刘思汝
- 作品数：10 被引量：3H指数：1
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- 发文基金：海南省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 新型阳离子核酸载体的细胞转染效率研究被引量：2
- 2014年
- 目的新型阳离子核酸载体LW13-2进行研究,分析其细胞毒性和基因转染效率,探讨其作为核酸载体的可能性。方法使用MTT比色法分析LW13-2与DNA在不同比例下的细胞毒性。选用绿色荧光蛋白表达质粒EGFP为报告基因,以人胚胎肾HEK293细胞为工具细胞,在荧光显微镜下观察计数,计算转染效率。结果当LW13-2与DNA的质量比为(1~3)∶1时,细胞毒性最低。LW13-2与DNA的质量比为3∶1时,转染作用4 h,在无血清培养基中继续培养48 h,得到LW13-2的最大转染效率为87.6%。结论通过与市售成熟转染试剂Lipofectamine 2000的对比,新型阳离子核酸载体在大幅提高基因转染效率的同时并没有增加其细胞毒性,有望成为核酸转移的有效载体,为相关研究及基因的靶向治疗研究提供基础。
- 刘思汝李林鲜吴国球
- 关键词：细胞转染转染效率非病毒载体阳离子脂质体
- 小鼠FGFR1/MIP3a-Fc融合基因真核表达载体的构建及表达被引量：1
- 2017年
- 目的构建小鼠成纤维细胞生长因子受体1/巨噬细胞炎性蛋白3a-Fc融合基因(FGFR1/MIP3a-Fc)的真核表达质粒,并在293T细胞中的表达。方法设计合成FGFR1/MIP3a融合基因引物,用PCR方法扩增获得FGFR1/MIP3a基因片段,用内切酶消化后插入pc DNA3.1(+)/Fc(Mouse Ig G2a)质粒中,构建FGFR1/MIP3a-Fc融合基因表达质粒;经PCR鉴定、酶切鉴定以及测序鉴定后,将该融合基因表达质粒瞬时转染293T细胞,用ELISA法检测其在293T细胞的表达。结果经PCR、酶切鉴定以及测序证实,FGFR1/MIP3a-Fc融合基因表达质粒构建成功;ELISA检测FGFR1/MIP3a-Fc融合基因表达质粒能够在293T细胞中表达。结论 FGFR1/MIP3a-Fc融合基因表达质粒构建成功,该质粒能够在293T细胞中表达。
- 黄用豪和永壮张晓钿方丹丹陈艳刘思汝许仙花郑少江
- 关键词：FC融合蛋白真核表达质粒
- 研究生思想政治教育工作机制探究
- 2020年
- 新时代迫切需要高校创新研究生思想政治教育工作机制。阐述了当前研究生思想政治教育工作面临的现实问题及其原因,并针对存在的问题从受教群体自身及教育主体等方面探讨了施教机制,明确自身认识、加强相互间的沟通,关爱研究生身心健康,创建学生内在动力机制及教育主体间的合力机制,以学生为主体,真正实现人文关怀及立德树人的根本任务。
- 余丽艳邵娜娜刘思汝
- 关键词：思想政治教育心理健康
- 具有体内DC特性的多功能Fc融合蛋白靶向抗肝癌作用研究
- 张晓钿郑少江黄凌黄用豪田树红李红海陈艳刘思汝
- 该研究将具有肿瘤靶向(FGFR1)、抗肿瘤血管生成(FGFR1)、清除免疫抑制作用(PD1)、促进免疫效应(MIP3a)以及增强抗原提呈作用(鼠源抗体Fc段)综合在一起构建核苷酸序列，从而编码得到一种具有特异性抗肿瘤作用...
- 关键词：
- 关键词：肝癌免疫治疗肿瘤治疗
- 加强高校研究生党支部建设的路径探索
- 2022年
- 新时期党和国家对高校研究生党支部建设提出新的要求,做好研究生党建工作对加强研究生思想政治教育和推进高校基层党建工作具有重要意义。然而,目前研究生党建在党支部设置、党员活动方式和导师发挥党建育人作用等方面仍存在较突出问题。结合这些问题,本文从优化支部设置、创新支部活动方式及合力育人等方面进行了针对性的分析,探索提升新时期研究生党支部工作实效性的路径。
- 余丽艳刘思汝
- 关键词：研究生党员党支部建设
- 重组过表达人PD1可溶性胞外域腺相关病毒治疗肝细胞癌的实验研究
- 目的:利用重组腺相关病毒AAV8-PD1行肝细胞癌治疗并初步探讨其作用机制。方法:利用基因工程将PD1细胞外段基因序列插入腺相关病毒中,构建过表达人PD1可溶性胞外域重组腺相关病毒,建立肝癌模型并通过观察肿瘤体积观察其抗...
- 刘思汝
- 关键词：腺相关病毒肝细胞癌免疫治疗
- 文献传递
- 小鼠CTLA4-Fc融合基因真核表达载体的构建及表达
- 2020年
- 目的构建小鼠细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4Fc融合基因(CTLA4-Fc)的真核表达质粒,并检测其在293T细胞中的表达,为后续在小鼠体内研究CTLA4-Fc抗肿瘤作用机制奠定基础。方法Gene Runner软件设计并合成互为搭桥、互为模板的CTLA4融合基因引物,利用重叠PCR方法扩增获得CTLA4基因片段,与pcDNA3.1(+)/Fc(Mouse IgG2a)质粒同时进行双酶切,连接合成CTLA4-Fc融合基因表达质粒;菌落PCR扩增、双酶切以及测序鉴定后,在293T细胞中瞬时转染表达融合基因的质粒,ELISA法检测其在293T细胞内的蛋白表达含量。结果成功构建CTLA4-Fc融合基因。经菌落PCR和双酶切,琼脂糖电泳检测到CTLA4-Fc片段长度为1200 bp,CTLA4片段长度为568 bp DNA。将阳性重组克隆菌落挑于液体LB培养基中扩大培养并将菌液送公司测序,测序结果证实DNA序列与GenBank同源性为100%。通过ELISA方法能够检测到CTLA4-Fc质粒在293T细胞中的表达。结论CTLA4-Fc融合基因正确克隆入pcDNA3.1(+)/Fc(Mouse IgG2a)质粒中,该质粒能够在293T细胞中表达。本研究利用重叠PCR技术扩增获得CTLA4基因序列,能够快速获得目的基因扩增产物,提高了实验的成功率。
- 何志惠刘思汝谢盼盼黄用豪林岷格
- 关键词：细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4FC融合蛋白真核表达质粒
- 新型阳离子核酸载体LW13-2细胞转染效率的初步研究
- 目的: 基因治疗是将外源遗传物质靶向、安全、有效的通过基因导入系统导入到特异的受体细胞或组织器官内来治疗某种疾病，因此，合适的核酸载体是实现基因治疗的关键。近年来，核酸载体成为最具有前景的研究项目之一。本研究针对本实验...
- 刘思汝
- 关键词：阳离子脂质体转染效率
- 一种小鼠MIP3α-endoglin Fc融合蛋白的制备方法及其用途
- 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种小鼠MIP3α‑endoglin Fc融合蛋白的制备方法及其用途，包括：以mMIP3α‑F，R1引物扩模板mouse MIP3α质粒；以F1，mEndoglin‑R引物扩模板mous...
- 郑少江何志惠张晓钿郭峻莉吴新来陈艳刘思汝
- 文献传递
- 具有体内DC特性的新型复方疫苗靶向FGFR1抗肿瘤血管生成作用研究
- 郑少江郭峻莉张晓钿黄用豪和永壮陈艳刘思汝
- 该项目成功构建获得FGFR1-MIP3α/Fc融合蛋白重组质粒并提纯获得蛋白，并进行体内实验。发现FGFR1-MIP3α/Fc融合蛋白疫苗能明显抑制小鼠肿瘤生长的作用，不仅具有抑制肿瘤血管生成作用，还具有一定程度的DC趋...
- 关键词：
- 关键词：肿瘤生物治疗肿瘤血管生成
