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高通量测序数据中家蚕环形RNA的筛选与鉴定: 人体细胞的基因表达过程中,环形RNA分子是一种普遍存在的调控RNA分子。2013年《Nature》两篇重要的研究论文揭示出一些环状R N A充当m i c r o R N A分子'海绵',结合并封闭了microRNA,因...; 陈肖周雍厉妍昱郝悦帆盖威朱红琳盛清吕正兵聂作明; 关键词：高通量测序; 文献传递

高通量测序数据中家蚕环形RNA的筛选与鉴定: <正>人体细胞的基因表达过程中,环形RNA分子是一种普遍存在的调控RNA分子。2013年《Nature》两篇重要的研究论文揭示出一些环状RNA充当microRNA分子'海绵',结合并封闭了microRNA,因此成为了mi...; 陈肖周雍厉妍昱郝悦帆盖威朱红琳盛清吕正兵聂作明; 关键词：家蚕; 文献传递

抗菌肽的串联表达和规模化制备: <正>抗菌肽(antimicrobial peptides)是具有抗菌活性短肽的总称,是生物体内经诱导产生的一种具有生物活性的小分子多肽,分子量在2000~7000Da,一般由20~60个氨基酸残基组成。抗菌肽具有热稳定...; 陈勇周雍周国旗沈熠菁盛清吕正兵吴祥甫聂作明; 关键词：抗菌肽大肠杆菌; 文献传递

家蚕AGO2蛋白的单克隆抗体制备被引量：2: 2018年; Argonaute（AGO）蛋白家族在小RNA诱导的基因沉默中发挥重要作用。基于家蚕基因组测序发现的AGO蛋白编码序列,选择Bm AGO2为目标蛋白质,制备该蛋白质的单克隆抗体,为进一步研究其介导的miRNA靶基因以及基因调控网络奠定试验基础。通过分析Bm AGO2蛋白的抗原性分布,筛选出Bm AGO2抗原表位区aAGO2,设计引物扩增目的片段,构建重组表达载体p ColdⅡ-aAGO2原核表达aAGO2蛋白,以纯化后的aAGO2蛋白免疫BALB/c小鼠。剖取免疫小鼠脾脏,将脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0融合。以HAT选择培养基及间接ELISA法筛选阳性克隆,经Western blotting和免疫沉淀检测,获得2株生长状态好、能分泌高效价抗体的单克隆杂交瘤细胞株I5-A9和E1-3。经抗体亚型检测后,选择细胞株I5-A9进行大量培养,菌液注射小鼠腹腔制备的腹水经辛酸-硫酸铵沉淀及Protein A/G亲和层析纯化,获得了纯度较高的Bm AGO2单克隆抗体。利用获得的抗体免疫共沉淀家蚕卵巢培养细胞Bm N以及家蚕5龄幼虫的内源Bm AGO2蛋白,从分离的结合RNA检测到小RNA被显著富集,表明成功制备了可用于免疫共沉淀的Bm AGO2单克隆抗体并分离BmAGO2结合的RNA。; 朱兵曹赟洁周雍盛清聂作明; 关键词：家蚕单克隆抗体免疫共沉淀

家蚕抗菌肽moricin基因的串联表达与切割产物的活性检测被引量：5: 2015年; 家蚕抗菌肽是蚕体内具有免疫功能的碱性多肽,具有抑制病菌生长和杀伤癌变细胞的作用。以家蚕抗菌肽moricin为研究对象,经密码子优化,设计合成了家蚕抗菌肽moricin基因多拷贝的串联体6×moricin基因,并将其克隆到大肠杆菌原核表达载体pET-28a(+),转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,串联表达了融合抗菌肽6×moricin,且表达量较高。进一步通过盐酸羟胺专一性切割串联表达的融合抗菌肽6×moricin,获得相应的抗菌肽单体。体外抑菌试验验证,切割的抗菌肽moricin单体对革兰阴性菌和革兰阳性菌均有较强的抑制效果,且抑菌圈大小随抗菌肽单体浓度增加而增加。采用基因串联表达技术有望解决抗菌肽对宿主大肠杆菌的抑制作用,为利用生物反应器规模化生产家蚕抗菌肽开辟了新的技术途径。; 周雍吴程程斯洪强李丹吕正兵盛清张耀洲聂作明; 关键词：抑菌活性

家蚕5龄幼虫期乙酰化修饰丝胶蛋白对蚕丝性能的影响: 2016年; 乙酰化修饰即在翻译中或翻译后的蛋白质分子链上嫁接乙酰基团,是通过化学修饰改变蛋白质性质的方式之一,丝胶蛋白是高度乙酰化的蛋白质。以丝腺组织大量合成丝蛋白的家蚕5龄第2天幼虫供试,分别将去乙酰化酶抑制剂TSA和乙酰化酶抑制剂C646自幼虫第2腹节注射入体内丝腺,上调和下调丝胶蛋白的乙酰化水平,探究通过乙酰化修饰丝胶蛋白的方法改善蚕丝性能的可行性。收集试验组家蚕的茧丝进行力学性能测试、红外光谱分析、X射线衍射分析、扫描电子显微镜(SEM)观察,结果证实丝胶蛋白的乙酰化修饰并不会改变蚕丝丝素的晶体结构,但具有增强丝胶与丝素表层附着力的作用。研究结果可为蚕丝精练脱胶和染整工艺的改进提供新的理论依据。; 聂作明斯洪强曹赟洁周雍朱红琳吴程程蒋彩英盛清吕正兵于威姚菊明; 关键词：蚕丝蛋白乙酰化修饰丝胶蛋白

抗菌肽的串联表达和规模化制备: 抗菌肽(antimicrobial pep-tides)是具有抗菌活性短肽的总称,是生物体内经诱导产生的一种具有生物活性的小分子多肽,分子量在2000~7000Da,一般由20~60个氨基酸残基组成。抗菌肽具有热稳定、水...; 陈勇周雍周国旗沈熠菁盛清吕正兵吴祥甫聂作明; 关键词：抗菌肽规模化; 文献传递

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周雍