杨春华
- 作品数：23 被引量：114H指数：5
- 供职机构：江西出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家科技支撑计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 猪蓝耳病及猪细环病毒病检疫关键技术的研究与应用
- 杨春华祝建新孙思扬胡慧罗秋红夏彪魏战勇
- 以猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）和猪细环病毒为研究对象，开展了采样技术和检测技术的研究。建立了1种新型的猪繁殖与呼吸综合征采样技术：只需将口腔拭子采集器放在猪栏内，10分钟后收集猪口腔拭子样品，操作简便快捷、不需保...
- 关键词：
- 关键词：猪蓝耳病
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒PCR-DHPLC检测新技术的建立及应用被引量：3
- 2012年
- 应用PCR结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),根据PRRSV GP5基因的序列特点设计特异性引物,PCR扩增产物经DHPLC技术进行快速检测。以猪细小病毒、猪圆环病毒Ⅱ型、猪流感病毒、猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒进行特异性试验,无交叉反应,具有较好的特异性和重复性;对阳性标准品的检测结果表明,所建立的PCR-DHPLC法灵敏度可达1.0×101拷贝/μL。对16份疑似病料分别应用本试验所建立的PCR-DHPLC法与SYBR GreenⅠ实时荧光PCR法、PCR-凝胶电泳法、病毒培养法进行检测,发现有15份荧光定量PCR阳性,15份PCR-DHPLC阳性,12份PCR-凝胶电泳阳性。结果表明,建立的PCR-DHPLC法具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可用于临床PRRSV感染的早期诊断以及分子流行病学调查。
- 杨春华祝建新钟毅孙思扬沈艳陈庆富王川庆
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因变性高效液相色谱实时荧光PCR
- 禽流感病毒荧光免疫层析检测试纸条的研制被引量：1
- 2019年
- 禽流感是重要的人兽共患病,建立现场快速灵敏的检测方法是防控其发生和流行的前提和基础。本研究采用不同亚型流感毒株交叉免疫小鼠法来免疫小鼠,通过多个亚型的NP表达蛋白来筛选杂交瘤阳性细胞株,获得分泌针对NP蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞4株。通过抗体的两两配对,基于荧光量子点作为免疫层析抗体的标记探针,借助免疫层析试纸条双抗夹心法原理,筛选出了适用于免疫层析的两株单克隆抗体,研制了禽流感病毒(Avian influenza virus, AIV )荧光免疫层析检测试纸条[A lateral-flow immunoassay strip with quantum dots(QDs)against AIV , AIV -QD-LFIA],并对该试纸条进行了特异性、敏感性、可重复性及可靠性分析。试验结果显示:本研究所建立的 AIV -QD-LFIA试纸条检测禽流感标准抗原H5N1-HK的敏感性达到104 EID50 ,检测标准抗原H9N2-HK的灵敏度为102 EID50 ,比商品化的禽流感病毒抗原检测卡灵敏度高100倍,比国家标准实时荧光RT-PCR(rRT-PCR)灵敏度低约100倍;可特异性地检测出H5亚型、H7亚型、H9亚型、H1亚型、H3亚型等A型流感病毒,与 IBV 、 NDV 等常见禽呼吸道传染病病原无交叉反应,且经过了国家流感中心标准样本盘的样品测试,特异性强;同时该法具有良好重复性,连续4周检测20个样品重复结果均为阳性;小规模田间试验显示该法用于禽流感病毒的普查监测结果可靠。可见本研究所建立的 AIV -QD-LFIA试纸条可满足禽流感病毒快速、高灵敏的检测需求,具有广阔的应用空间。
- 孙洁陈兵杨春华吴峰陈雨郑晓聪王津津陶虹丁晶于力秦智锋
- 关键词：禽流感病毒
- 布鲁菌外膜蛋白及毒力因子研究进展被引量：4
- 2006年
- 布鲁菌细胞膜的基本结构包括脂多糖和外膜蛋白,与细菌的毒力及免疫原性相关。文章描述了布鲁菌外膜蛋白分子结构的最新进展。该菌的外膜蛋白由第一组、第二组和第三组外膜蛋白构成。第一组外膜蛋白对维持布鲁菌外膜蛋白的结构起重要作用;第二组包括36 ku^38 ku外膜蛋白,为膜孔蛋白,由Omp2a和Omp2b基因编码,其中38 ku蛋白基因可能是一个与毒力相关的基因;第三组外膜蛋白包括31 ku和25 ku两个相关的蛋白,具有重要的免疫功能。31 ku蛋白属膜孔蛋白,25 ku蛋白还与毒力有关。文章也介绍了布鲁菌毒力因子研究的最新进展。
- 杨春华邱昌庆
- 关键词：布鲁菌外膜蛋白毒力因子
- 输血传播病毒PCR-DHPLC检测技术的建立及初步应用
- 2017年
- 目的应用聚合酶链式反应(PCR)结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术检测输血传播病毒。方法根据输血传播病毒的核酸序列特点设计特异性引物进行PCR,将扩增产物进行DHPLC检测分析,以验证方法的灵敏度、特异性、重复性,同时进行临床检测的初步应用。结果以乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、戊型肝炎病毒进行特异性试验,无交叉反应,具有较好的特异性;重复性良好;灵敏度可达1.0×10~1拷贝/反应。分别应用实时荧光PCR法、普通PCR法及本文所建立的PCR-DHPLC法同时检测32份血清样本,发现有17份样本实时荧光PCR阳性,17份样本PCR-DHPLC阳性,15份普通PCR阳性。结论本文建立的PCR-DHPLC法具有特异、敏感、重复性好等优点,可用于输血传播病毒感染的分子流行病学调查。
- 杨春华廖芸罗秋红孙思扬夏彪祝建新
- 关键词：输血传播病毒实时荧光PCR
- 乳牛布鲁氏菌病病原DNA快速检测技术的研究被引量：46
- 2005年
- 在国内首次建立了乳牛原乳中布鲁氏菌外膜蛋白(OMP)25 ku基因套式聚合酶链反应(nested-PCR)检测技术。结果显示,本方法的特异性好,只能扩增布鲁氏菌DNA,而不能扩增同样能引起乳牛流产的鹦鹉热衣原体、弓形虫、胎儿弯杆菌DNA;乳样的检测灵敏度达50 CFU/mL,重复试验35次,可重复性和稳定性均十分理想;对 4 批 331 头凝集试验阳性(24 份)或阴性(307 份)乳牛的乳样用本方法检测,符合率为100%。在48 h内即可获得诊断结果。本方法同样可用于血液或其他流产病料中布鲁氏菌DNA的检测。
- 邱昌庆曹小安杨春华周继章高双娣程淑敏
- 关键词：流产布鲁氏菌OMP套式PCR乳牛乳样
- 猪细环病毒数字PCR定量检测方法的建立被引量：4
- 2017年
- [目的]实现猪细环病毒(TTSuV)的准确定量检测。[方法 ]根据TTSuV的序列特点,设计特异性引物、探针,建立数字PCR检测技术。对数字PCR反应体系中的引物和探针浓度进行优化,分析方法的灵敏度、特异性,并初步应用于进行临床检测。[结果 ]最终确定TTSuV1a和TTSuV1b数字PCR反应体系中最佳引物浓度均为250 nmol/L,最佳探针浓度均为300 nmol/L,TTSuV1a型和TTSuV1b型灵敏度均可达到单个拷贝数;以猪圆环病毒Ⅱ型、猪细小病毒和猪伪狂犬病毒进行特异性试验,结果无交叉反应;批内和批间试验表明,该方法的重复性良好;本实验室留存的92份血清样本的检测结果与其背景信息一致。[结论 ]本研究建立的TTSuV数字PCR法具有特异性强、灵敏度高、检测限低等优点,可用于TTSuV的定量检测。
- 杨春华孙洁罗秋红祝建新孙思扬周延钟毅夏彪
- 关键词：实时荧光PCR
- 生猪繁殖与呼吸综合征和猪流感检疫采样关键技术的研究与示范
- 杨春华孙思扬马欣欣胡婷李琼陈斌徐武俊陈庆富祝建新
- 按照项目研究目标，并充分体现简单、实用、符合动物福利的采样要求，立足于与实际结合、指导生产的原则，项目最终形成以下研究成果:第一、建立简单、易行、不需保定、不引起猪只应激反应的生猪呼吸道传染病检疫采样关键技术;第二、申报...
- 关键词：
- 关键词：呼吸道传染病采样方法
- 危险品.极不敏感引爆物质的子弹撞击试验方法
- 本标准规定了极不敏感引爆物质的子弹撞击试验的方法原理、试验设备、试样准备、试验步骤和结果表示。 本标准适用于极不敏感引爆物质的测试。
- 杨春华王晓兵祝建新梅建黄丽莉桂家祥张君玺
- 关键词：子弹碰撞研究方法
- 文献传递
- 乳及乳制品中阪崎肠杆菌PCR-DHPLC检测新技术的建立
- 坂崎杆菌是人和动物肠道内寄生的一种革兰氏阴性无芽孢杆菌,属肠道杆菌科的一种,是条件致病菌。阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠结肠炎和菌血症,并且可能引起神经系统后遗症和死亡,死亡率高达50%以上。阪崎肠杆菌传统检测...
- 杨春华曹际娟桂家祥钟毅
- 关键词：DHPLC阪崎肠杆菌
- 文献传递
