谢婷婷
- 作品数：11 被引量：58H指数：4
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生社会学经济管理环境科学与工程更多>>
- HMGB1联合LPS协同作用促进小鼠肺成纤维细胞增殖细胞内信号转导机制的生物信息学研究
- 目的 我们的前期研究已经证实脂多糖(LPS)能诱导肺成纤维细胞分泌内源性高迁移率族蛋白1(HMGB1),两者能发挥协同作用促进肺成纤维细胞的增殖和肺纤维化的发生,但尚未明确两者协同作用的细胞内信号转导机制.
- 徐侨翌谢婷婷李雯邢顺鹏皋源何征宇
- 脂多糖调控肺成纤维细胞Thy-1及整合素β3表达并抑制自噬的观察性研究
- 明确脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对小鼠肺成纤维细胞胸腺细胞分化抗原-1(thymocyte differentiation antigen,Thy-1)和整合素β3蛋白表达的调控作用,并观察其与...
- 万晗曦谢婷婷徐侨翌胡晓婷邢顺鹏皋源何征宇
- 关键词：脂多糖肺成纤维细胞整合素Β3细胞自噬
- LPS诱导内源性HMGB1分泌通过NF-κB通路促进小鼠肺成纤维细胞分泌MMP-2,MMP-9和TIMP-2
- 目的 我们的前期研究已经证实脂多糖(LPS)能诱导肺成纤维细胞分泌内源性高迁移率族蛋白1(HMGB1),两者能发挥协同作用促进肺成纤维细胞的增殖和肺纤维化的发生,而肺成纤维细胞MMP-2,MMP-9 和TIMP-2 的分...
- 谢婷婷徐侨翌李雯邢顺鹏皋源何征宇
- LPS通过PI3K-Akt-mTOR信号通路抑制肺成纤维细胞自噬
- 革兰氏阴性杆菌细胞壁的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)是内毒素的主要成份,能诱导肺成纤维细胞异常增殖活化并分泌胶原蛋白沉积于肺组织,引起肺纤维化.自噬是存在于真核细胞中一种进化保守的,依赖于溶酶体的...
- 谢婷婷何征宇
- 关键词：肺纤维化脂多糖肺成纤维细胞细胞自噬
- 脂多糖抑制小鼠肺成纤维细胞自噬的观察性研究被引量：1
- 2019年
- 目的观察体外原代培养的小鼠肺成纤维细胞在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作用下,自噬微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,MAP1LC3)(以下简称LC3)和Beclin-1的表达情况,以明确LPS对肺成纤维细胞自噬的调控作用.方法将培养至4~7代的小鼠肺成纤维细胞接种于6孔培养板,密度1×10^4个/ml.待细胞贴壁后,更换无血清培养基饥饿过夜,采用随机数字表法将其分为4组(每组3孔):PBS对照组(Con组)、250μg/L LPS组(LPS250组)、500μg/L LPS组(LPS500组)、1 000μg/L LPS组(LPS1 000组),除Con组外,其余组分别加入以上终浓度LPS,各组在加入PBS或LPS后30 h裂解细胞并提取总蛋白,通过Western blot法比较小鼠肺成纤维细胞经不同浓度LPS刺激后LC3和Beclin-1蛋白的表达情况;同时,采用随机数字表法将传代细胞分为2组(每组3孔):IF-Con组(加入PBS作为对照)和IF-LPS组(加入1 000μg/L的LPS),采用免疫荧光技术比较IF-Con组和IF-LPS组中小鼠肺成纤维细胞内自噬小体的表达情况.结果随着LPS刺激浓度的增高,LC3蛋白表达量下调,而LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ在Con组最高,随LPS刺激浓度的升高逐渐降低,LPS1 000组中,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ较Con组降低(P<0.05);Beclin-1蛋白的表达量在Con组、LPS250组和LPS500组间差异无统计学意义(P>0.05),而在LPS1 000组中,Beclin-1蛋白表达较Con组明显下调(P<0.05).同时,免疫荧光实验结果显示IF-LPS组中小鼠肺成纤维细胞内自噬小体的表达量较IF-Con组明显降低.结论在体外培养的小鼠肺成纤维细胞中应用1 000μg/L的LPS可以下调LC3和Beclin-1的蛋白表达,并抑制自噬小体的形成,表明LPS可以抑制肺成纤维细胞的自噬.提示LPS抑制肺成纤维细胞的自噬可能是肺纤维化发生的机制之一.
- 谢婷婷徐侨翌邢顺鹏万晗曦皋源何征宇
- 关键词：脂多糖成纤维细胞肺纤维化自噬
- 案例教学法联合情景模拟教学法在住院医师规范化培训中的应用被引量：41
- 2020年
- 住院医师规范化培训是临床医学专业学生毕业后继续教育的重要组成部分,目前已成为提升医师队伍职业素养、提升医疗质量的重要举措[1]。重症医学是研究危重病发生、发展规律及诊治方法的临床二级学科,涉及各临床专科危重患者的救治工作,是住院医师规范化培训阶段的重要轮转科室之一。重症患者病情变化复杂,并且可先后累及不同器官和系统,诊治过程中需使用到多种先进的监测和操作技术。
- 何征宇徐侨翌李尹娇枝李雯谢婷婷邢顺鹏皋源
- 关键词：情景模拟教学法医师队伍救治工作临床专科病情变化危重病
- PFKFB3参与脂多糖诱导肺成纤维细胞及肺组织有氧糖酵解的观察性研究被引量：3
- 2020年
- 目的:观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导肺成纤维细胞及肺组织有氧糖酵解关键酶6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3,PFKFB3)表达及其与有氧糖酵解的关系,探讨在LPS诱导肺纤维化过程中肺成纤维细胞和肺组织有氧糖酵解的潜在机制。方法:将人胚肺成纤维细胞MRC-5细胞系采用随机数字表法分为PBS对照组(PBS组)和LPS组(每组3孔),Western blot检测LPS刺激细胞6h后PFKFB3表达情况,同时免疫荧光显示PFKFB3在细胞内的定位情况;于LPS刺激后48 h采用海马细胞能量代谢仪检测细胞耗氧率(oxygen consumption rate,OCR)和产酸率(extracellular acidification rate,ECAR),并采用比色法检测有氧糖酵解产物乳酸产生情况,同时Western blot检测LPS刺激48 h后Ⅰ型胶原蛋白合成情况。将24只C57BL/6小鼠按随机数字表法分为生理盐水对照组(C组)、LPS组(L组),每组12只,L组、C组连续5d分别腹腔注射5 mg/kg LPS、等容量生理盐水;每组各6只于造模后第7天无痛处死小鼠,取血浆和肺组织,Western blot和免疫荧光检测各组肺组织中PFKFB3表达情况,比色法检测各组小鼠血浆中乳酸的含量;剩余小鼠于造模后第28天取肺组织,一侧肺通过Western blot检测肺组织Ⅰ型胶原蛋白合成情况,另一侧肺做石蜡切片进行病理学检测。结果:与PBS组比较,LPS刺激细胞6h后PFKFB3表达明显升高(P<0.05);LPS刺激细胞48 h后,与PBS组比较,LPS组细胞耗氧率降低、产酸率增加,代谢产物乳酸含量明显升高(P<0.05),同时细胞Ⅰ型胶原蛋白合成显著增加(P<0.05)。与C组比较,L组小鼠腹腔注射LPS 7 d后肺组织中PFKFB3表达明显升高(P<0.05),血浆乳酸含量明显升高(P<0.05);LPS注射28 d后,L组小鼠Ⅰ型胶原蛋白表达明显升高(P<0.05),肺组织出现明显纤维化。结论:在LPS诱导的肺纤维化过程中,LPS可诱导肺成纤维细胞和肺组织中PFKFB3蛋白表达,该过程与其�
- 胡晓婷万晗曦谢婷婷徐侨翌邢顺鹏皋源何征宇
- 关键词：脂多糖有氧糖酵解肺纤维化
- 脂多糖诱导内源性高迁移率族蛋白B1分泌活化核因子-κB通路促进肺成纤维细胞异常增殖被引量：5
- 2019年
- 目的观察脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)刺激小鼠原代培养肺成纤维细胞后内源性高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein, HMGB1)细胞内移位及细胞外分泌的情况,并明确其在LPS诱导肺成纤维细胞异常增殖过程中的重要作用。 方法①将原代培养的小鼠肺成纤维细胞采用随机数字表法分为2组(每组3个孔),即PBS对照组(Con组)和LPS组(100 μg/L),Western blot检测LPS刺激12 h后HMGB1乙酰化修饰的情况,同时采用免疫荧光检测HMGB1细胞内的定位情况。②将原代培养的小鼠肺成纤维细胞采用随机数字表法分为4组(每组3个孔),即PBS对照组(Con组)、100 μg/L LPS组(LPS100组)、250 μg/L LPS 组(LPS250组)和500 μg/L LPS(LPS500组),于LPS刺激24 h后采用ELISA法检测上清液中HMGB1的含量。③采用随机数字表法将小鼠原代肺成纤维细胞分为4组(每组6个孔),NF-κB通路抑制剂吡咯烷二硫代甲酸铵(ammonium pyrrolidinedithiocarbamate, PDTC)预处理细胞30 min后再分别使用LPS、HMGB1刺激细胞0、12、24 h和48 h,即PBS对照组(Con组)、 LPS组(或HMGB1组)、PDTC组、LPS+PDTC组(或HMGB1+PDTC组),Cell Counting Kit-8(CCK-8)实验检测细胞增殖情况。 结果①与Con组比较,LPS刺激细胞12 h后,LPS组乙酰化HMGB1/总HMGB1明显升高(P<0.05),同时细胞质中HMGB1表达明显增加。② LPS刺激细胞24 h后,LPS各组上清液中HMGB1含量较Con组明显升高(P<0.05)。③ LPS刺激细胞24 h和48 h 后,PDTC+LPS组细胞的光密度(D)值较LPS组明显降低(P<0.05);HMGB1刺激细胞12、24 h和48 h后,PDTC+HMGB1组D值较HMGB1组均明显降低(P<0.05)。 结论LPS可促进小鼠肺成纤维细胞核内HMGB1的主动分泌,进而通过活化NF-κB信号通路加速细胞增殖,可能是LPS诱导肺成纤维细胞异常增殖的重要机制。
- 徐侨翌谢婷婷万晗曦胡晓婷何征宇皋源邢顺鹏
- 关键词：脂多糖肺成纤维细胞高迁移率族蛋白B1核因子-ΚB
- 脂多糖诱导小鼠肺成纤维细胞有氧酵解机制的生物信息学研究被引量：4
- 2018年
- 目的 明确脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）对小鼠肺成纤维细胞有氧酵解的诱导作用并探讨其相关机制。 方法 将培养至4~7代的小鼠肺成纤维细胞接种于6孔培养板。采用随机数字表法将其分为4组（每组3孔）：空白对照组（Con组），0.5 mg/L LPS组（LPS0.5组），2.0 mg/L LPS组（LPS2.0组），4.0 mg/L LPS组（LPS4.0组）。除Con组外，分别加入以上终浓度的LPS，在加入LPS后24 h收集细胞培养上清液，采用ELISA法检测不同浓度LPS刺激小鼠肺成纤维细胞24 h后细胞培养上清液中有氧酵解代谢产物乳酸的表达水平；以基因芯片比较LPS诱导组与Con组小鼠肺成纤维细胞基因表达水平，筛选获得两组间差异表达基因，通过生物信息学分析方法将差异基因在KEGG数据库中进行统计分析，寻找与糖代谢相关显著富集的信号通路以明确LPS诱导小鼠肺成纤维细胞有氧酵解的相关机制。 结果 与Con组比较，不同浓度LPS刺激小鼠肺成纤维细胞均可引起细胞培养上清液中有氧酵解代谢产物乳酸含量显著增加（P〈0.05），并随LPS刺激浓度的升高而升高；基因芯片筛选出LPS诱导组与Con组差异表达的基因，KEGG通路富集分析获得4条与糖代谢密切相关的信号转导通路，分别为胰岛素信号通路、Janus激酶/信号转导子和转录激活子（janus kinase/signal transducers and activators of transcription, JAK？蛳STAT）信号通路、脂肪酸代谢通路以及鞘糖脂生物合成通路？蛳乳糖和新乳糖系列。 结论 LPS可促进肺成纤维细胞有氧酵解产物乳酸的形成，该过程与胰岛素信号通路、JAK？蛳STAT信号通路、脂肪酸代谢通路以及鞘糖脂生物合成通路？蛳乳糖和新乳糖系列活化有关，可能是脓毒症相关性肺纤维化发生的重要机制之一。
- 邢顺鹏邢顺鹏胡晓婷谢婷婷谢婷婷何征宇皋源
- 关键词：脂多糖肺成纤维细胞肺纤维化
- 脂多糖对肺成纤维细胞胸腺细胞分化抗原-1及整合素β3表达的调控并抑制自噬的研究
- 2018年
- 目的 明确脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）对小鼠肺成纤维细胞胸腺细胞分化抗原-1（thymocyte differentiation antigen-1, Thy-1）和整合素β3蛋白表达的调控作用，并观察其与肺成纤维细胞自噬抑制的关系。 方法 将原代培养的小鼠肺成纤维细胞采用随机数字法分为4组（每组3孔）：PBS对照组（Con组）、0.25 mg/L LPS组（LPS0.25组）、0.50 mg/L LPS组（LPS0.50组）、1.00 mg/L LPS组（LPS1.00组），随后以不同浓度LPS（0.25、0.50、1.00 mg/L）刺激，于刺激后6 h通过Western blot检测不同浓度LPS刺激小鼠肺成纤维细胞后Thy-1和整合素β3蛋白的表达情况。于刺激后30 h比较肺成纤维细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ和Beclin-1的表达情况，同时通过透射电子显微镜观察细胞内自噬小体形成情况。 结果 随着LPS刺激浓度的增加，小鼠肺成纤维细胞的Thy-1蛋白表达量下降，其中LPS1.00组较Con组有明显下降（P〈0.05）；整合素β3蛋白表达量升高，其中LPS1.00组较Con组有明显升高（P〈0.05）。LPS1.00组刺激小鼠肺成纤维细胞30 h后明显抑制其自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ和Beclin-1的表达（P〈0.05），并抑制自噬小体形成（P〈0.05）。 结论 LPS可下调Thy？蛳1蛋白表达、上调整合素β3蛋白表达，同时抑制自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ和Beclin-1的表达及自噬小体的生成，该过程可能与LPS诱导肺成纤维细胞自噬抑制以及肺纤维化进展有关。
- 万晗曦谢婷婷徐侨翌胡晓婷邢顺鹏皋源何征宇
- 关键词：脂多糖肺成纤维细胞自噬整合素Β3
