张洪杰
- 作品数：9 被引量：15H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：陕西省科技统筹创新工程计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 山羊IFN-γ免疫血清制备及抗体ELISA检测方法的建立被引量：3
- 2016年
- 摘要：为制备山羊干扰素-γ（IFN-γ）免疫血清并建立山羊IFN-γ抗体ELISA检测方法，以原核表达的山羊γIFN重组蛋白（rIFN-γ）为材料，免疫小鼠制备免疫血清；通过对测定不同的抗原包被浓度及包被时间，酶标抗体稀释度，免疫血清的孵育时间等条件的优化建立检测抗体效价的ELISA检测方法，并采用建立的方法测定免疫血清的抗体效价。结果显示，rIFN-γ抗原包被浓度为10μg／mL，4℃包被12h；酶标抗体稀释度为1：5000；免疫血清孵育时间为60min，可以得到最佳ELISA的检测结果。重复试验显示该方法变异系数（CV）在1．5％～5％之间。采用建立的方法测得免疫小鼠免疫血清效价为10^7。该ELISA检测方法灵敏高，稳定性好，为山羊IFN-γ抗体检测提供了技术支持。
- 刘鹤媛周铭岳进华张洪杰陈德坤
- 关键词：山羊免疫血清酶联免疫吸附试验
- L-17单克隆抗体的制备与鉴定
- 为制备山羊IL-17单克隆抗体,诱导重组菌rIL-17-pET32a-TransB(DE3)表达山羊IL-17重组蛋白(rIL-17),纯化后免疫BALB/c小鼠,取免疫合格的小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合...
- 桑锋锋高洋张洪杰朱伟英王毅陈德坤
- 关键词：山羊杂交瘤细胞ELISA
- IL-17单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2
- 2017年
- 为制备山羊IL-17单克隆抗体,诱导重组菌rIL-17-pET32a-TransB(DE3)表达山羊IL-17重组蛋白(rIL-17),纯化后免疫BALB/c小鼠,取免疫合格的小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,采用间接ELISA方法筛选阳性克隆细胞株。对获得的杂交瘤细胞进行染色体组型分析,并对其分泌的IL-17单克隆抗体进行抗体特异性、抗体类别等分析。结果显示,成功获得了纯化的山羊IL-17原核表达产物;筛选到1株能特异性分泌山羊IL-17单克隆抗体的杂交瘤细胞株-B6,其分泌的单克隆抗体亚型为IgG1,抗体轻链为κ。
- 桑锋锋高洋张洪杰朱伟英王毅陈德坤
- 关键词：山羊杂交瘤细胞酶联免疫吸附试验
- 一株奶山羊伪结核棒状杆菌的分离与鉴定被引量：7
- 2017年
- 为获得陕西某羊场病羊脓包中的病原菌,以无菌采集的病羊颈部脓汁为材料,进行细菌分离培养,鉴定分离菌株的形态特征、培养特性、生化特性,挑取分离菌株进行协同溶血试验(cAMP)和16SrRNA基因的PCR扩增,并对序列进行分析,NJ法构建系统发育树;用分离菌株分别接种Balb/c小鼠和奶山羊;药敏试验鉴定分离株的耐药性。结果显示,分离菌株的形态特征、培养特性、生化特性与伯杰细菌鉴定手册所述伪结核棒状杆菌特性一致;测序显示分离菌株与GenBank中已收录伪结核棒状杆菌相似性达97%以上;Balb/c小鼠致病性试验和奶山羊动物回归试验表明分离株有强致病性;药敏试验表明分离菌株对红霉素、环丙沙星、克拉霉素、强力霉素、四环素、头孢唑啉、新霉素、氧氟沙星等多种抗生素敏感,对复方新诺明耐药。
- 朱伟英猴银行霍宁宁桑锋锋张洪杰高洋李言言王毅陈德坤
- 关键词：山羊伪结核棒状杆菌
- 金黄色葡萄球菌诱导的乳腺炎小鼠脾脏Th细胞变化研究被引量：1
- 2016年
- 目的:在小鼠金黄色葡萄球菌性乳腺炎过程中,探讨脾脏内多种Th细胞亚群数量和相关细胞因子、转录因子的动态变化及其意义。方法:本研究首先建立S.aureus感染小鼠的乳腺炎模型,再利用流式细胞术和荧光定量PCR技术,分别检测脾脏中多种Th细胞亚群数量及相关因子mRNA水平。结果:在S.aureus感染小鼠乳房后的不同时间,脾脏内Th2细胞和Th17细胞占CD4^+淋巴细胞的比例分别显著增加(P<0.05),而Treg细胞比例则明显降低(P<0.05)。并且,与Th细胞分化、活化和效应相关的多种细胞因子及转录因子,均在转录水平有明显升高(P<0.05)。结论:乳腺炎不只是发生于乳腺局部的一种炎症反应,机体还能够调动脾脏的多种Th淋巴细胞亚群,以分泌细胞因子的方式,组织有效的乳腺抗S.aureus感染免疫应答。
- 赵燕清高洋张洪杰方琳陈德坤
- 关键词：乳腺炎TH细胞亚群脾脏金黄色葡萄球菌小鼠
- 分泌抗山羊γ干扰素单克隆抗体杂交瘤细胞株的制备与鉴定被引量：2
- 2017年
- 为筛选分泌山羊γ干扰素(IFN-γ)单克隆抗体的杂交瘤细胞,以原核表达的山羊rIFN-γ蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾脏细胞与SP2/0瘤细胞进行细胞融合,以间接ELISA方法筛选分泌山羊IFN-γ单克隆抗体杂交瘤细胞,采用山羊外周血淋巴细胞产生的IFN-γ包被酶标板对IFN-γ的特异性进行鉴定,用试纸条对IFN-γ单克隆抗体类别和亚型进行鉴定。结果获得了1株能特异性识别山羊IFN-γ的杂交瘤细胞3C,3C分泌的单克隆抗体能够特异性识别天然结构的山羊IFN-γ,单克隆抗体类别为IgG,轻链为κ型。
- 张洪杰桑锋锋刘阿华李言言王毅陈德坤
- 关键词：山羊Γ干扰素杂交瘤细胞
- 特异性鉴别羊乳中掺加牛乳的单克隆抗体及其制备方法
- 本发明涉及特异性鉴别羊乳中掺加牛乳的单克隆抗体及其制备方法。市场上常出现羊乳中掺加牛乳的现象，以次充好，影响羊乳质量。本发明以脱脂牛乳为抗原，免疫BALB/c小鼠，分离脾细胞与SP2/0瘤细胞进行细胞融合，筛选出具有稳定...
- 陈德坤刘鹤媛张洪杰桑锋锋周铭岳进华霍宁宁杨雯昱高洋赵燕青
- 文献传递
- 一株山羊伪结核棒状杆菌的分离与鉴定
- 为获得陕西某羊场病羊脓包中的病原菌,以无菌采集的病羊颈部脓肿脓汁为材料,进行细菌分离培养,鉴定分离菌株的形态特征、培养特性、生化特性,挑取分离菌株进行协同溶血试验(cAMP)和16S rRNA基因的PCR扩增,并对序列进...
- 朱伟英霍宁宁桑锋锋张洪杰高洋李言言王毅陈德坤
- 关键词：伪结核棒状杆菌
- 抗山羊IFn-γ单抗的制备及鉴定
- T细胞、NK细胞活化后，会产生干扰素-γ（IFN-γ），IFN-γ能够增强巨噬细胞和中性粒细胞的杀伤活性，具有抗病毒感染、抗肿瘤等生物学活性。血液和炎症部位IFN-γ含量的变化可作为评估机体细胞免疫功能的重要指标。目前未...
- 张洪杰
- 关键词：山羊干扰素-Γ生物学活性乳房炎
- 文献传递
