绿假单胞菌,对头孢他啶、亚胺培南、哌拉西林、氨曲南、头孢哌酮、头孢吡肟、左氧氟沙星的耐药率分别为50.9%、39.6%、79.2%、56.6%、57.5%、41.5%、25.5%。每年耐亚胺培南株的检出率依序分别为16.0%、28.3%、39.6%。耐亚胺培南株绝大部分检出IMP耐药基因。结论:ICU患者金属酶表型阳性菌株检出的基因型主要为IMP-1,产酶菌株耐药性强,随时进行细菌耐药性监测,正确使用有效的抗生素是控制感染和延缓细菌耐药的关键。; 束振华黄震; 关键词：重症监护病房铜绿假单胞菌耐药性

海藻多糖对小鼠巨噬细胞的免疫调节作用被引量：12: 2011年; 目的:探讨海藻多糖对小鼠巨噬细胞吞噬功能、产生IL-1以及海藻多糖对小鼠淋巴细胞增殖作用和细胞因子IFN-γ的影响。方法:将不同浓度的海藻多糖加入体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞中,采用中性红法、胸腺增殖法分别检测海藻多糖对小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能及其产生IL-1;用MTT法检测细胞增殖;酶联免疫法测定脾细胞培养上清IFN-γ的浓度。结果:海藻多糖对小鼠巨噬细胞吞噬功能具有一定的促进作用,并能促进巨噬细胞IL-1的合成,并通过诱生IFN-γ而发挥免疫调节作用。结论:海藻多糖能够增强小鼠巨噬细胞的免疫作用。; 黄震迟秀文束振华杨利桃崔海燕; 关键词：海藻多糖一氧化氮 IFN-Γ 白细胞介素-1

鼠抗人肥大细胞羧肽酶截短体抗体的制备与鉴定: 2008年; 目的建立检测人肥大细胞羧肽酶(hMCCP)的双抗体夹心ELISA法,以hMCCP截短体免疫小鼠,制备鼠源性多克隆抗体。方法PCR法扩增hMCCP-N118基因片段,克隆至pET28原核表达载体,转化大肠杆菌Rosseta(DE3)。用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白的表达,用Ni2+-NTA凝胶亲和层析纯化目的蛋白。用纯化重组蛋白免疫小鼠,制备抗hMCCP-N118抗体。间接ELISA测定抗体效价,Western blot鉴定抗体特异性。结果hMCCP截短体在大肠杆菌中高效表达,用纯化的重组蛋白免疫小鼠,获得了鼠抗hMCCP-N118抗体,效价达1∶6 400,该抗体能特异结合hMCCP。结论成功地制备了效价高、特异性好的鼠抗hMCCP截短体抗体。; 陈章权陆田田黄震梁晓东; 关键词：小鼠

黄震

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