杜润慈
- 作品数:10 被引量:22H指数:4
- 供职机构:新疆农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划新疆维吾尔自治区重大科技专项新疆维吾尔自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学轻工技术与工程生物学更多>>
- 新疆伊犁地区部分马病血清学调查被引量:9
- 2016年
- 为了解新疆伊犁地区马群马流感病毒(equine influenza virus)、马疱疹病毒(equine herpesviruses)以及马沙门菌(Salmonellosis equinum)、马链球菌(Streptococcus equi)的感染情况,采用酶联免疫吸附试验及血凝抑制试验对采自新疆伊犁地区7个马场的277份马血清进行抗体水平检测。结果显示:4种病原中,沙门菌血清抗体阳性率最高26.71%(74/277),马疱疹病毒最低15.16%(42/277);各马场之间马流感病毒、马疱疹病毒,以及沙门菌、马链球菌抗体阳性率差异性极显著(P<0.01);不同马场之间马沙门菌和马链球菌双抗体阳性率差异性极显著(P<0.01);不同马场之间马鼻肺炎和马流感双抗体阳性率差异性极显著(P<0.01)。结果表明:新疆伊犁部分马群存在不同程度的马流感病毒、马疱疹病毒、马沙门菌以及马链球菌的感染。此次调查数据可为新疆地区部分马病的防控工作及马产业的健康发展提供参考。
- 沙燕苏战强杜润慈冉多良
- 关键词:马流感病毒沙门菌
- 新疆褐牛CD46基因的原核表达及其多克隆抗体的制备
- 2017年
- 旨在克隆并表达新疆褐牛CD46基因,制备其多克隆抗体,为进一步研究牛CD46分子生物学功能奠定基础。采用RT-PCR方法从新疆褐牛脾脏中扩增CD46基因全长,进行测序,并对测序结果进行生物信息学分析,将CD46部分序列亚克隆于pET-28a(+)和pVAX1载体中。将阳性重组质粒pET-28a-△CD46转化于E.coli Rosetta-gamiB(DE3)感受态细胞,诱导表达截短CD46蛋白。用切胶纯化的His-△CD46融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体;采用ELISA测定多克隆抗体的效价;取无内毒素重组质粒pVAX1-△CD46转入BHK-21(仓鼠肾细胞)细胞,表达产物以制备的多克隆抗体为一抗,采用Western blot法检测该多克隆抗体的特异性。CD46基因的测序结果表明,部分基因蛋白表达、纯化条带大小与预期一致;制备的抗牛CD46多克隆抗体效价高于1∶128 000,并具有良好的特异性。
- 木哈买提江.铁格斯张慧敏杜润慈加尔肯苏战强冉多良刘建华
- 关键词:新疆褐牛CD46融合蛋白多克隆抗体
- 马疱疹病毒1型gD基因的真核表达及其蛋白质与重组质粒联合免疫小鼠效果分析
- 2015年
- 为研究马疱疹病毒1型gD基因重组质粒与原核表达蛋白联合免疫效果,构建了真核表达载体pVAX1-gD,将其转染至BHK-21细胞,经Western blot证实该基因可在BHK-21细胞中表达。将构建的gD基因重组质粒与纯化后的gD蛋白质免疫小鼠,ELISA检测免疫小鼠血清抗体效价,用MTT检测小鼠二免后的淋巴细胞增殖情况。结果表明,与对照组相比该联合免疫能有效的诱导免疫小鼠特异性抗体的产生,同时显著促进了特异性淋巴细胞的增殖。
- 陈卓杜润慈宋焕堂刘建华冉多良
- 关键词:GD基因真核表达重组质粒联合免疫
- 一株新疆野鸭源新城疫病毒F基因的克隆及序列分析
- 张慧敏木哈买提江·铁格斯加尔肯苏占强杜润慈冉多良姚刚刘建华
- 新疆褐牛CD46基因的克隆、原核表达及抗血清制备
- 木哈买提江·铁格斯张慧敏杜润慈加尔肯苏战强李春燕冉多良刘建华
- TLRs介导的信号通路在马链球菌感染RAW264.7细胞中的作用被引量:6
- 2016年
- 为探究Toll样受体(TLRs)介导的信号通路在马链球菌马亚种(S.equi)感染小鼠巨噬细胞RAW264.7中的作用,收集S.equi感染后不同时间点的RAW264.7细胞,提取总RNA并反转录成cDNA,利用实时荧光定量PCR技术检测细胞Toll样受体1、2、6(TLR1、TLR2、TLR6)、接头蛋白骨髓分化蛋白88(MyD88)及细胞因子IL-1、IL-6、IL-10、IL-12、TNF-αmRNA的表达情况。结果显示,S.equi感染RAW264.7细胞后6h时,TLR1、TLR2、TLR6与MyD88mRNA水平均较对照组没有显著差异(P>0.05);感染后12h时,TLR1、TLR2和TLR6mRNA表达量未出现明显上升(P>0.05),而MyD88mRNA水平极显著升高(P<0.01);感染后24h时,TLR1、TLR2和TLR6mRNA表达水平出现极显著升高(P<0.01),MyD88 mRNA表达没有显著变化(P>0.05),且IL-10和IL-12mRNA水平与对照组相比极显著升高(P<0.01),IL-1、IL-6和TNF-αmRNA水平均极显著下降(P<0.01)。结果表明,TLRs介导的信号通路参与S.equi感染RAW264.7细胞的免疫应答反应。
- 杜润慈刘建华史茜付强冉多良
- 关键词:RAW264.7细胞TOLL样受体
- 马疱疹病毒抗体间接ELISA检测方法的建立被引量:9
- 2016年
- 为建立一种检测马疱疹病毒抗体间接ELISA方法,采用纯化后的马疱疹病毒1型和马疱疹病毒4型g D蛋白作为抗原,经方阵滴定法优化ELISA反应条件,并对该方法进行特异性和重复性试验。结果显示,使用此方法检测其他马常见病毒病阳性血清均为阴性;组内、组间变异系数均小于10%。采用建立的方法与国外商品化的马疱疹病毒诊断试剂盒对送检的300份马血清进行检测比较,两者符合率为95%。结果表明,本次试验建立的间接ELISA方法可以用来检测马疱疹病毒抗体,为马鼻肺炎的防控工作提供技术支撑。
- 宋焕堂孙建华杜润慈刘建华冉多良
- 关键词:马鼻肺炎间接ELISA
- 马链球菌对树突状细胞Toll样受体和MyD88及细胞因子mRNA表达的影响被引量:1
- 2016年
- 为探究马链球菌马亚种(Streptococcus equi subsp.equi,S.equi)对小鼠骨髓源树突状细胞(bone marrow derived dendritic cells,BMDCs)TLR1、TLR2、TLR6、MyD88、IL-1、IL-6、IL-10、IL-12、TNF-αmRNA表达的影响,用GM-CSF、IL-4细胞因子刺激小鼠骨髓细胞使其诱导分化成未成熟的BMDCs,感染S.equi后16、20、26h,采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测感染组及未感染组细胞TLRs、MyD88和细胞因子mRNA的表达情况。结果显示,S.equi感染BMDCs后16、20、26h,TLR1、TLR2、TLR6、MyD88mRNA的表达量均显著或极显著的高于未感染组(P<0.05或P<0.01)。S.equi感染DCs后16、26h,IL-1的分泌量较未感染组没有变化(P>0.05),IL-10、TNF-α的分泌量显著或极显著增加(P<0.05或P<0.01)。IL-6在S.equi感染DCs后16h的分泌量显著增加(P<0.05),但感染后26h无显著变化(P>0.05)。IL-12在S.equi感染DCs后16h的表达没有变化(P>0.05),但感染后26h分泌量有所增加(P<0.05)。说明S.equi具有调节DCs TLRs、MyD88和细胞因子表达的能力,从而介导机体的免疫应答反应。
- 杜润慈冉多良李静付强刘建华
- 关键词:树突状细胞TOLL样受体细胞因子
- 猕猴上皮鳞状细胞癌的诊断被引量:1
- 2013年
- 鳞状细胞癌简称鳞癌,是发生在皮肤、附属器或黏膜上的恶性肿瘤,主要从有鳞状上皮覆盖的皮肤开始。2010年,四川某猴场发现1只猕猴患病,臀部皮肤局部增生形成疣性和菜花状的赘生物,蹲坐受磨擦后局部破溃出血。患猴进行性消瘦,面色苍白。笔者怀疑该猴患皮肤癌,活体局部采取皮肤增生物,用病理学方法诊断为上皮鳞癌,现将诊断过程报道如下。
- 杜润慈彭西
- 关键词:鳞状细胞癌猕猴上皮皮肤癌进行性病理学
- 新疆伊犁部分地区马鼻肺炎血清学调查被引量:6
- 2016年
- 为了解新疆伊犁部分地区马鼻肺炎的流行情况,应用间接ELISA法对采自新疆伊犁尼勒克县、新源县的907份马血清进行抗体检测。结果表明:尼勒克县422份马血清中有136份为阳性,新源县485份马血清中有155份为阳性,两个县马鼻肺炎阳性率均为32%;各年龄段马匹都可发病,且阳性率均在30%~40%之间,差异不显著(P〉0.05)。说明新疆伊犁部分地区马鼻肺炎流行。
- 杜润慈刘建华李静冉多良
- 关键词:血清学调查间接ELISA