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基于DGGE和real-time PCR分析肾血管性高血压大鼠肠道菌群的变化被引量：7: 2016年; 目的分析两肾一夹(2K1C)肾血管性高血压(RVH)模型大鼠肠道菌群结构的变化,为RVH的防治提供新思路。方法 8周龄雄性SD大鼠随机分为2K1C模型组和假手术组(每组8只),2K1C手术制备RVH模型。无创尾套法测量大鼠尾动脉收缩压。手术干预4周后,收集肠道中粪便并从中提取菌群DNA,采用PCR-变性梯度凝胶电泳方法分析2K1C大鼠肠道菌群的多样性,实时荧光定量PCR对肠道中优势菌群双歧杆菌属和乳酸杆菌属进行定量检测。结果与假手术组相比,2K1C模型组尾动脉收缩压显著升高(164.77 mm Hg比122.08 mm Hg,P<0.05),而假手术组尾动脉收缩压与造模前相比未发生明显改变(122.08 mm Hg比120.13 mm Hg,P>0.05)。2K1C模型组与假手术组间肠道菌群多样性有明显差异(P<0.05),且2K1C模型组肠道菌群多样性较低。2K1C模型组双歧杆菌属和乳酸杆菌属含量明显低于假手术组(2.335×10-3ng/g比1.805×10-2ng/g,0.048 ng/g比0.139 ng/g,P<0.05)。结论 2K1C RVH大鼠肠道菌群多样性显著降低,双歧杆菌属和乳酸杆菌属含量发生明显改变,提示其可能参与了2K1C大鼠高血压的发生发展过程。; 陈珍珍胡海文荣白丽云王英王占黎杨建新; 关键词：肾血管性高血压肠道菌群

羊种布鲁氏杆菌基因外重复回文序列经TLR9诱导IFN-α表达的研究: 目的：　　筛选具有活化Toll样受体9(TLR9)活性的羊种布鲁氏杆菌DNA中基因外重复回文序列(REPs)，检测其经TLR9诱导的干扰素-α(IFN-α)表达，为羊种布鲁氏杆菌病的防治提供新思路。　　方法：　　针对羊种...; 白丽云; 关键词：干扰素-Α 生物信息学; 文献传递

牛种布鲁氏菌TLR9_CpG_DNA免疫信号通路活性检测: 2016年; 目的检测牛种布鲁氏菌TLR9_Cp G_DNA免疫信号通路活性。方法 NCBI网站上下载Brucella abortus A13334全部基因组序列,利用生物信息学的方法筛选Cp G基序,合成天然骨架的脱氧寡核苷酸(ODNs),转染小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7收集上清,Elisa检测炎性因子干扰素IFN-α的分泌水平。结果共筛选出1 935条牛种布鲁氏菌Cp G,选其中二级茎环结构较好的5条序列合成ODNs,Elisa结果显示,序列M1分泌的IFN-α浓度与对照序列相比表达量增高差异有统计学意义。结论宿主TLR9识别牛种布鲁氏菌Cp G基序,从而活化免疫信号通路。; 张雅娴白丽云王占黎王英于慧; 关键词：布鲁氏菌 CPG TOLL样受体9 干扰素Α

羊种布氏杆菌基因外重复回文序列经Toll样受体9诱导IFN-α表达的研究被引量：1: 2015年; 目的筛选具有活化Toll样受体9（TLR9）活性的羊种布氏杆菌DNA中基因外重复回文序列（REPs）,检测其经TLR9诱导的干扰素-α（IFN-α）表达,为羊种布氏杆菌病的防治提供新思路.方法针对羊种布氏杆菌Brucella melitensis NI基因组序列,利用生物信息学技术识别其REPs后,合成序列.将合成的天然骨架脱氧寡核苷酸（ODNs）转染小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测IFN-α的分泌水平.采用TLR9-siRNA沉默RAW264.7中的TLR9,将上述诱导IFN-α分泌增加的阳性ODN序列转染RAW264.7,ELISA方法检测IFN-α的分泌变化.结果筛选获得2 200个羊种布氏杆菌基因组REPs,选择二级茎环结构较好的12条ODNs序列进行合成,ELISA结果显示,ODNs M2、M3、M4、M5、M6、M7、M9、M12介导IFN-α分泌量分别为（26.944±1.868）、（46.461±2.562）、（34.980±2.055）、（43.016±2.162）、（62.533±4.031）、（67.125±5.069）、（18.908±1.633）、（39.572±2.465）pg/ml,显著高于阴性对照组的（12.594±1.338）pg/ml,差异有统计学意义（t=10.817、20.295、15.812、20.724、20.365、18.016、5.180、16.660,均P＜0.05）,且阳性ODN M6所介导的IFN-α分泌可以被TLR9-siRNA显著抑制.结论羊种布氏杆菌基因组REPs可经TLR9信号通路引起炎性因子IFN-α分泌增加,参与介导羊种布氏杆菌早期感染后的固有免疫应答.; 白丽云张雅娴王占黎王英于慧; 关键词：TOLL样受体9 TOLL-LIKE

活化TLR9的牛种布氏菌基因外重复回文序列筛选及活性检测: 2016年; 目的筛选具有活化Toll样受体9(TLR9)的牛种布氏菌基因外重复回文序列(Repetitive Extragenic Palindrome Squence,REPs)并检测其活性,为布氏菌病的治疗提供新思路。方法基于Brucella abortus A13334基因组序列,利用生物信息学技术识别其REPs后,合成序列。将合成的天然骨架的脱氧寡核苷酸(ODNs)转染小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7,以ELISA检测IFN-α的分泌水平。采用TLR9-siRNA沉默RAW264.7中的TLR9,将上述诱导IFN-α分泌增加的阳性ODN序列转染RAW264.7,ELISA方法检测IFN-α的分泌变化。结果筛选出1 857条牛种布氏菌REPs,选择2级茎环结构较好的5条ODNs序列进行合成,ELISA方法检测显示ODNs M4、M5介导IFN-α分泌量显著高于阴性对照(P<0.05),且阳性ODN M5所介导的IFN-α分泌可以被TLR9-siRNA显著抑制。结论布氏菌基因组中存在可以活化TLR9信号通路的REPs,此结果有助于对布氏菌致病和免疫机制的认识。; 张雅娴白丽云王占黎王英于慧; 关键词：巨噬细胞 TOLL样受体9 Α-干扰素

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白丽云

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