张庆华
- 作品数：56 被引量：351H指数：11
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肉毒碱棕榈酰基转移酶1A的研究进展被引量：16
- 2013年
- 在真核生物的脂肪酸代谢过程中,肉毒碱棕榈酰基转移酶(carnitine palmitoyltransferase 1A,CPT1A)是长链脂肪酸由胞浆转移到线粒体氧化供能的关键限速酶。CPT1A基因可受到体内多种转录因子、激素以及代谢物的调节,同时影响相关代谢类疾病的发生发展,是疾病治疗和药物开发的新靶点和热点。全面综述了CPT1A基因在生理过程中的作用和调节,与疾病的相互关系以及相关药物的研究进展。
- 魏婷张永煜张庆华
- 关键词：代谢性疾病
- 新的生长激素异形体基因的发现及全长cDNA的克隆被引量：2
- 2000年
- 在通过大规模 ESTS技术对垂体基因表达谱的研究中 ,从垂体组织产生了 72 2 2个 ESTS,有385个 ESTs是代表生长激素 (GH)基因的 ,其中 1个为中间缺失 1 38bp的 GH异形体基因 ,并经巢式 RT- PCR及测序证实 ;该基因编码 1 71个氨基酸的前肽 ,去除信号肽后 ,其成熟肽由 1 45个氨基酸组成 ;经生物信息学处理 ,其分子量大小约 1 7k D;与正常生长激素分子内有 2个 GH受体结合位点不同 ,该新的 GH异形体分子内仅有一个生长激素受体的结合位点 .研究结果揭示 :正常垂体内存在着新的 GH异形体基因 ,该基因可能编码外周血中 1 6k D的生长激素 ;其功能可能为 2 2k D GH的生理拮挤剂 .
- 宋怀东高国峰彭永德彭永德黄秋花陈名道黄秋花陈名道胡仁明
- 关键词：生长激素基因克隆拮抗剂
- 利用基因免疫进行日本血吸虫Sj22蛋白抗体制备的研究被引量：2
- 2007年
- 应用基因免疫方法制备日本血吸虫Sj22蛋白的抗体,并研究CpG佐剂和蛋白加强策略在增强基因免疫效果中的作用。采用肌肉注射的方法免疫小鼠,实验动物分为4组:A组注射pVAX1-sj22质粒100μg/只;B组注射pVAX1-sj22质粒50μg/只,同时注射CpG佐剂20μg/只;C、D组注射pcDNA3.1-sj22质粒100μg/只。分别在0、3、6周进行免疫,第9周A、B、C组用30μg重组sj22蛋白加强免疫,D组则用pcDNA3.1-sj22质粒100μg加强免疫。第0、9、10周割尾采血,使用ELISA方法进行抗体效价测定,Westernblot验证抗体的特异性。结果表明:使用基因免疫的方法获得了针对Sj22的特异性抗血清,CpG佐剂能够有效降低质粒用量,基因免疫-蛋白加强的策略使得抗体的滴度提高了40～1280倍。
- 彭海林宋凯叶赛宋怀光刘锋徐斌张庆华
- 关键词：基因免疫抗体日本血吸虫
- 白斑癌变相关基因的表达谱研究被引量：1
- 2003年
- 目的 运用cDNA微阵列技术研究口腔白斑组织和口腔鳞癌组织的基因表达谱的变化 ,为探讨口腔白斑癌变基因提供初步筛选资料。方法 对临床切除的 5例口腔白斑和口腔癌组织进行总RNA抽提 ,逆转录制备探针 ,纯化后与含有 412 4个基因的微阵列杂交 ,杂交后的信号经扫描仪检测和计算机分析后筛选出与白斑癌变相关的基因。结果 对口腔白斑和口腔癌基因表达谱进行分析 ,发现存在 3 0个差异表达的基因 ,它们可能与白斑癌变有关。结论 采用cDNA微阵列技术能成功检测出两种不同组织中多个基因的差异表达 。
- 周曾同陶疆张庆华杜艳姿郑培蒸
- 关键词：白斑癌变相关基因表达谱口腔鳞癌组织
- 直接标记的抗体芯片筛选血清疾病候选标志物的研究被引量：3
- 2010年
- 目的应用血清样品直接标记和抗体芯片方法进行抗原和疾病标志物的筛选。方法分别取正常、糖尿病和甲亢患者的血清,采用FMB的ASB600抗体芯片的样品及相关的标记试剂盒,对3μl血清样本进行直接生物素标记。抗体芯片孵育后,用链霉亲合素标记的Cy3荧光显色芯片,经扫描仪检测杂交信号,分析比较芯片内、芯片之间的信号结果重复性,初步筛选疾病样本中与正常样本有差别的蛋白标志物。结果芯片内的两点重复性相关系数R2达到0.95～0.99,芯片重复实验间的相关系数R2达到0.98。对不同样本间的芯片信号进行比较,可以发现与疾病相关的新蛋白分子。结论本研究中使用的ASB600抗体芯片和直接标记荧光检测的实验方法可用于疾病相关的血清分子标志物的识别与寻找。
- 杨蔺范列英马红霞宋凯张庆华
- 关键词：抗体芯片疾病标志物血清
- 针刺正常大鼠肺组织SAGE标签数据库的基因分类研究被引量：2
- 2010年
- 目的阐释生理状态下针刺对大鼠肺组织基因表达谱的影响。方法利用正常组和针刺组的大鼠肺组织基因表达连续分析(SAGE)标签数据库,对差异表达标签进行基因系统分类和分析。结果正常组和针刺组相比共获得144个差异表达标签,分属于细胞生物合成过程、细胞脂类代谢过程、物质转运等6个DAVID基因分类。结论生理状态下针刺基础背景作用是一个包含蛋白、酶、RNA、脂类等生物大分子合成和代谢以及物质转运的生物过程。
- 尹磊淼徐玉东王宇刘艳艳张庆华杨永清
- 关键词：针刺基因表达谱
- 基因表达连续分析标签数据库的实时定量多聚酶链反应验证被引量：1
- 2010年
- 目的采用实时定量多聚酶链反应(PCR)技术验证不同丰度和匹配度的基因表达序列标签,尝试用该技术补充和完善高通量基因表达谱的结果。方法根据各基因序列全长设计引物,选择9个单匹配标签,6个多匹配标签,1个美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库更新后无匹配标签和2个无匹配基因进行实时定量PCR验证。结果挑选的所有基因均得到特异性扩增。基因表达量分析结果显示,基因表达连续分析(SAGE)文库中9个单匹配标签表达趋势和定量结果一致,且具有显著性差别;6个多匹配标签中有3个标签表达趋势和定量结果一致,且具有显著性差别;1个NCBI数据库更新后无匹配标签表达趋势和定量结果相反;2个无匹配基因表达量数据提示两组间没有显著性差别。结论实时定量PCR技术是验证SAGE等高通量数据的可靠工具之一。SAGE文库标签匹配度可影响数据的可信度。
- 尹磊淼张庆华王宇徐玉东杨永清
- 钙结合蛋白S100A9功能的研究进展被引量：3
- 2011年
- S100A9是钙结合蛋白S100家族的重要成员之一,其功能作用广泛,参与多种生物学过程。本文介绍了S100A9在临床疾病、信号传导通路和药物靶点中相关功能的研究进展,为该蛋白在哮喘、肿瘤等疾病中的进一步应用提供了新的思路。
- 尹磊淼张庆华王宇徐玉东杨永清
- 关键词：S100A9钙结合蛋白信号传导通路药物靶点
- 微孔板蛋白质芯片技术应用于单克隆抗体分型研究被引量：5
- 2007年
- 设计与构建了可用于单克隆抗体分型鉴定的微孔板蛋白质芯片,利用该芯片进行了12株单克隆抗体和2种多克隆抗体的分型鉴定,并与ELISA方法进行了对比。结果表明,蛋白质芯片方法对单克隆抗体和多克隆抗体进行鉴定的结果,与ELISA方法进行鉴定的结果一致;与ELISA方法相比,蛋白质芯片的方法降低了试剂与样品的用量,缩短了工作时间,提高了工作效率。对于高通量的单克隆抗体制备体系,单克隆抗体分型蛋白质芯片是一种敏感、快捷的分型鉴定工具。
- 宋凯周佳菁叶赛彭海林王升年肖华胜赵国屏张庆华
- 关键词：蛋白质芯片单克隆抗体
- 大鼠钙结合蛋白S100A9基因克隆、表达及纯化研究被引量：1
- 2010年
- 目的构建大鼠钙结合蛋白S100A9的原核表达质粒并获得纯化重组蛋白。方法根据大鼠S100A9基因mRNA序列,设计PCR引物,常规扩增后重组连入原核表达载体pET32a,并进行序列测定。利用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)和不同温度诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定结果,并亲和层析纯化重组蛋白。结果 PCR扩增获得的条带与预期的DNA表达片段大小一致,克隆构建了pET-32a-S100A9原核表达载体,测序结果与预期完全一致,经亲和层析纯化获得毫克级纯化重组蛋白,并发现该蛋白在21℃有比较强的表达。结论为进一步探讨S100A9蛋白生物学功能奠定基础。
- 尹磊淼宋凯张庆华魏颖王宇徐玉东杨永清
- 关键词：钙结合蛋白质类基因表达自身免疫性疾病
