谢龙
- 作品数：26 被引量：21H指数：2
- 供职机构：广西大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生一般工业技术更多>>
- 含O-乙酰基-L-肉碱盐酸盐的水牛卵母细胞体外成熟液及培养方法
- 本发明公开了一种含O-乙酰基-L-肉碱盐酸盐的水牛卵母细胞体外成熟液。据此，发明人还建立的相应的培养方法。试验表明，将O-乙酰基-L-肉碱盐酸盐应用于水牛卵母细胞体外成熟，相比没有添加O-乙酰基-L-肉碱盐酸盐的水牛卵子...
- 许惠艳卢克焕陆阳清卢晟盛杨小淦谢龙
- 文献传递
- 25-羟基胆甾醇对鸡原始生殖细胞增殖的影响
- 2016年
- 本研究为了优化现有的鸡PGCs(原始生殖细胞)的培养系统,为今后研究生殖细胞发育与生产转基因鸡奠定良好基础。分别用含0μmol/L(对照组)、0.1μmol/L、0.5μmol/L、1.0μmol/L 25-羟基胆甾醇的培养液培养鸡PGCs,5 d后细胞计数检测其细胞增殖情况。与对照组(不添加25-羟基胆甾醇的鸡PGCs培养液)相比,0.1μmol/L处理组细胞数目没有显著差异,0.5μmol/L和1μmol/L处理组细胞数目均显著增加。对1.0μmol/L 25-羟基胆甾醇处理的鸡PGCs用RT-PCR、细胞免疫染色、细胞注射迁移的方法检测处理后的生物学特性,发现处理后的鸡PGCs仍然保持正常的生殖细胞生物学特性。本研究表明25-羟基胆甾醇能有效的促进鸡P GCs的增殖,且不改变鸡PGCs的生物学特性。
- 陈东阳魏巍杨蒙蒙陆振萍陈美娟张文馨谢龙杨小淦许惠艳卢晟盛张明卢克焕陆阳清
- 关键词：原始生殖细胞细胞增殖
- 一种利用鸡卵清蛋白基因进行外源蛋白大量生产的方法
- 本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种利用鸡卵清蛋白基因进行外源蛋白大量生产的方法，通过对鸡内源性的卵清蛋白基因进行基因编辑，将外源基因通过任何具有链接效应的氨基酸片段的方式连接起来，使外源蛋白在鸡输卵管中与卵清蛋白一起...
- 陆阳清谢龙黄振文兰美玉
- 水牛GDNF基因真核载体的构建及其在真核细胞中的表达
- 引言/目的胶质细胞源性神经营养因子(glialcellline-derived neurotrophic factor,GDNF)是1993年Lin等从小鼠脑组织中克隆的一种神经营养因子,具有多种生理功能,其对神经系统、...
- 谢龙耿双双李婷婷罗奥林李孟琪杨欢杨小淦许惠艳陆阳清卢晟盛卢克焕
- 胆固醇通过Sonic Hedgehog信号通路促进鸡原始生殖细胞增殖
- 引言/目的原始生殖细胞(Primordial Germ Cells)作为精子和卵子的祖细胞,是遗传信息从上一代传递到下一代的重要载体。家禽原始生殖细胞在从早期胚胎分离的过程中,数量少,难以在体外增殖,其中涉及的细胞信号调...
- 陈东阳谢龙杨蒙蒙陆振萍许惠艳杨小淦张明卢盛晟卢克焕陆阳清
- 受体胚龄对鸡原始生殖细胞移植后归巢的影响被引量：2
- 2016年
- 【目的】探究受体胚龄对鸡原始生殖细胞(Primordial germ cell,PGC)移植后归巢的影响,确定最佳回注时间窗口,为提高转基因鸡的生产效率提供参考依据。【方法】从广西黄羽鸡胚分离获得PGC,体外培养并进行转基因操作后,移植回注到不同胚龄的受体鸡胚中,移植5 d后分离性腺拍照观察,对比受体鸡胚孵育至14HH^17HH时对PGC迁移归巢到性腺的影响。【结果】分别在14HH^17HH胚龄时移植回注PGC,移植5 d后的鸡胚死亡率为30.0%~60.9%,但不同移植胚龄间的差异不显著(P>0.05)。根据鸡胚性腺中的GFP阳性细胞数可划分为6个等级(I^VI),且随着移植胚龄的增加,PGC迁移效率呈下降趋势。14HH胚龄移植的鸡胚性腺GFP阳性细胞集中在V级(40.0%),15HH胚龄移植的集中在III级(42.1%),16HH和17HH胚龄移植的则集中在II级(45.4%和54.5%),GFP阳性细胞含量最高等级(VI级)仅出现在14HH胚龄移植的鸡胚性腺中。【结论】随着受体胚龄的增加,PGC迁移效率呈下降趋势,但鉴于实际操作的难易程度,确定PGC移植回注的最佳时间窗口为14HH鸡胚(孵育50 h)。
- 陈美娟陈东阳谢龙陆振萍杨蒙蒙莫丽芬卢克焕陆阳清
- 关键词：原始生殖细胞转基因
- DAZL在鸡原始生殖细胞中基因功能及调控网络的研究
- 原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGCs)是一种同时具备多能性与生殖特性的生殖干细胞,是配子的前体细胞,具有传递遗传信息的能力,在转基因鸡的生产策略中具有良好的应用前景。DAZL(Deleted...
- 谢龙
- 关键词：DAZL基因功能
- 水牛精原干细胞研究进展被引量：2
- 2015年
- 精原干细胞(SSCs)是一类能够不断地进行自我更新和分化,并能保证遗传物质在亲子代之间有效传递的成体干细胞。伴随着各种移植技术、细胞体外培养及冻存等技术的发展,精原干细胞的应用成为可能,其在生产转基因动物及保护珍稀物种等方面有着广阔的应用前景。本文对水牛SSCs的生成、分离、纯化、培养、鉴定以及冻存的研究进行了系统的阐述。
- 李婷婷谢龙李孟琪李孟琪杨小淦杨欢卢晟盛杨小淦
- 关键词：水牛精原干细胞
- 基于AMEL基因位点差异的水牛性别PCR鉴别方法被引量：2
- 2015年
- 【目的】建立检测不同性别水牛染色体AMEL基因位点差异的PCR鉴别方法,为水牛早期胚胎性别鉴定及水牛分离精子重分析提供简便可靠的检验手段。【方法】采用PCR扩增不同性别水牛染色体中的AMEL基因,Clone Manager 9.0软件分析序列差异,BLASTn程序分析基因同源性,MEGA 6.06软件构建系统发育进化树。【结果】以水牛血液基因组DNA为模板、amel B1为引物,引物退火温度60℃,公水牛可扩增出两条清晰条带,长度分别为376（AMEL-X基因）和304 bp（AMEL-Y基因）;母水牛仅扩增出1条清晰条带,长度为376 bp（AMEL-X基因）。与AMEL-X基因相比,水牛AMEL-Y基因缺失155-226区域的72 bp,同时存在20个基因型多态位点。临床检测结果证实,基于AMEL基因的PCR鉴别结果与实际性别的吻合率达100%,amel B1引物的灵敏度为0.5 ng模板量。BLASTn比对分析结果显示,水牛AMEL-X和AMEL-Y基因与不同哺乳动物的对应序列存在高度保守性,其相似性均接近或高于90%,与牛存在最近的亲缘关系。【结论】AMEL基因在哺乳动物中高度保守,且在不同性别水牛中呈多态性特征,以其作为分子靶标建立的水牛性别PCR鉴定方法切实可行,为水牛早期胚胎性别鉴定及水牛分离精子重分析提供了一个更便捷、高效的检验手段。
- 李婷婷左二伟李孟琪谢龙杨欢卢晟盛陆阳清许惠艳李永国陆之泽杨小淦卢克焕
- 关键词：水牛PCR性别鉴定
- 水牛精原干细胞电转染条件的优化被引量：1
- 2021年
- 本研究采用电转染法将pmaxGFP-gcc质粒通过Lonza电转仪转染入体外培养的水牛精原干细胞。通过将7组电脉冲程序的转染结果进行对比,得出水牛精原干细胞存活率与转染率最高的组别,并确定对应的最佳的电转染程序为EH100,48 h后,流式细胞仪筛选获得此电转染程序下有19.1%的GFP;细胞且转染细胞存活率达到74.2%。本电转染实验操作简便,转染效率高,可重复性好。本实验中的电转染的方法可以用于普通方法难以转染的干细胞,为其他物种的精原干细胞转基因研究提供研究基础和参考。
- 杨欢杨欢李婷婷谢龙杨小淦谢龙杨小淦陆阳清梁兴伟
- 关键词：电转染转染效率
