彭菲菲
- 作品数：14 被引量：40H指数：5
- 供职机构：南昌大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省自然科学基金江西省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- iPSC-MSC来源的外泌体对LPS刺激肺泡巨噬细胞产生炎性因子的影响被引量：11
- 2016年
- 目的探讨i PSC-MSC来源的外泌体（exosome,Exo）对LPS刺激的肺泡巨噬细胞释放炎性因子的作用。方法采用旋转超滤法提纯i PSC-MSC外泌体,以无外泌体培养基培养肺泡巨噬细胞NR8383,分别给予Exo（50μg/ml）、LPS（50ng/ml）、LPS（50ng/ml）＋Exo（50μg/ml）培养24h,以不含Exo和LPS培养为对照组,利用酶联免疫标记法（ELISA）检测各组上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白浓度。结果提取物经透射电镜观察为圆形或半圆形囊泡,直径40-100nm,表达Exo标志物CD9和CD63;LPS组上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度（435.38±36.31pg/ml、319.76±39.14pg/ml和408.33±43.44pg/ml）与空白对照组（37.48±8.75pg/ml、33.51±7.88pg/ml和37.73±8.46pg/ml）和Exo组（38.71±9.14pg/ml、32.05±6.81pg/ml和42.84±6.54pg/ml）比较显著上调（P〈0.01）;LPS＋Exo组TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度（369.30±32.74pg/ml、249.23±36.77pg/ml和328.91±46.45pg/ml）与LPS组相比,明显减少（P〈0.05）;空白对照组与Exo组的TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度无显著性差异。结论成功富集Exo;i PSC-MSC来源的Exo可抑制LPS诱导的肺泡巨噬细胞表达炎性因子。
- 刘芬李勇彭菲菲胡国文熊加悦娄远蕾曾振国邵强钱克俭
- 关键词：外泌体脓毒症肺损伤
- MicroRNA-132增强乙酰胆碱对肺泡巨噬细胞炎症反应的抑制作用被引量：4
- 2015年
- 目的 观察调控microRNA-132 （miR-132）联合乙酰胆碱（ACh）对脂多糖（LPS）诱导的大鼠肺泡巨噬细胞炎症反应的作用.方法 分别采用FAM荧光标记的mimic/inhibitor阴性对照（NC）、miR-132 mimic/inhibitor、mimic/inhibitor NC转染大鼠肺泡巨噬细胞NR8383,通过荧光显微镜观察转染效率,实时荧光定量PCR检测miR-132的表达.转染后细胞给予LPS（1μg/mL）刺激或LPS＋ ACh（10 μmoL/L）处理,采用酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β （IL-1β）及白细胞介素-6（IL-6）浓度.两组间均数比较采用独立样本t检验,以P ＜0.05为差异具有统计学意义.结果 通过在NR8383细胞中转染mimic FAM NC确定50 nmol/L为转染mimic的最佳浓度.与mimic NC组相比,miR-132 mimic组细胞中miR-132的表达上调了（21.54±2.14）倍（P=0.001）.LPS组中结果发现miR-132 mimic上清液中TNF-α（P=0.683）、IL-1β（P=0.770）、IL-6（P=0.872）水平较mimic NC差异均无统计学意义;LPS＋ ACh＋ mimic NC组TNF-α（P=0.008）、IL-1β（P =0.004）、IL-6 （P =0.003）水平与LPS＋mimic NC组相比均下降;LPS＋ ACh＋ miR-132 mimic组TNF-α（P=0.001）、IL-1β （P =0.001）、IL-6 （P =0.001）水平与LPS＋ ACh＋ mimic NC组相比均下降.通过转染inhibitor FAM NC确定100nmol/L为转染inhibitor的最佳浓度.LPS组miR-132 inhibitor上清液中TNF-α（P=0.800）、IL-1β（P =0.449）、IL-6 （P =0.418）水平较inhibitor NC差异均无统计学意义.LPS＋ ACh组结果显示miR-132 inhibitor可逆转ACh介导的TNF-α （P =0.018）、IL-1β （P =0.022）、IL-6 （P=0.032）水平的下降.结论 在体外培养环境,单独给予LPS时过表达miR-132或抑制miR-132活性不影响肺泡巨噬细胞炎症反应,但miR-132可增强ACh对LPS诱导的肺泡巨噬细胞炎症反应的抑制作用.
- 刘芬李勇赵宁李东海江榕曾振国邵强彭菲菲王燕钱克俭
- 关键词：乙酰胆碱肺泡巨噬细胞炎症反应白细胞介素-1Β白细胞介素-6
- 脓毒症患者血浆miR-146a的表达及早期诊断被引量：2
- 2016年
- 目的研究脓毒症患者血浆中miR-146a的表达,评价其对脓毒症早期诊断的价值。方法采集脓毒症患者(脓毒症组,30例)及同期进行体检的健康人员(健康对照组,20例)的血标本。采用实时荧光定量PCR(RTqPCR)检测血浆miR-146a水平;检测降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)水平,并记录APACHEⅡ评分。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血浆miR-146a、PCT、CRP对脓毒症的预测价值;分析miR-146a的表达与PCT、CRP及APACHEⅡ评分的相关性。结果脓毒症组miR-146a的表达倍数明显高于健康对照组[(7.03±3.17)比(2.39±1.47),P<0.05],PCT及CRP含量、APACHEⅡ评分亦高于健康对照组(均P<0.05);且miR-146a与PCT、CRP及APACHEⅡ评分呈正相关(r分别为0.767、0.797、0.672)。miR-146a诊断脓毒症的敏感性和特异性分别为86.67%、45.00%,ROC曲线下面积(AUC)为0.898。结论血浆miR-146a对脓毒症的早期诊断指标具有较高的敏感性及特异性。
- 黄彩雪刘芬彭菲菲曾振国江榕邵强钱克俭
- 关键词：脓毒症降钙素原C反应蛋白
- iPSC-MSC来源的外泌体抑制LPS刺激肺泡巨噬细胞的炎性反应
- 目的 探讨iPSC-MSC 来源的外泌体(exosome,Exo)对LPS 刺激的肺泡巨噬细胞释放炎性因子的作用.方法 采用旋转超滤法提纯iPSC-MSC 外泌体,以无外泌体培养基培养肺泡巨噬细胞NR8383,分别给予E...
- 彭菲菲刘芬曾振国邵强钱克俭
- MCC950对线粒体损伤相关分子模式诱导大鼠肺损伤的保护作用被引量：8
- 2017年
- 目的严重创伤诱发的急性呼吸窘迫综合征目前尚无特异性治疗策略,探讨MCC950对线粒体损伤相关分子模式(MTDs)诱导肺损伤的影响,初步分析其作用机制。方法将40只SD大鼠采用随机数字表法分为对照组、MTDs组、MCC950组和MTDs+MCC950组4组,MTDs+MCC950组采用腹腔注射MCC950(20 mg/kg)预处理SD大鼠1 h后,经尾静脉注射MTDs(5%体积肝[5])到大鼠体内;对照组注射等渗盐水;MTDs组腹腔注射等渗盐水,尾静脉注射MTDs;MCC950组腹腔注射MCC950,尾静脉注射等渗盐水,12 h后麻醉,腹主动脉放血处死。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-18含量,BCA法检测BALF中蛋白含量,称重以计算肺湿重/体重比值(LWW/BW),采用HE染色后光镜观察组织病理学改变,Smith肺损伤评分评价肺损伤情况,Western blot检测Pro-Caspase-1和Caspase-1蛋白表达。结果与对照组相比,MTDs组大鼠BALF中TNF-α、IL-1β和IL-18含量显著增多(P<0.05),MCC950组差异无统计学意义(P>0.05),MTDs+MCC950组中TNF-α含量显著增多(P<0.05),而IL-1β和IL-18差异无统计学意义(P>0.05);与MTDs组相比,MCC950+MTDs组BALF中IL-1β和IL-18含量显著减少(P<0.05)。与对照组相比,MTDs组LWW/BW比值明显增大[(4.19±0.36)mg/g vs(6.32±0.54)mg/g,P<0.05],BALF中蛋白含量明显增多[(0.12±0.03)g/L vs(0.79±0.07)g/L,P<0.05];与MTDs组相比,MCC950组、MCC950+MTDs组LWW/BW比值[(4.35±0.29)mg/g、(4.47±0.46)mg/g]明显降低(P<0.05),BALF中蛋白含量[(0.12±0.06)g/L、(0.15±0.06)g/L]明显减少(P<0.05)。Smith肺损伤评分统计分析表明,与对照组相比,MTDs组肺损伤评分明显增高(1.00±0.00 vs 8.33±0.58,P<0.05);与MTDs组相比,MCC950+MTDs组肺损伤评分明显降低(8.33±0.58 vs 3.67±0.58,P<0.05)。与对照组相比,MTDs组Pro-Caspase-1和Caspase-1蛋白水平明显增高(P<0.05);与MTDs组相比,MCC950+MTDs组Caspase-1蛋白条带灰度降低,蛋白表达水平降低(P<0.05),Pro-caspase
- 彭菲菲邵强赵宁胡世林钱克俭刘芬
- 关键词：肺损伤
- 乙酰胆碱对脂多糖诱导肺泡巨噬细胞炎症反应的影响被引量：5
- 2015年
- 目的：观察乙酰胆碱（ACh）对脂多糖（LPS）诱导肺泡巨噬细胞炎症反应模型大鼠胆碱能抗炎通路的作用，以及胆碱酯酶抑制剂毒扁豆碱（Phy）对ACh抗炎作用的影响。方法体外培养NR8383大鼠肺泡巨噬细胞株并分为空白对照组、LPS组（1 mg/L LPS刺激12 h）、LPS＋ ACh组（LPS刺激前加入终浓度0.01、0.1、1、10、100μmol/L的ACh处理5 min）、 LPS＋Phy组（LPS刺激前加入1 mmol/L的Phy处理5 min）、 LPS＋ACh＋Phy组（LPS刺激前加入1 mmol/L Phy及10μmol/L Ach分别处理5 min）5组。收集各组细胞上清液，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL-1β、IL-6）的含量；同时测定乙酰胆碱酯酶（AChE）活性。结果① LPS组细胞上清液中TNF-α（ng/L：605.09±57.13比34.07±8.62）、IL-1β（ng/L：377.09±28.55比32.33±10.62）、IL-6（ng/L：558.04±77.45比42.62±11.21）含量均较空白对照组显著升高（均P＜0.05），证实肺泡巨噬细胞炎症反应模型构建成功。②与LPS组相比，终浓度0.01、0.1和1μmol/L的ACh对 LPS刺激的肺泡巨噬细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6含量影响较小（均P＞0.05）；而终浓度10μmol/L及100μmol/L的ACh可显著降低细胞上清液中TNF-α（ng/L：451.19±30.67、332.19±32.19比604.96±22.56）、IL-1β（ng/L：261.08±24.78、143.98±28.39比367.06±10.44）、IL-6（ng/L：342.75±54.60、235.48±29.75比562.69±63.34）的含量（均P＜0.05）。③ LPS组细胞上清液中AChE活性较空白对照组显著增加（kU/L：5.21±0.63比3.09±0.10，P＜0.05）；与LPS组相比，给予1 mmol/L胆碱酯酶抑制剂Phy预处理可成功抑制AChE的活性（1.51±0.12比5.21±0.63，P＜0.05）。④与LPS＋ ACh组相比，LPS＋ ACh＋ Phy组可显著降低细胞上清液中TNF-α（ng/L：183.17±35.44比451.19±30.67）、IL-1β（ng/L：91.49±12.27比261.08±24.78）、IL-6（ng/L：108.17±22.82比342.75±54.60）的含量（均P
- 刘芬赵宁李东海曾振国邵强彭菲菲王燕钱克俭
- 关键词：乙酰胆碱脂多糖肺泡巨噬细胞炎症反应
- MCC950能减轻线粒体损伤相关分子模式对 肺泡巨噬细胞的致炎效应被引量：7
- 2016年
- 目的：观察一种化学合成小分子物质MCC950对线粒体损伤相关分子模式（MTDs）诱导肺泡巨噬细胞炎症反应的影响，并分析其可能的机制。方法利用差速离心法提取SD大鼠肝脏组织来源的MTDs。体外培养大鼠肺泡巨噬细胞NR8383细胞株，并分为空白对照组、LPS阳性对照组（1mg/LLPS刺激12h）、MTDs组（50、100、200mg/LMTDs刺激12h）、MCC950组（0.1μmol/LMCC950处理30min）、MCC950＋MTDs组（终浓度0.001、0.01、0.1、1.0μmol/LMCC950预处理30min＋100mg/LMTDs刺激12h）5组。收集各组细胞上清液及细胞，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL-1β、IL-18）含量；采用蛋白质免疫印迹试验（WesternBlot）检测细胞中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1及其前体（caspase-1、pro-caspase-1）、IL-1β及其前体（pro-IL-1β）的蛋白表达。结果①与空白对照组相比，50、100、200mg/L的MTDs刺激组细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-18含量均显著升高〔TNF-α（ng/L）：459.17±66.71、968.27±124.29、1128.6±172.02比34.67±11.66，IL-1β（ng/L）：341.57±38.09、685.00±75.36、784.97±89.28比26.33±8.04，IL-18（ng/L）：175.87±37.43、364.23±39.24、370.60±44.55比73.77±12.10，均P＜0.05〕，且呈剂量依赖性；并与LPS组具有类似的致炎作用。②与MTDs组相比，0.01、0.1及1.0μmol/LMCC950＋MTDs组细胞上清液中IL-1β、IL-18含量显著降低〔IL-1β（ng/L）：334.23±33.56、38.67±12.89、36.13±17.69比724.00±77.45，IL-18（ng/L）：165.77±25.47、71.37±5.99、66.80±14.61比412.23±40.15均P＜0.05〕，其中0.1μmol/L为产生抗炎作用的最佳有效浓度。而各浓度MCC950对TNF-α影响不大。③与MTDs组相比，0.01μmol/LMCC950＋MTDs组细胞中caspase-1及IL-1β蛋白表达显著下降（A值：14753.29±950.31比19222.50±1234.13，9981.06±673.63比12759.26±574.69，均P＜0.05），pro-caspase-1及pro-IL-1β蛋白表达无�
- 彭菲菲曾振国邵强赵宁江榕钱克俭刘芬
- 关键词：急性呼吸窘迫综合征炎症反应
- MicroRNA-132通过调控胆碱能通路减轻肺泡巨噬细胞炎症反应被引量：5
- 2016年
- 目的:探讨microRNA-132(miR-132)通过调控胆碱能通路减轻肺泡巨噬细胞炎症反应的作用机制。方法:向大鼠肺泡巨噬细胞NR8383中转染miR-132 mimic、mimic阴性对照(NC)、miR-132 inhibitor或inhibitor NC,转染后用脂多糖(LPS)和(或)乙酰胆碱(ACh)处理细胞;采用real-time PCR检测乙酰胆碱酯酶(AChE)的m RNA表达;采用Western blot检测细胞中AChE、信号转导及转录激活因子3(STAT3)和磷酸化STAT3(p-STAT3),以及细胞浆和细胞核中核因子κB(NF-κB)蛋白的改变;采用AChE活性测试盒检测细胞上清液中AChE活性的改变;采用免疫荧光检测NF-κB的核移位变化。结果:上调或下调miR-132不影响AChE的mRNA相对表达水平;上调miR-132可使AChE蛋白及活性的水平均显著降低(P<0.05),下调miR-132可使AChE蛋白及活性的水平均显著升高(P<0.05)。当给予LPS+ACh作用时,miR-132 mimic组对NF-κB p65核移位的抑制作用较mimic NC组更强(P<0.05),miR-132 inhibitor组较inhibitor NC组更弱(P<0.05);miR-132 mimic组对STAT3及p-STAT3蛋白的抑制作用较mimic NC组更强(P<0.05)。结论:miR-132通过调控胆碱能通路减轻肺泡巨噬细胞炎症反应的作用机制可能是miR-132靶向作用AChE,抑制AChE对ACh的水解作用,从而增强ACh的抗炎作用,抑制NF-κB及STAT3的活化。
- 刘芬李勇赵宁李东海江榕曾振国邵强彭菲菲王燕钱克俭
- 关键词：乙酰胆碱酯酶乙酰胆碱
- 自噬降低外源性MTDs诱导肺泡巨噬细胞炎症反应的机制研究
- 目的： 观察外源性线粒体损伤相关分子模式（MTDs）对肺泡巨噬细胞（AM）的致炎作用，以及自噬对MTDs诱导的炎症反应的影响，初步探讨自噬调控MTDs致炎作用的分子机制。 方法： 提取SD大鼠肝脏组织MTDs，采用...
- 彭菲菲
- 关键词：急性呼吸窘迫综合症细胞自噬
- 文献传递
- 血浆miRNA-146a在脓毒症患者的表达及其诊断价值
- 目的：探讨miRNA-146a在脓毒症患者血浆中的表达变化及其对脓毒症的诊断价值.
方法：选取30例脓毒症患者(脓毒症组)和10例同期行健康体检的成年人(正常组),利用RT-qPCR方法检测研究人群不同时间点外...
- 彭菲菲黄彩雪刘芬曾振国钱克俭
- 关键词：脓毒症血液学检验分子标志物
