李芳
- 作品数：14 被引量：13H指数：3
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- 流式细胞术三种染色方法检测体外纯化扩增的NK细胞的细胞毒作用比较被引量：5
- 2016年
- 目的:比较流式细胞术3种不同染色方法检测体外诱导扩增后NK细胞的细胞毒活性效果。方法:收集健康志愿者外周血,体外诱导扩增NK细胞,在培养第17天后分为3组,每组按10∶1、20∶1、40∶1 3个效靶比混合,共同培养4 h,并分组用3种不同方法染色后经流式细胞术检测。A组:CFSE/Annectin-V/7-AAD三色荧光染色法;B组:Annectin-V/PI双色荧光染色法;C组:CFSE/PI双色荧光染色法。结果:培养17 d后,NK细胞(CD3-CD56+)由培养第0天(16.34±10.51)%增加到(83.63±10.63)%(P<0.05)。3种染色方法检测结果均显示,扩增后NK细胞对K562细胞具有显著细胞毒活性:A组NK细胞对K562细胞的细胞毒活性均明显高于B和C组(P<0.05),当效靶比为10∶1时,A、B和C 3个组细胞毒活性分别为(36.56±3.69)%、(22.35±2.71)%和(10.85±2.09)%;当效靶比为20∶1时细胞毒活性分别为(47.83±5.52)%、(39.07±5.55)%和(29.61±4.81)%;当效靶比为40∶1时细胞毒活性则分别为(67.7±4.77)%、(51.51±4.43)%和(44.12±5.62)%,差异均有显著统计学意义(P<0.05)。结论:健康者外周血经体外分离培养,可得到高纯度NK细胞;流式细胞检测技术CFSE/Annectin-V/7-AAD三色荧光染色法能特异性地和灵敏地检测NK细胞的细胞毒活性。
- 郭继强韩亚萍李芳赵晴贾原靳保利张俊萍
- 关键词：流式细胞技术细胞毒作用NK细胞CFSE
- 穿膜肽介导的NY-ESO-1抗原多肽CTL抗肿瘤效应研究
- 背景：细胞穿膜肽(Cell penetrating peptides, cpps)是一种由30个或者更少氨基酸组成的能够穿透细胞膜的多肽,能够运载包括药物在内的许多物质。目的：探讨细胞穿膜肽携带NY-ESO-1抗原多肽致...
- 贾原李文丽赵睛李芳张俊萍
- 关键词：黑色素瘤NY-ESO-1肿瘤免疫治疗
- 谷氧还蛋白rbGrx可延缓CL4176秀丽隐杆线虫中β淀粉样蛋白诱导的毒性被引量：5
- 2018年
- 阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种与衰老相关的神经退行性疾病,其中β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)诱导的细胞毒性被认为是其发病的主要原因。本文以Aβ转基因秀丽隐杆线虫CL4176为模型,研究了重组荞麦谷氧还蛋白(recombinant buckwheat glutaredoxin,rbGrx)对Aβ诱导的毒性和氧化应激的影响。结果显示,4μmol/L rbGrx可以延长CL4176线虫平均寿命达20%左右,并增加衰老虫体运动能力约43.6%,延迟产卵高峰期1 d,同时可以有效延缓Aβ毒性诱导的瘫痪表型。进一步研究发现,在正常条件和Aβ诱导毒性时,rbGrx均能降低CL4176线虫体内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,并上调SOD活性和GSH含量。另外,rbGrx下调AβmRNA水平44.1%,减少Aβ沉积量,并且明显上调热激因子1 hsf-1(2.01倍)和hsp-16.2(2.65倍)mRNA表达水平。这表明,rbGrx通过降低CL4176线虫体内的ROS水平和上调热激蛋白质的转录表达水平,降低CL4176秀丽隐杆线虫中Aβ诱导的毒性。结果提示,rbGrx可能具有预防AD的潜力。
- 李芳李芳马晓丽李娇王转花
- 靶向KIF20A多肽的疫苗在晚期胰腺癌免疫治疗中的研究进展
- 内容:胰腺癌是常见的恶性程度较高的消化系统肿瘤之一,转移早、手术切除率低、放化疗效果差、死亡率极高,其总体5年生存率仅约为5%。近年来,免疫治疗的兴起,在各种肿瘤的治疗中所占位置越来越重,应用于胰腺癌治疗的报道也屡见不鲜...
- 韩亚萍贾原郭继强李芳张俊萍
- 关键词：晚期胰腺癌免疫治疗
- 文献传递
- 胃癌患者外周血CD8~+CD28~+和CD8~+CD28-T淋巴细胞亚群的分析
- 背景:细胞免疫在抗肿瘤免疫应答中发挥着重要作用,它通过功能各异的T淋巴细胞亚群来完成复杂的免疫调控,共刺激分子CD28主要表达于T淋巴细胞上,与存在于活化B淋巴细胞上的B7相互作用后产生的'第二信号'才能使T细胞活化,形...
- 李芳赵晴贾原韩亚萍郭继强张俊萍
- 关键词：胃癌CD8CD28流式细胞术
- 文献传递
- 流式检测技术与LDH法检测NK细胞活性的比较
- 研究背景:自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)又称天然杀伤细胞,其抗病毒感染、抗肿瘤无MHC限制性,已作为临床细胞免疫治疗肿瘤的一个重要治疗手段。目前常用的检测NK细胞的细胞毒效应的方法有MTT法...
- 郭继强韩亚萍贾原李芳赵晴张俊萍
- 关键词：NK细胞活性检测
- 文献传递
- 曲妥珠单抗增强肺癌患者外周血来源CIK细胞活性
- 研究背景:目前,在临床治疗肿瘤的过程中,细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-inducedkillercells,CIK)已被认为是一种有效的治疗手段。其具有增殖速度快、杀伤活性高、杀瘤谱广以及副作用小等特点,广泛...
- 郭继强韩亚萍贾原李芳赵晴张俊萍
- 关键词：曲妥珠单抗肺癌CIK活性
- 文献传递
- 维生素C可显著提升DC细胞成熟
- 研究背景:维生素C是人体所必需的一类小分子营养物质,它可确保机体功能正常发挥及免疫功能稳定。高浓度的维生素C富集与多种免疫细胞中,扮演'抗氧化剂'作用对抗机体氧化自由基,说明VC可能是维持自发性免疫及获得性免疫稳定的一个...
- 贾原李文丽李芳赵晴韩亚萍张俊萍
- 关键词：维生素C树突状细胞获得性免疫DC疫苗
- 文献传递
- VC-DC可显著过继免疫细胞活性水平向CTL分化
- 研究背景:维生素C可确保机体功能正常发挥及免疫功能稳定,调节多种免疫细胞,包括:树突状细胞,嗜中性粒细胞,巨噬细胞,B淋巴细胞,T淋巴细胞等,但VC对过继免疫细胞影响报道较少。本课题组发现VC可显著调节DC细胞成熟,并刺...
- 贾原李芳赵晴韩亚萍郭继强张俊萍
- 关键词：T细胞亚群树突状细胞
- 文献传递
- 穿膜肽介导的NY-ESO-1_(155-163)诱导CTL对黑素瘤A-375细胞的杀伤活性
- 2015年
- 目的:探讨穿膜肽(cell penetrating peptide,CPP)Tat_(49-57)携带NY-ESO-1_(155-163)抗原肽致敏DC后诱导获得抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic lymphocyte,CTL),并体外检测其对黑素瘤细胞株A-375的杀伤效果。方法:采集健康志愿者外周血50 ml,用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞,经细胞因子诱导,获得DC和T淋巴细胞。实验组用Tat_(49-57)-NYESO-1155-163致敏DC,待DC成熟后与T淋巴细胞混合诱导产生CTL,并设PBS组和NY-ESO-1_(155-163)组作为对照。流式细胞术检测致敏前后DC的表型,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测抗原肽疫苗致敏DC后诱导的CTL对黑素瘤细胞株A-375的体外杀伤活性,同时与对人肺癌A549细胞株、人白血病K562细胞的杀伤作用进行比较。结果:Tat显著提升NY-ESO-1_(155-163)进入DC的穿膜能力。与NY-ESO-1_(155-163)致敏的DC相比,Tat_(49-57)-NY-ESO-1_(155-163)致敏后DC的CD80/CD86[(54.9±3.3)%vs(43.8±5.7)%,P<0.05]和CD40[(42.1±1.9)%vs(23.7±2.8)%,P<0.05]的表达率显著升高。Tat_(49-57)-NY-ESO-1_(155-163)刺激DC后诱导培养的T细胞亚群主要以MHC-Ⅰ类分子介导的CD3+CD8+细胞为主。Tat_(49-57)-NY-ESO-1_(155-163)组CTL对A-375细胞的杀伤能力显著高于NY-ESO-1_(155-163)组,且随着效靶比的增加,杀伤活性逐渐增强(P<0.05)。A-375细胞高表达NY-ESO-1,Tat_(49-57)-NY-ESO-1_(155-163)组CTL对A-375细胞具有特异性杀伤作用,杀伤作用显著强于A549和K562细胞(均P<0.05)。结论:Tat_(49-57)可以增强NY-ESO-1_(155-163)抗原多肽的免疫原性,Tat_(49-57)-NY-ESO-1_(155-163)多肽致敏DC能有效诱导CTL抗黑素瘤细胞A-375的特异性免疫应答。
- 李文丽贾原赵晴李芳靳保利张俊萍
- 关键词：黑素瘤肿瘤免疫治疗
