郑上游
- 作品数：8 被引量：15H指数：2
- 供职机构：中山大学孙逸仙纪念医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胰腺癌患者肝细胞核因子1α的表达及临床意义
- 2016年
- 目的研究胰腺癌患者胰腺组织中肝细胞核因子1α(HNF1α)的表达变化及意义,并探讨其临床诊断价值。方法选取本院2011年10月-2014年12月27对胰腺导管细胞癌组织及其正常癌旁组织,采用实时荧光定量PCR法、链亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)免疫组织化学染色及蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测HNF1α的表达情况;应用受试者曲线(ROC)分析HNF1αmRNA对胰腺癌的诊断价值。结果与对照组相比,胰腺癌组织HNF1α蛋白和mRNA的表达均明显降低(P<0.01);HNF1αmRNA诊断胰腺癌的ROC曲线下面积(AUC)为0.89,敏感度和特异度分别为91.30%和75.00%。结论胰腺癌患者肿瘤组织中HNF1α表达的显著下调可能参与了肿瘤的发生、发展过程,其有可能成为胰腺癌诊断和治疗的新靶点。
- 罗招凡高文超谢晓英林向华郑上游
- 关键词：胰腺癌实时荧光定量PCR
- 敲低肝细胞核因子1α基因对胰腺癌BxPC-3细胞增殖及迁移的影响
- 2018年
- 目的研究敲低肝细胞核因子(HNF1α)基因对胰腺癌BxPC-3细胞增殖及迁移的影响。方法在胰腺癌BxPC-3细胞中利用siRNA技术抑制HNF1α表达。Real-time RT-PCR及Western blot法检测HNF1a mRNA及蛋白表达;采用CellTiter-GLo发光法和流式细胞术检测细胞生长及凋亡,transwell法检测细胞迁移。结果与阴性对照组相比,HNF1a-siRNA转染后BxPC-3细胞HNF1αmRNA和蛋白表达明显下调(P <0.05),在12、24、48、72 h BxPC-3细胞增殖活力明显升高(P <0.05),72 h细胞凋亡率减低(48.37%vs. 2.19%,P <0.05),细胞迁移能力增加(P <0.05)。结论 HNF1a表达下调可显著促进胰腺癌BxPC3细胞生长及迁移,抑制凋亡,表明HNF1α基因在胰腺癌中可能是一个抑癌基因。
- 罗招凡郑上游赵书琴
- 关键词：胰腺癌迁移
- 丙型肝炎病毒核心蛋白通过活化stat3通路促进肝癌细胞上皮间质转化的研究被引量：2
- 2015年
- 目的探讨丙型肝炎病毒核心蛋白(HCVc)对肝癌细胞信号转导子和转录激活子3(stat3)通路及上皮间质转化(EMT)的影响。方法将含HCVc基因序列的重组质粒p EGFP-N3-HCVc转染人肝癌细胞Hep G2,Real-Time PCR和Western blotting检测HCVc、总stat3、磷酸化stat3(p-stat3)及EMT指标蛋白E-cadherin、Vimentin、Snail的表达,划痕实验及Transwell实验检测细胞迁移和侵袭情况。结果划痕实验及Transwell实验结果显示,过表达HCVc可增强Hep G2细胞的迁移和侵袭能力;stat3通路抑制剂AG490处理可抑制Hep G2细胞的侵袭能力。RT-PCR和Western blotting结果显示,过表达HCVc后,Hep G2细胞中p-stat3、Vimentin及Snail在表达升高,E-cadherin表达下降;AG490处理可下调p-stat3、Vimentin及Snail表达,增强E-cadherin表达。结论 HCVc可活化stat3通路促进肝癌细胞上皮间质转化,增强肝癌细胞的迁移和侵袭能力。
- 周嘉嘉陈汝福邓小耿高文超郑上游程帝周泉波张杰
- 关键词：病毒核心蛋白质类肝炎丙型STAT3上皮间质转化
- 肝细胞核因子1A对人胰腺癌PANC1细胞的吉西他滨联合白蛋白紫杉醇耐药性的影响被引量：1
- 2019年
- 目的探讨肝细胞核因子1A (HNF1A)对人胰腺癌PANC1细胞株吉西他滨联合白蛋白紫杉醇耐药性的影响及其作用机制。方法选取2012年3月至2017年5月间中山大学孙逸仙纪念医院胆胰外科78例行手术切除后接受吉西他滨联合白蛋白紫杉醇化疗方案的局部晚期或远处转移的胰腺癌患者,采用qPCR法检测胰腺癌组织HNF1A表达水平,根据HNF1A表达水平的中位数将患者分为高表达组(39例)和低表达组(39例),分析HNF1A表达与肿瘤临床病理参数及患者生存期的相关性;采用qPCR法检测3株敏感胰腺癌细胞株(BxPC-3、CFPAC-1和L3.6pl)和4株耐药胰腺癌细胞株(PANC1、MIA PaCa-2、Hs766T和Mpanc96)HFN1A mRNA表达水平。以携带插入HNF1AcDNA质粒的慢病毒感染方法构建过表达HNF1A的PANC1 (HNF1A组),以携带空质粒的慢病毒感染的PANC1为对照组,采用qPCR和蛋白质印迹法分别检测两组PANC1细胞HNF1A和ATP结合盒转运蛋白家族中的ABCC1 mRNA及蛋白表达;采用MTT法检测两组细胞对吉西他滨和白蛋白紫杉醇的半抑制浓度(IC50);采用流式细胞术检测两组细胞凋亡率。结果HNF1A高表达组患者平均生存期显著长于低表达组(17.9个月比12.4个月),差异有统计学意义(P<0.001);胰腺癌组织HNF1A低表达与TNM分期晚、有神经浸润、患者生存期短相关。耐药的PANC1细胞HNF1A mRNA表达水平较敏感的BxPC-3细胞下调6.73倍,差异具有统计学意义(P<0.001)。HNF1A组的ABCC1 mRNA和蛋白表达水平较对照组显著下降(0.012±0.004比0.047±0.008、0.281±0.040比0.832±0.046,P=0.003、P<0.001)。HNF1A组PANC1细胞对吉西他滨和白蛋白紫杉醇的IC50较对照组显著下降[(26.31±2.91)μmol/L比(72.63±4.07)μmol/L],细胞凋亡率显著升高[(40.18±1.64)%比(21.31±1.98)%],差异均有统计学意义(P值均<0.01)。结论HNF1A可能通过下调ABCC1表达介导胰腺癌细胞产生吉西他滨和白蛋白紫杉醇耐药性。
- 郑上游胡崇辉陈汝福
- 关键词：胰腺肿瘤化学疗法
- HNF1α基因克隆在不同分化程度胰腺癌细胞系中的表达被引量：2
- 2018年
- 目的克隆人胰腺癌相关易感基因HNF1α,并通过检测三种不同胰腺癌细胞系中HNF1α的表达,筛选出HNF1α低表达的胰腺癌细胞系,为进一步研究提供依据。方法提取Bx PC-3,PANC-1及SW-1990胰腺癌细胞系的总RNA,用RT-PCR方法扩增HNF1α基因,PCR产物及pc DNA3.1(+)经Eco R I/Xho I双酶切后,用T4 DNA连接酶连接,连接产物转化细菌后挑选克隆,进行测序鉴定。通过Real-time PCR及Western blot方法比较HNF1αm RNA及蛋白在不同胰腺癌细胞系中的表达量。结果克隆得到了1 914 bp的HNF1α基因c DNA序列,与已发表的HNF1α同源性为99%。Bx PC-3,PANC-1及SW-1990细胞HNF1αm RNA相对表达量分别为(6.52±1.11),(3.09±0.54)及1,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot法检测HNF1α蛋白表达水平显示,在SW-1990细胞中HNF1α蛋白有少量表达,而在PANC-1,Bx PC-3细胞系中HNF1α蛋白表达依次增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HNF1α表达水平与胰腺癌细胞分化程度呈明显正相关,HNF1αm RNA及蛋白在SW-1990细胞系中均呈低表达,因此该细胞系可作为良好的研究工具,为进一步将HNF1α转染该细胞系,以研究HNF1α对胰腺癌的抑癌作用提供依据。
- 罗招凡郑上游赵书琴温玉苑
- 关键词：胰腺癌重组质粒
- 胰腺癌相关糖尿病致病基因表达谱的分析
- 2015年
- 目的探讨胰腺癌相关糖尿病（PCA—DM）致病基因的表达谱，为PCA—DM发病机制的研究提供新线索。方法对前期获得的4例PCA—DM患者、4例无糖尿病胰腺癌（PC）患者和4例慢性胰腺炎（CP）患者胰腺组织基因芯片分析结果进一步进行盒图、火山图、热图分析；基因相互作用网络分析；染色体定位分析；Geneontology（GO）分析，并采用实时PCR对差异表达基因进行验证。结果芯片检测质量可靠。PCA-DM与无糖尿病Pc差异表达基因共2778个，其中表达倍数差异〉10的有123个基因；无糖尿病Pc与cP差异表达基因共7475个，其中表达倍数差异〉10的有730个。PCA—DM与无糖尿病PC差异表达基因的数量及差异倍数明显少于无糖尿病PC与CP的差异表达基因。PCA—DM和无糖尿病Pc的差异表达基因大多分布于PC与CP差异表达基因的染色体位点上。GO分析显示，与药物代谢、色素沉着、GTPase活性有关的条目上调，而与蛋白代谢、核酸代谢有关的条目下调。在PCA—DM相关基因网络中，HSPA1A、CSNK1A1、EIF4A2、MYCBP2、PRKRA、NGFR等40个基因参与PCA-DM发生。TFF1、MSMB、NOX1等13个基因对PCA—DM具有潜在诊断价值。结论建立了PCA—DM致病基因表达谱，发现了潜在的致病基因及具有潜在诊断价值的基因。
- 林青李志花郑上游周泉波谭浪平李国林宋亚东赵晓慧高文超陈汝福
- 关键词：胰腺肿瘤糖尿病基因表达谱芯片分析技术
- 程序化流程腹腔镜胰十二指肠切除术的初步探讨被引量：9
- 2018年
- 目的评价程序化流程设计进行腹腔镜胰十二指肠切除术(laparoscopic pancreaticoduodenectomy,LPD)的安全性和有效性。方法选取2016年1月至2017年12月期间在中山大学孙逸仙纪念医院接受LPD且所有临床资料均完整的100例患者的病例资料,包括按照程序化流程进行手术的试验组50例、非程序化流程进行手术的对照组50例,分析两组患者围手术期的各项指标。结果试验组与对照组患者的术前资料对比,无明显差异(P>0.05)。相对于对照组,试验组手术时间明显缩短[(256.4±50.64)min vs(298.5±87.23)min]、出血量明显减少[(84.5±32.82)ml vs(218.9±88.73)ml](P<0.05);术后并发生症发生率、术后住院时间等比较,未见明显统计学差异(P>0.05)。结论经过精准的手术前评估,程序化流程LPD技术可行,并能明显缩短手术时间,近期治疗效果良好。
- 李国林林青郑上游周泉波陈汝福
- 关键词：腹腔镜手术胰十二指肠切除术
- 肿瘤相关巨噬细胞和 KIT 评估胰腺神经内分泌肿瘤肝转移及预后的价值被引量：1
- 2016年
- 目的：探讨肿瘤相关巨噬细胞（ TAMs）结合3型酪氨酸激酶受体（ KIT）对胰腺神经内分泌肿瘤（ PNETs）肝转移风险及预后的评估价值。方法收集1995年1月至2015年5月间中山大学孙逸仙纪念医院行手术治疗并经病理诊断证实的79例PNETs患者资料。采用免疫组化染色法检测肿瘤组织CD68、KIT蛋白表达，分析其与肿瘤临床病理参数的相关性。结果79例PNETs中30例（38．0％）瘤组织CD68高表达，35例（44．3％）瘤组织KIT高表达。 CD68高表达与肿瘤侵犯（P＜0．001）、AJCC7th分期（P＜0．001）、肝转移（P＜0．001）及其发生时间有关（P＝0．019）；CD68低表达患者的生存期显著长于高表达患者，差异有统计学意义（P＝0．0002）。 KIT高表达与WHO 2010及AJCC7th分期（P＜0．001， P＝0．002）、肿瘤无功能性（P＝0．002）、肝转移有关（P＝0．026）；KIT低表达患者的生存期显著长于高表达患者，差异有统计学意义（P＝0．0013）。 CD68、KIT均高表达患者常见于肿瘤侵犯者（P＜0．001），与WHO 2010、AJCC7th分期有关（ P值均＜0．001）；CD68、KIT均高表达患者的生存期显著短于均低表达者，差异有统计学意义（P＝0．0057）。多因素分析显示AJCC7th分期Ⅳ期、CD68高表达是PNETs患者预后的独立危险因素。结论 CD68、KIT高表达与PNETs分级分期、肝转移风险、不良预后相关，CD68是预测PNETs预后的独立危险因素。
- 叶良涛周泉波叶会霖郑上游陈汝福
- 关键词：胰腺神经内分泌肿瘤巨噬细胞预后肿瘤转移
