朱既明
- 作品数：63 被引量：162H指数：8
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- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
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- 乙型肝炎病毒基因重组疫苗免疫儿童成人效果及阻断母婴传播的研究被引量：10
- 1991年
- 以中试连续生产的6批乙肝基因重组疫苗(R—Hepavac—B)免疫儿童和成人,每剂10μg,3批苗按0、1、6月,另3批苗按0、1、2月方案接种。每批分别接种8～10岁儿童51～66人,6批共363人,18～20岁成人46～52人,6批共287人。同时用两批血源苗作对照,分别接种儿童共85人,成人84人。又用其中89—10批HBsHg含量为20μg/ml的疫苗,按20μg×3,0、1、6月方案接种HBsAg和HBeAg双阳性母亲所生婴儿36名,HBsAg阳性母亲的婴儿19名。结果显示,10μg重组疫苗3针后,无论儿童和成人其抗HBs抗体阳转率均为100％,而对照,儿童成人各有1例未阳转。儿童按0、1、6方案接种者,其抗体GMT为363.8～470.5mIU,按0、1、2方案接种者,为150.8～195.5mIU。前者高于血源苗对照,而后者持平。成人0、1、6方案GMT为189.4～247.2mIU,0、1、2方案为87.9～96.3mIU,均略低于血源苗对照.经复测,此批血源苗含量为15μg/ml,高于基因苗含量,可能是造成以上结果的原因。母婴阻断结果显示,双阳性母亲子女36人,3针免后86.1％(32/36)的婴儿获得保护。单阳性母亲子女19人全部获得保护。
- 张权一张兴义叶世德王庭志徐桂珍贾国富田春生宋益贵任贵方朱既明
- 关键词：乙肝疫苗抗体反应母婴传播
- 痘苗病毒天坛株非必需区与病毒生物学性状的关系被引量：3
- 1992年
- 将位于痘苗病毒启动子p25下游的lαc基因插入到5个非必需区中,用X-gal筛选获得表达β-半乳糖苷酶的相应重组病毒。Southern印迹杂交证实,lαc基因准确地插入到相应的非必需区中。5株重组病毒与天坛野毒株的生物学性状比较表明,M片段SphⅠ位点插入lαc基因对重组病毒在兔子皮内毒力和小鼠脑内毒力没有明显影响,重组病毒的宿主范围和温度稳定性与亲本株相似,lαc基因能够稳定遗传和表达;K片段左起第一个BglⅡ位点插入lαc基因后,病毒在兔子皮内和小鼠脑内毒力均下降1～2个对数,但宿主范围和温度稳定性没有改变,lαc基因能稳定遗传并表达;K片段左起第三、四个BglⅡ及K/F交界处的HindⅡ位点插入lαc基因对病毒毒力亦无明显影响。这些结果说明M片段sphⅠ位点、K片段左起第三、四个BglⅡ位点及K/F交界处HindⅢ位点适合于外源基因表达和基因工程疫苗研究。
- 徐水蝉阮力朱既明
- 关键词：痘苗病毒生物学性状
- 加强流行性出血热的防治和科研工作
- 1986年
- 八十年代以来,随着病原学的突破,我国流行性出血热的研究进入了一个崭新的阶段。几年来,在本病的临床和流行病学特点、病毒形态与性状、宿主种类、传播途径、疫源地监测、实验诊断等方面都做了大量工作。
- 朱既明
- 关键词：病毒形态家鼠型特异性治疗灭鼠工作疫苗研究
- 表达HSV－2 gD基因的重组痘苗病毒保护小鼠对抗致死量HSV病霉攻击被引量：4
- 1995年
- 利用ＰＣＲ方法对单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白Ｄ（ＨＳＶ－２ｇＤ）基因进行了修饰，在其５＇端删去约５００ｂｐ的非编码区，仅保留ＡＴＧ上游７个ｂｐ。将修饰后的ＨＳＶ－２ｇＤ基因插入到带有痘苗病毒天坛株ＴＫ基因区段的痘苗表达质粒ｐＪＳＡ１１７５，置于痘苗病毒Ｐ７．５ｋ早／晚期启动子控制下。将此重组质粒用脂质体Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ方法转染已受野型ＴＫ￣＋痘苗病毒天坛株感染的ＴＫ￣－１４３细胞，通过同源重组机制和标志基因ＬａｃＺ产物的蓝斑显色作用，以及ＢｕｄＲ试剂对ＴＫ表型的选择压力，筛选出整合有ＨＳＶ－２ｇＤ基因的重组痘苗病毒。Ｓｏｕｔｈｅｍ杂交表明，ＨＳＶ－２ｇＤ基因已正确地插入痘苗病毒ＴＫ基因区内；间接免疫荧光检测显示，ＨＳＶ－２ｇＤ蛋白已得到有效表达，且主要分布于细胞膜。重组病毒免疫家兔可产生明显的抗ＨＳＶ－２ｇＤ中和抗体。用重组病毒免疫小鼠，３周后可使９４％（１７／１８）的小鼠对抗ＨＳＶ－２的致死量攻击，表明重组病毒具有明显的免疫保护作用。
- 容敏清阎辉阮力侯云德何南祥朱既明
- 关键词：痘苗病毒载体
- 麻疹病毒L4株血凝素基因
- 麻疹病毒L4株比Edmonston株具有更高的血凝素活性,本发明从麻疹病毒L4株克隆了血凝素HA基因,发现该基因的DNA序列在第1080、1474、1655及1799位的四个碱基与文献报道的Edmonston株不同,并导...
- 阮力朱既明杨克俭徐水婵朱诚
- 文献传递
- 基因工程乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)连续纯化流程的建立被引量：14
- 1990年
- 研究了高效表达HBsAg的CHO-B43细胞系经转瓶培养所获液体的纯化流程,具体步骤是:细胞培养液经7 500r/min 4℃离心30分钟,除去脱落细胞及碎片,加固体硫酸铵达50％饱和度进行沉淀,离心后弃上清,再用45％的饱和硫酸铵重新悬浮,离心,保留沉淀物;正压超滤透析后,分别选用1.24g/cm^3和1.20g/cm^3的KBr浮力密度,相继进行两次32 000r/min 17℃ 46小时的平衡密度超速离心,收集HBsAg活性部分,过Sepharose 4B分子筛层析柱,再收集HBsAg活性峰,进行最后一次1.22g/cm^2 CsC1平衡密度梯度超速离心。由此流程HBsAg最终回收率为50％～65％,所获纯品纯度达95％以上,经电镜检查,牛血清残余量(<8.430ng/Dose)和细胞DNA残余量(<32pg/Dose),均符合WHO规定的基因工程HBsAg人体接种的标准。
- 梅雅芳任贵方朱既明
- 关键词：基因工程HBSAG纯化
- Epstein-Barr病毒基因工程活疫苗人体免疫的初步研究
- 1991年
- Epstein-Barr(EB)病毒的原发感染发生在儿童时期,在我国3～5岁儿童的感染率为70％～90％。感染后终生带毒,并经唾液不断排出病毒。我国南方是鼻咽癌高发区,其发病率和死亡率均占恶性肿瘤的第一位。早期诊断方法的改进和早期治疗,使鼻咽癌治疗后的5年生存率明显增加,但不能降低发病率。EB病毒疫苗有可能成为控制该病的有效手段之一。 Epstein等人从淋巴母细胞株(B95-8细胞)细胞表面提取EB病毒膜抗原(MA),用于免疫棉顶猴能产生中和抗体。免疫动物能抵抗EB病毒攻击后所诱发的恶性淋巴瘤。该中和抗体在体外能中和EB病毒的转化活性。EB病毒的主要膜抗原(MA)
- 谷淑燕黄天民苗懿红赵玉和韩春卉肖瑶阮力朱既明H.Wolf
- 关键词：E-B病毒基因工程疫苗痘苗病毒
- 流感病毒变异规律的一些新发现及其在流感监测和生态学研究中的应用被引量：2
- 1990年
- 通过近10年的研究,在流感病毒生态学研究方面取得了一些重要的研究成果。填补了我国在这方面的空白。在国际上首先从猪中分离到丙型流感病毒,并通过基因分析,证实了丙型流感病毒在猪群中也能发生抗原性漂移甚至基因重组;并证实在猪群中有乙型流感病毒抗体的存在且至今猪群中仍含有甲2型（H2N2）流感病毒抗体。在国内,首次从猪中分离到人甲1型（H1N1）流感病毒。
- 郭元吉王敏王平朱既明
- 关键词：流感病毒乙型流感病毒抗体流行株
- 转化细胞分泌的乙型肝炎病毒e抗原的理化和免疫学性质
- 1990年
- 研究了由含乙型肝炎病毒C基因与前-C基因的重组质粒,转化小鼠L细胞所分泌的乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)的性质。此种HBeAg有与牛血清蛋白非特异性结合的性质,在牛血清培养基中可能是与α和β球蛋白结合。结合的HBeAg,分子量约60～80KD,在50硫酸铵中可完全析出.经SDS-PAGE解离后,Western blot证明,牛血清培养基中的HBeAg的分子量为28KD、24KD、22KD和19KD4种。无血清培养基中的HBeAg以聚合体形式存在,在66.6％硫酸铵中方可完全析出。经SDS-PAGE解离后,Western blot证明,HBeAg的分子量为56KD和28KD。28KD分子量与由DNA序列推算的前-C和C基因编码的理论值一致。单克隆抗体检测证明,转化细胞分泌的HBeAg具有HBeAg/a和HBeAg/b抗原决定簇。在免疫扩散试验中,转化细胞分泌的HBeAg与人血清抗-HBe形成一条沉淀线,与人血清HBeAg近抗体侧的沉淀线端端相连,但与标准血清EK-3(抗-HBel和抗-HBe2)和EK-1(抗-HBe2和R-HBe3)在EIA试验中均呈阳性反应。
- 景新朱既明
- 关键词：乙型肝炎病毒
- 痘苗病毒天坛株非必需区TA25R…TA36L的两步重组表达载体的构建被引量：1
- 1998年
- 针对痘苗病毒天坛株非必需区ＴＡ２５Ｒ－ＴＡ３６Ｌ，构建了可去除ＴＡ２６Ｒ至ＴＡ３５Ｌ的１０个ＯＲＦｓ，并同时表达ＬａｃＺ基因的两步重组表达载体ｐＡ２４２７ＬａｃＺ。通过两种方法（一步重组和两步重组）获得了在该区域表达ＬａｃＺ基因的重组痘苗病毒ＲＶＡ２４２７ＬａｃＺ。实验表明，一步重组法获得重组病毒的机率大约为１‰，两步重组法的机率可达６２．５‰。由此可见，两步重组法可显著提高重组病毒的筛选机率。ＬａｃＺ基因可以在该区域中稳定表达，重组病毒与野毒株在繁殖能力上没有明显差别，表明ＴＡ２５Ｒ－ＴＡ３６Ｌ是较稳定的外源基因插入区域。上述结果对于深入研究该非必需区的功能特点。
- 邹艳阮力娄元梅朱诚陆柔剑孙朝晖朱既明
- 关键词：痘苗病毒
