李海叶
- 作品数:4 被引量:11H指数:2
- 供职机构:南方医科大学中医药学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 多功能蛋白APE1/Ref1在肝衰竭大鼠肝细胞不同部位的表达意义被引量:4
- 2016年
- 目的研究多功能蛋白酶脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE1/Ref1)在慢加急性肝衰竭大鼠肝细胞不同部位的表达意义。方法将30只SD大鼠随机分为对照组(n=15)和模型组(n=15)。采用四氯化碳(CCL4)联合D-氨基半乳糖(D-GalN)和内毒素(LPS)注射法制备肝衰竭模型,使用B超监测筛选成功模型。检测血清ALT、AST、总胆红素(TBIL),采用HE染色观察肝组织病理学变化,采用免疫组化和免疫印迹法检测肝组织胞浆蛋白、胞核蛋白、总蛋白APE1/Ref1的表达。结果本组实验,经B超筛选模型成功率达80%;正常对照组血清ALT、AST和TBIL水平分别为(56.5±16.0)U/L、(178.7±36.5)U/L和(3.2±0.6)μmol/L,均显著低于模型组【(620.4±347.5)U/L、(1077.7±666.1)U/L和(21.2±16.9)μmol/L,均P<0.05】;免疫组化法检测模型组肝组织APE1/Ref1表达水平为(6.8±1.3)IOD,显著低于正常对照组的【(8.1±1.2)IOD,P<0.05】,模型组胞浆蛋白水平为(0.91±0.08)IOD,明显高于正常对照组的【(0.18±0.01)IOD,P<0.01】,而核蛋白和总蛋白水平分别为(0.71±0.01)IOD和(0.92±0.03)IOD,均明显低于正常对照组【(1.41±0.04)IOD和(1.15±0.01)IOD,P<0.05】。结论慢加急性肝衰竭大鼠肝内APE1/Ref1表达呈现由细胞核内转向胞浆内表达的特征,总体表达呈下降水平。
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- 关键词:肝衰竭DNA损伤氧化应激
- 程序性坏死靶向治疗的研究进展
- 2017年
- 细胞死亡在近十年来被广泛研究,很多学者认为药物干预可以抑制大量细胞的损失,从而改善组织器官的生理机能.长期以来,只有凋亡被认为是可以调控的,而细胞坏死是一种被动的、不可调控的死亡过程.随着研究的日益深入,人们逐渐意识到坏死也是受一系列分子调控的.Degterev等[1]发现了一种小分子物质Nec-1(necrostatin-1),能特异性地阻断非半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 (Casepase)依赖的细胞死亡,但不影响凋亡的发生,这种能被Nec-1特异性抑制的细胞死亡方式称为程序性坏死(necroptosis).
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- 关键词:细胞坏死程序性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶细胞死亡方式分子调控
- 三黄茵赤汤对D-氨基半乳糖诱导人胚胎肝细胞系LO2坏死的影响被引量:5
- 2017年
- 目的探讨三黄茵赤汤治疗急性肝损伤的可能作用机制。方法将人胚胎肝细胞系LO2分为正常组、模型组、对照组及三黄茵赤汤高、中、低剂量组,通过D-氨基半乳糖(D-Gal N)诱导LO2细胞坏死,三黄茵赤汤高、中、低剂量组分别给予三黄茵赤汤3、2、1 mg/ml,对照组给予受体相互作用蛋白1抑制剂(Nec-1)60 mmol/L,采用MTT法测定各组细胞存活率,Hoechst、PI染色分析细胞是否发生凋亡、坏死,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞内活性氧(ROS)水平,Western blot法检测各组细胞Casepase-3、受体相互作用蛋白1(RIP1)、受体相互作用蛋白3(RIP3)表达情况。结果与模型组比较,三黄茵赤汤中、低剂量组均能提高细胞生存率和ROS的清除率,三黄茵赤汤中剂量组能降低Hoechst、PI染色荧光强度,三黄茵赤汤高剂量组亦能提高ROS的清除率(P<0.05)。三黄茵赤汤中剂量组降低细胞晚期凋亡率、提高生存率的效果最好。三黄茵赤汤各剂量组均能减少RIP1及RIP3表达(P<0.05);与三黄茵赤汤各剂量组相比,对照组效果更加明显(P<0.01)。结论三黄茵赤汤通过抑制RIP1及RIP3的表达而对D-Gal N诱导LO2细胞坏死产生保护作用。
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- 关键词:D-氨基半乳糖细胞坏死
- 三黄茵赤方含药血清对LO2细胞DNA氧化损伤的影响被引量:2
- 2015年
- 目的探讨三黄茵赤方含药血清对H2O2诱导LO2细胞DNA氧化损伤的保护作用。方法采集三黄茵赤方含药血清,以LO2细胞株为研究对象,通过H2O2诱导LO2细胞DNA氧化损伤模型,实验分正常对照组、H2O2模型组、三黄茵赤方含药血清5%、10%、15%浓度组、维生素E组,采用倒置显微镜观察各组形态,CCK-8法测定细胞存活率,生化法检测细胞内SOD、CAT和GSH-PX活性,流式细胞仪检测细胞内ROS水平,ELISA检测细胞内8-OHd G含量,彗星实验检测细胞DNA损伤情况。结果与H2O2模型组比较,三黄茵赤方含药血清10%、15%浓度组、维生素E组均能提高细胞存活率(P<0.05),增强细胞内SOD、CAT、GSH-PX活性(P<0.05),改善细胞对ROS清除能力(P<0.01),降低细胞内8-OHd G含量(P<0.01),减低细胞拖尾率、尾长、尾矩及Olive尾矩(P<0.05)。结论三黄茵赤方含药血清对H2O2诱导LO2细胞DNA氧化性损伤具有保护作用,以15%浓度含药血清组作用最显著。
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- 关键词:含药血清H2O2DNA氧化损伤