刘廷利 作品数:71 被引量:97 H指数:5 供职机构: 江苏省农业科学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省自然科学基金 江苏省农业科技自主创新基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
关于科研财务助理制度建设的几点思考 被引量:1 2019年 党的十八大以来,以习近平同志为核心的党中央高度重视实施创新驱动发展战略,于2015年3月制定颁发了《关于深化体制机制改革加快实施创新驱动发展战略的若干意见》,2016年5月,中共中央、国务院印发了《国家创新驱动发展战略纲要》,2018年7月国务院印发了《国务院关于优化科研管理提升科研绩效若干措施的通知》,要求优化科研项目和经费管理。 刘廷利关键词:体制机制改革 科研绩效 经费管理 大豆疫霉效应因子PsCRN115诱导烟草抗性的机制分析 被引量:5 2012年 CRN(crinkling and necrosis induced protein)蛋白是卵菌所特有的一类效应因子,在已经测序的疫霉种中,每个基因组中预测都含有上百个CRN基因,关于其功能和分子机制目前研究不多。前期研究发现,大豆疫霉效应因子PsCRN115是大豆疫霉的致病性必需因子且能抑制植物的细胞死亡。为了进一步研究PsCRN115的功能,本研究采用农杆菌渗入法介导的基因瞬时转化技术在烟草上过表达该基因,发现PsCRN115可显著提高烟草对烟草疫霉的抗性。随后采用荧光定量PCR研究了其作用机制,发现PsCRN115可诱导水杨酸(SA)通路防卫反应基因的高表达,但对乙烯(ET)和茉莉酸(JA)通路防卫反应基因的表达影响不显著。表明:大豆疫霉效应因子PsCRN115是致病必需的因子,能被植物所识别,并诱导植物的防卫反应。 刘廷利 茹艳艳 刘莉 刘沛菡 窦道龙关键词:大豆疫霉 防卫反应 一个来源于海岛棉的黄萎病抗性基因Gbvdr5的克隆和功能分析 棉花黄萎病为土传病害,可造成蕾、铃的大量脱落,发病严重时脱落成光杆,甚至死亡,使棉花减产20~60%,是中国棉花生产最主要病害。到目前为止,尚无有效的防治药剂,只能依靠种植抗病品种为主的综合防治措施。黄萎病抗性资源主要存... 杨郁文 凌溪铁 陈天子 刘廷利 王金彦 张保龙关键词:棉花 黄萎病 抗病 功能分析 文献传递 一种基于USER酶构建的长片段RNAi载体及其构建方法 本发明提供了一种基于USER酶的一步法快速构建带发夹结构的长片段RNAi载体的方法,提供了一种可用于制备带发夹结构的长片段RNAi载体的2301RNAiOS载体,以及一种基于USER酶构建的用于3LRR基因沉默的长片段R... 刘廷利 张保龙 姚瑶 杨郁文 凌溪铁 陈天子 王金彦效应因子PsCRN77基因在本氏烟中的表达降低其对寄生疫霉的抗性 被引量:3 2015年 CRN(Crinkler)是一类疫霉菌胞内效应因子,绝大多数CRN的功能和作用机制尚不明确。本研究利用农杆菌介导的瞬时表达技术,发现大豆疫霉效应因子PsC RN77可以在本氏烟中抑制激发子诱导的细胞死亡。接种分析表明在本氏烟中表达该效应因子基因可以促进寄生疫霉的侵染。定量RT-PCR结果显示在本氏烟中表达PsCRN77可以负调控水杨酸信号途径标记基因PRb-1b的表达,正调控茉莉酸信号途径标记基因LOX的表达。进一步通过DAB染色表明,与表达GFP对照相比,表达PsCRN77可以降低疫霉菌侵染后本氏烟中的活性氧积累。以上结果表明PsCRN77是一个毒性效应因子,可以通过影响激素抗性信号途径和活性氧积累干扰植物的防卫反应,促进病原菌的侵染。该研究为认识疫霉菌的致病机制提供了线索。 张美祥 刘廷利 茹艳艳 张琪梦 窦道龙关键词:CRN 细胞死亡 毒性 免疫反应 棉花钠尿肽基因GhPNP1的耐旱功能分析 被引量:1 2015年 【目的】分析棉花中钠尿肽Gh PNP1的结构特征、表达模式以及耐旱功能,并分析其耐旱机制,为将该基因应用于作物改良奠定基础。【方法】通过对从植物中水平转移到大丽轮枝菌中的钠尿肽基因AVE1进行同源性搜索,得到与AVE1蛋白序列相似度较高的其他物种的蛋白序列;使用MEGA5软件对AVE1蛋白序列及其同源序列进行多序列比对分析并构建同源物种间系统进化树;利用MEGA和expasy在线工具进行蛋白序列分析;并根据编码该蛋白的核酸序列设计引物在陆地棉品种奥3503中克隆到其同源基因Gh PNP1。使用多种生物信息学软件分析Gh PNP1的分子特性,包括Gh PNP1编码蛋白的等电点、分子量、信号肽、进化关系等进行预测分析。利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)分析Gh PNP1在不同器官部位的组织表达模式以及受到PEG模拟干旱胁迫处理后的表达模式。将Gh PNP1的c DNA序列连入CLCr V沉默载体中,构建Gh PNP1的病毒诱导基因沉默载体CLCr V:Gh PNP1,转入农杆菌,并通过和辅助载体CLCr VB共侵润2叶期幼苗进行叶片注射,获得Gh PNP1的沉默植株。利用PEG模拟干旱处理沉默植株检测其耐旱性,并测定沉默植株的失水率、相对含水量、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化活性(T-AOC水平)、离子渗漏率等与植物抗逆相关的生理指标。【结果】从陆地棉奥3503中克隆到的Gh PNP1的开放阅读框长度为396 bp,编码131个氨基酸,信号肽长度为15个氨基酸,通过系统进化树分析Gh PNP1编码的蛋白含有保守的钠尿肽结构域,与可可树的PNP蛋白进化关系最近。Gh PNP1在棉花植株的根、茎、叶中均表达且在茎中表达量较高,PEG模拟干旱处理后根、茎、叶中的Gh PNP1均上调表达。Gh PNP1沉默后棉花植株耐旱性显著降低。在干旱条件下,Gh PNP1沉默植株的MDA含量、离子渗漏率、叶片失水率均高于对照的未沉默植株;而沉默植株的总抗氧化能力(T-AOC水 刘小双 刘廷利 袁洪波 张保龙 王荣富关键词:陆地棉 干旱胁迫 功能分析 大豆疫霉CRN基因家族效应分子的功能研究 大豆疫霉(Phytophthora sojae Kaufman&Gerdman)是大豆生产上危害非常严重的病原菌,它几乎可以侵染大豆各个发育时期,引起大豆根或茎腐烂病,造成全球每年约10-20亿美元的经济损失。在形态上,... 刘廷利关键词:大豆疫霉 效应分子 赋予植物黄萎病抗性的GrVe基因的应用 本发明涉及赋予植物黄萎病抗性的<I>GrVe</I>基因及应用,属于生物技术领域。<I>GrVe</I>基因是从黑峰葡萄品种中获得的一个表面受体蛋白基因,该基因含有12个LRR保守结构域,C端有1个跨膜结构域。<I>Gr... 常有宏 唐娟 张保龙 刘廷利 杨郁文 陈天子文献传递 番茄非编码RNA基因LelncRNA1及其应用 本发明涉及番茄非编码RNA基因<I>LelncRNA1</I>及其应用,属于植物基因工程领域。该基因的cDNA序列SEQ ID NO. 1为番茄中首次报道,mRNA表达分析表明该基因受TYLCV诱导上调表达,对获得的转基... 张保龙 刘廷利 杨郁文 陈天子 王金彦 凌溪铁 胡节立 阚家亮 余文贵文献传递 棉花干旱诱导MYB类转录因子GhRAX3的功能分析 被引量:18 2015年 【目的】挖掘、分析响应干旱诱导的MYB转录因子的功能,为棉花抗旱研究和育种提供参考。【方法】以已知受干旱诱导表达的Gb MYB5为检索项,BLASTX检索NCBI的非冗余蛋白nr数据库中与Gb MYB5具有相似序列的棉花MYB转录因子,通过荧光定量PCR验证获得干旱应答相关的MYB转录因子Gh RAX3。将Gh RAX3-GFP融合蛋白表达载体通过农杆菌注射法在烟草叶片瞬时表达,观察亚细胞定位荧光信号。将棉花曲叶病毒CLCr V介导的基因沉默载体CLCr V﹕Gh RAX3通过农杆菌浸润法注射棉花子叶,荧光定量PCR检测棉花Gh RAX3表达水平,对Gh RAX3沉默的棉花植株进行干旱胁迫处理,观察表型变化,并检测其叶片失水率、叶片含水量、总抗氧化物酶活性、丙二醛含量和离子渗透率等抗旱相关生理指标。【结果】BLASTX检索结果发现,与Gb MYB5相比,Gh RAX3覆盖率达38%,与Gb MYB5有79%的相似性,编码一个R2R3-MYB转录因子。Gh RAX3响应干旱诱变表达,在18%(v/v)PEG 6000诱导处理0.5 h后即显著上调表达5倍,在48 h后达上调表达33倍。亚细胞定位结果显示Gh RAX3-GFP4融合蛋白仅在细胞核有明显的绿色荧光信号,表明Gh RAX3定位在细胞核中。CLCr V病毒诱导Gh RAX3沉默后,Gh RAX3在沉默株的表达量仅为野生型的41%,表明Gh RAX3表达已被抑制。取干旱处理前的棉花植株同部位的叶片,测定单位重量叶片在0—7 h内的失水量,发现Gh RAX3沉默植株的叶片失水率显著高于野生型和空载体对照植株。在18%(v/v)PEG 6000水溶液处理24 h或在自然干旱15 d后,Gh RAX3沉默的棉花植株萎蔫程度比野生型和空载体对照植株严重。自然干旱处理7 d后,检测叶片含水量、总抗氧化物酶活性、丙二醛含量和离子渗透率等抗旱相关生理指标,发现Gh RAX3沉默植株的叶片相对含水量为82%,总抗氧化物酶活性为1.29 U·mg-1,而野生型和空载体对照植株的叶片相对含水量则分别为89%和91%,� 丁震乾 陈天子 刘廷利 刘小双 张保龙 周兴根关键词:棉花 MYB转录因子 干旱胁迫